Diversidade de carrapatos (Acari: Ixodidae) em animais silvestres recebidos pelo Zoológico Municipal de Guarulhos / Tick diversity (Acari: Ixodidae) on wild animals received by the Municipal Zoo of Guarulhos

O Zoológico Municipal de Guarulhos, localizado no estado de São Paulo, recebe e recupera animais silvestres do próprio município e de alguns municípios limítrofes. Entre os anos de 1997 e 2016 foram coletados carrapatos de animais silvestres (Cariama cristata, Buteo brachyurus, Alouatta guariba, Bradypus variegatus, Tamandua tetradactyla, Puma concolor, Cerdocyon thous, Nasua nasua, Mazama gouazoubira, Didelphis aurita, Sphiggurus villosus, Myocastor coypus e Hydrochoerus hydrochaeris) atendidos pelo Zoológico. Foram identificadas as seguintes espécies de carrapatos: Amblyomma aureolatum (Pallas, 1772), Amblyomma calcaratum Neumann, 1899, Amblyomma dubitatum Neumann, 1899, Amblyomma longirostre (Koch, 1844), Amblyomma nodosum Neumann, 1899, Amblyomma parkeri Fonseca e Aragão, 1952, Amblyomma sculptum Berlese, 1888, Amblyomma varium Koch, 1844, Haemaphysalis juxtakochi Cooley, 1946, Ixodes loricatus Neumann, 1899 e Rhipicephalus sanguineus sensu lato (Latreille, 1806). Apesar de todas as associações carrapato-hospedeiro já terem sido previamente relatadas no território brasileiro, o presente estudo registra pela primeira vez um ginandromorfo de A. dubitatum.

The Municipal Zoo of Guarulhos, located in the state of São Paulo, receives and recovers wild animals from the Guarulhos municipality and from some neighboring municipalities. Between the years of 1997 and 2016 ticks were collected on wild animals (Cariama cristata, Buteo brachyurus, Alouatta guariba, Bradypus variegatus, Tamandua tetradactyla, Puma concolor, Cerdocyon thous, Nasua nasua, Mazama gouazoubira, Didelphis aurita, Sphiggurus villosus, Myocastor coypus, and Hydrochoerus hydrochaeris) attended by the Zoo. The following tick species have been identified: Amblyomma aureolatum (Pallas, 1772), Amblyomma calcaratum Neumann, 1899, Amblyomma dubitatum Neumann, 1899, Amblyomma longirostre (Koch, 1844), Amblyomma nodosum Neumann, 1899, Amblyomma parkeri Fonseca and Aragão, 1952, Amblyomma sculptum Berlese, 1888, Amblyomma varium Koch, 1844, Haemaphysalis juxtakochi Cooley, 1946, Ixodes loricatus Neumann, 1899, and Rhipicephalus sanguineus sensu lato (Latreille, 1806). Although all tick-host associations have previously been reported in Brazilian territory, the present study records for the first time a gynandromorph of A. dubitatum.

Diversidade de carrapatos (Acari: Ixodidae) em animais silvestres recebidos pelo Zoológico Municipal de Guarulhos / Tick diversity (Acari: Ixodidae) on wild animals received by the Municipal Zoo of Guarulhos

O Zoológico Municipal de Guarulhos, localizado no estado de São Paulo, recebe e recupera animais silvestres do próprio município e de alguns municípios limítrofes. Entre os anos de 1997 e 2016 foram coletados carrapatos de animais silvestres (Cariama cristata, Buteo brachyurus, Alouatta guariba, Bradypus variegatus, Tamandua tetradactyla, Puma concolor, Cerdocyon thous, Nasua nasua, Mazama gouazoubira, Didelphis aurita, Sphiggurus villosus, Myocastor coypus e Hydrochoerus hydrochaeris) atendidos pelo Zoológico. Foram identificadas as seguintes espécies de carrapatos: Amblyomma aureolatum (Pallas, 1772), Amblyomma calcaratum Neumann, 1899, Amblyomma dubitatum Neumann, 1899, Amblyomma longirostre (Koch, 1844), Amblyomma nodosum Neumann, 1899, Amblyomma parkeri Fonseca e Aragão, 1952, Amblyomma sculptum Berlese, 1888, Amblyomma varium Koch, 1844, Haemaphysalis juxtakochi Cooley, 1946, Ixodes loricatus Neumann, 1899 e Rhipicephalus sanguineus sensu lato (Latreille, 1806). Apesar de todas as associações carrapato-hospedeiro já terem sido previamente relatadas no território brasileiro, o presente estudo registra pela primeira vez um ginandromorfo de A. dubitatum.(AU)

The Municipal Zoo of Guarulhos, located in the state of São Paulo, receives and recovers wild animals from the Guarulhos municipality and from some neighboring municipalities. Between the years of 1997 and 2016 ticks were collected on wild animals (Cariama cristata, Buteo brachyurus, Alouatta guariba, Bradypus variegatus, Tamandua tetradactyla, Puma concolor, Cerdocyon thous, Nasua nasua, Mazama gouazoubira, Didelphis aurita, Sphiggurus villosus, Myocastor coypus, and Hydrochoerus hydrochaeris) attended by the Zoo. The following tick species have been identified: Amblyomma aureolatum (Pallas, 1772), Amblyomma calcaratum Neumann, 1899, Amblyomma dubitatum Neumann, 1899, Amblyomma longirostre (Koch, 1844), Amblyomma nodosum Neumann, 1899, Amblyomma parkeri Fonseca and Aragão, 1952, Amblyomma sculptum Berlese, 1888, Amblyomma varium Koch, 1844, Haemaphysalis juxtakochi Cooley, 1946, Ixodes loricatus Neumann, 1899, and Rhipicephalus sanguineus sensu lato (Latreille, 1806). Although all tick-host associations have previously been reported in Brazilian territory, the present study records for the first time a gynandromorph of A. dubitatum.(AU)

Caracterização citogenética das raças bovinas caracu, junqueira, pantaneira e patuá / Cytogenetical characterization of bovine breeds Caracu, Junqueira, Pantaneiro and Patua

Durante o processo adaptativo às condições locais as raças bovinas europeias introduzidas no Brasil na época da colonização, adquiriram características fisiológicas e fenotípicas que as diferenciaram das raças originais. O presente estudo teve como objetivo comparar a morfologia dos cromossomos sexuais de bovinos de quatro raças, naturalizadas brasileiras, bem como verificar a incidência de anomalias cromossômicas. Foi analisado o cariótipo de 332 animais de quatro raças: Caracu (115 fêmeas e 159 machos), Junqueira (13 fêmeas e 3 machos), Pantaneiro (8 machos) e Patuá (21 fêmeas e 13 machos), utilizando-se a coloração convencional de Giemsa. Os animais das raças estudadas apresentaram o complemento cromossômico normal da espécie (2n=60), constituído de 58 cromossomos autossomos de morfologia acrocêntrica e dois cromossomos sexuais X submetacêntricos nas fêmeas e um X e um Y nos machos. Na raça Caracu, as linhagens selecionadas para corte e para leite foram formadas por indivíduos portadores de cromossomo Y acrocêntrico e submetacêntrico, sendo que a linhagem de corte apresentou maior percentagem de cromossomo Y acrocêntrico (P<0,01). Em duas fêmeas e em dois machos nascidos de partos gemelares da raça Caracu, foi observado quimerismo 60,XX/60,XY. O cariótipo 60,XX/61,XXY foi observado em outra fêmea da mesma raça. Nas outras três raças, nenhuma anomalia cromossômica foi observada. A morfologia do cromossomo Y das raças Pantaneira e Patuá apresentou dimorfismo do cromossomo Y acrocêntrico e submetacêntrico. Na raça Junqueira, apenas a morfologia submetacêntrica foi observada.

During the adaptive process to Brazilian conditions, the native cattle breeds acquired physiological and phenotypic characteristics wich differs them from European breeds, from which they derive. The objectives of present study were to compare the sex chromosomes morphologies between four Brazilian native cattle breeds as well as the incidence of chromosomal abnormalities. The karyotype of 332 animals from four breeds were analyzed: Caracu (115 females and 159 males), Junqueira (13 females and 3 males), Pantaneiro (8 males) and Patua (21 females and 13 males). The Giemsa coloring were used to read the chromosome. All cattle breeds studied showed the normal chromosome (2n=60) consisting of 58 acrocentric autosomes and two submetacentric X chromosomes in females, and one X and one Y in males. In Caracu breed, selected for dairy or beef, it was developed by animals dimorphism carriers of Y chromosome (acrocentric and submetacentric), and the beef bloodlines showed higher percentage of acrocentric Y chromosome. There was 1% significant difference in Chi-Square test. In two females and two male born from twin birth of Caracu breed it was observed chemerism 60, XX/ 60, XY, and in other female from same breed it was observed 60, XX/ 61 XXY. For other three breeds, no chromosomal abnormality was observed. The Y chromosome morphology of the Pantaneiro and Patua breeds showed dimorphism of Y chromosome (submetacentric an acrocentric). In the Junqueira breed, only submetacentric morphology was observed.

Caracterização citogenética das raças bovinas caracu, junqueira, pantaneira e patuá / Cytogenetical characterization of bovine breeds Caracu, Junqueira, Pantaneiro and Patua.

Durante o processo adaptativo às condições locais as raças bovinas europeias introduzidas no Brasil na época da colonização, adquiriram características fisiológicas e fenotípicas que as diferenciaram das raças originais. O presente estudo teve como objetivo comparar a morfologia dos cromossomos sexuais de bovinos de quatro raças, naturalizadas brasileiras, bem como verificar a incidência de anomalias cromossômicas. Foi analisado o cariótipo de 332 animais de quatro raças: Caracu (115 fêmeas e 159 machos), Junqueira (13 fêmeas e 3 machos), Pantaneiro (8 machos) e Patuá (21 fêmeas e 13 machos), utilizando-se a coloração convencional de Giemsa. Os animais das raças estudadas apresentaram o complemento cromossômico normal da espécie (2n=60), constituído de 58 cromossomos autossomos de morfologia acrocêntrica e dois cromossomos sexuais X submetacêntricos nas fêmeas e um X e um Y nos machos. Na raça Caracu, as linhagens selecionadas para corte e para leite foram formadas por indivíduos portadores de cromossomo Y acrocêntrico e submetacêntrico, sendo que a linhagem de corte apresentou maior percentagem de cromossomo Y acrocêntrico (P<0,01). Em duas fêmeas e em dois machos nascidos de partos gemelares da raça Caracu, foi observado quimerismo 60,XX/60,XY. O cariótipo 60,XX/61,XXY foi observado em outra fêmea da mesma raça. Nas outras três raças, nenhuma anomalia cromossômica foi observada. A morfologia do cromossomo Y das raças Pantaneira e Patuá apresentou dimorfismo do cromossomo Y acrocêntrico e submetacêntrico. Na raça Junqueira, apenas a morfologia submetacêntrica foi observada.(AU)

During the adaptive process to Brazilian conditions, the native cattle breeds acquired physiological and phenotypic characteristics wich differs them from European breeds, from which they derive. The objectives of present study were to compare the sex chromosomes morphologies between four Brazilian native cattle breeds as well as the incidence of chromosomal abnormalities. The karyotype of 332 animals from four breeds were analyzed: Caracu (115 females and 159 males), Junqueira (13 females and 3 males), Pantaneiro (8 males) and Patua (21 females and 13 males). The Giemsa coloring were used to read the chromosome. All cattle breeds studied showed the normal chromosome (2n=60) consisting of 58 acrocentric autosomes and two submetacentric X chromosomes in females, and one X and one Y in males. In Caracu breed, selected for dairy or beef, it was developed by animals dimorphism carriers of Y chromosome (acrocentric and submetacentric), and the beef bloodlines showed higher percentage of acrocentric Y chromosome. There was 1% significant difference in Chi-Square test. In two females and two male born from twin birth of Caracu breed it was observed chemerism 60, XX/ 60, XY, and in other female from same breed it was observed 60, XX/ 61 XXY. For other three breeds, no chromosomal abnormality was observed. The Y chromosome morphology of the Pantaneiro and Patua breeds showed dimorphism of Y chromosome (submetacentric an acrocentric). In the Junqueira breed, only submetacentric morphology was observed.(AU)

Citogenética clássica aplicada ao monitoramento de germoplasma bovino / Classic cytogenetic applied to the monitoring of bovine germplasm

Com a evolução das biotecnologias da reprodução, o avanço dos programas de melhoramento genético animal e a necessidade de conservação de raças em risco de extinção, o monitoramento do material genético bovino é de fundamental importância. Entre os meios de monitoramento de germoplasmas, a citogenética constitui uma das ferramentas acessíveis para grande parte dos laboratórios ligados à reprodução animal. O presente trabalho busca mostrar a relevância da citogenética no monitoramento de germoplasma bovino.(AU)

With the evolution of reproduction technologies, advancement of animal breeding programs and the need for conservation of breeds in dangers of extinction, the monitoring of bovine genetic material is fundamental importance. Among the means to monitor these germplasms, the cytogenetic constitutes one of tools available for most laboratories engaged in animal reproduction. The present work shows the relevance of cytogenetics in the monitoring of bovine germplasm.(AU)

Citogenética clássica aplicada ao monitoramento de germoplasma bovino / Classic cytogenetic applied to the monitoring of bovine germplasm

Com a evolução das biotecnologias da reprodução, o avanço dos programas de melhoramento genético animal e a necessidade de conservação de raças em risco de extinção, o monitoramento do material genético bovino é de fundamental importância. Entre os meios de monitoramento de germoplasmas, a citogenética constitui uma das ferramentas acessíveis para grande parte dos laboratórios ligados à reprodução animal. O presente trabalho busca mostrar a relevância da citogenética no monitoramento de germoplasma bovino.

With the evolution of reproduction technologies, advancement of animal breeding programs and the need for conservation of breeds in dangers of extinction, the monitoring of bovine genetic material is fundamental importance. Among the means to monitor these germplasms, the cytogenetic constitutes one of tools available for most laboratories engaged in animal reproduction. The present work shows the relevance of cytogenetics in the monitoring of bovine germplasm.

Identificação de marcas imprintadas de metilação do DNA nos genes SNURF, IGF2 e IGF2R em sagui (Callithrix spp.)

O imprinting genômico é a diferenciação epigenética dos cromossomos parentais. O processo envolve a discriminação dos alelos parentais com marcas de metilação do DNA no contexto da sequência CpG e resulta na expressão monoalélica origem parental-dependente de um conjunto de genes, determinante para o desenvolvimento embrionário normal. A diferenciação epigenética dos cromossomos parentais surgiu com a evolução dos marsupiais para prevenir a partenogênese, a poliploidia e controlar possíveis efeitos deletérios em genes essenciais para o desenvolvimento placentário. A maioria dos estudos sobre imprinting genômico é em roedores e humanos. Em primatas não humanos (chimpanzé, orangotango, macaco rhesus, sagui e galago) os estudos são escaços. O quimerismo, a gemelação e os cuidados aloparentais, características dos saguis (Callithrix spp.), podem impactar os efeitos do imprinting genômico. Neste estudo investigamos a existência de marcas imprintadas de metilação do DNA em tecidos não quiméricos de saguis nos domínios ortólogos das regiões diferencialmente metiladas (DMRs) dos genes SNRPN, SNURF, GRB10, IGF2, IGF2R em humanos. Esses genes estão relacionados ao comportamento, a reprodução, o crescimento e ao deenvolvimento embrionário. Para cada região determinamos o perfil de metilação pontual utilizando digestão enzimática sensível à metilação associada à PCR quantitativa fluorescente e investigamos se metilação é alelo-específica por minissequenciamento de SNPs. Em sangue, para os domínios dos genes SNURF, IGF2 e IGF2R o perfil de metilação foi intermediário (mediana de 50,7%) e a metilação foi alelo-específica, consistente com a ocorrência de marcas imprintadas. Contudo, os perfis variaram desde hipometilado a hipermetilado entre indivíduos e entre diferentes tecidos de um mesmo indivíduo. Concluimos que em sangue de saguis as regiões ortólogas das DMRs SNURF, IGF2, IGF2R possuem marcas imprintadas de metilação do DNA.

Genomic imprinting is the epigenetic differentiation of the parental chromosomes. The process involves discriminating the parental alleles with DNA methylation marks in the context of the dinucleotide CpG sequence and results in the parental-of-origin dependent monoallelic expression of a group of genes that are determinant of the normal embryonic development. The epigenetic differentiation of the parental chromosomes emerged with the evolution of the marsupials to prevent the parthenogenesis, the polyploidy and to control possible deleterious effects in genes that are essential for the development of the placenta. Most studies about genomic imprinting are in rodents and humans. In the nonhuman primates (chimpanzees, urangotangs, rhesus monkeys, marmosets and galagos) the studies are scarce. The chimerism, the twinning and the alloparental care are characteristic features in the marmoset (Callithrix spp.) and they can impact the effects of the genomic imprinting. In this study, we investigate in nonchimeric tissues of marmosets the occurrence of DNA methylation imprinted marks in the ortholog domains of human differentially methylated regions (DMR) of the SNRPN, SNURF, GRB10, IGF2, IGF2R genes. The target genes are related with the behavior, reproduction, growth and embrionary development. For each region, we determined the methylation profile at specific CpG sites, using a methylation-sensitive restriction enzyme method associated to quantitative fluorescent PCR and investigate by single nucleotide primer extension whether the methylation is allele-specific. In blood, for the SNURF, IGF2 and IGF2R ortholog domains, the methylation profile was intermediate (median 50,7%) and the methylation was allele-specific, consistent with the occurrence of imprinting marks. Nevertheless, the profiles varied from hypomethylated to hypermethylated among individuals and between different tissues of the same individual. We conclude that the marmoset ortholog regions of the SNURF, IGF2, IGF2R human DMRs have DNA methylation imprinted marks in peripheral blood.

Occurrence of freemartinism in Santa Ines sheep / Ocorrência de freemartinismo em ovino Santa Inês

This study reports a case of freemartinism of the XX/XY chimera type in a Santa Ines sheep belonging to a property in northeastern Para, Brazil. Discrete masculinization and external genitalia presenting a pseudoprepuce with a hypoplastic penis were observed in vivo. Anatomopathological examination of the internal genitalia showed the absence of a cervix and bilateral presence of an ovary and testis. Variable degrees of epididymal development, accompanied by agenesis of the deferent ducts and other structures arising from the mesonephric ducts, were also observed. Follicular structures, a uterine tubular portion, with marked agenesis and aplasia of the uterine tubes and in some portions of the horns, as well as other parts of paramesonephric structures, were noted in the ovaries. Blood was collected for karyotype analysis and 10 metaphases obtained by short-term lymphocyte culture were examined. Two cell lines were identified: 54,XX (5 cells) and 54,XY (5 cells).

Relata-se um caso de freemartinismo do tipo quimera XX/XY em ovino da raça Santa Inês, proveniente de uma propriedade no Nordeste Paraense (Brasil). In vivo observou-se masculinização discreta, genitália externa apresentando um pseudo-prepúcio com pênis hipoplásico. No exame anatomopatológico verificou-se na genitália interna a ausência de cérvix, ocorrência bilateral de ovário e testículo. Também se observou graus variáveis de desenvolvimento do epidídimo, com considerável agenesia dos ductos deferentes e outras estruturas provenientes dos ductos mesonéfricos. Nos ovários visibilizou-se estruturas foliculares, porção tubular uterina, com maior agenesia e aplasia das tubas uterinas e em algumas porções dos cornos, igualmente como outras partes das estruturas paramesonéfricas. A partir do sangue foi realizado a analise do cariótipo pela analise de dez metáfases, obtidas por cultura temporária de linfócitos, verificando a presença de duas linhagem celulares, sendo 54,XX (5 células) e outra 54,XY (5 células).

Ocorrência de freemartinismo em ovino Santa Inês / Occurrence of freemartinism in Santa Ines sheep

This study reports a case of freemartinism of the XX/XY chimera type in a Santa Ines sheep belonging to a property in northeastern Para, Brazil. Discrete masculinization and external genitalia presenting a pseudoprepuce with a hypoplastic penis were observed in vivo. Anatomopathological examination of the internal genitalia showed the absence of a cervix and bilateral presence of an ovary and testis. Variable degrees of epididymal development, accompanied by agenesis of the deferent ducts and other structures arising from the mesonephric ducts, were also observed. Follicular structures, a uterine tubular portion, with marked agenesis and aplasia of the uterine tubes and in some portions of the horns, as well as other parts of paramesonephric structures, were noted in the ovaries. Blood was collected for karyotype analysis and 10 metaphases obtained by short-term lymphocyte culture were examined. Two cell lines were identified: 54,XX (5 cells) and 54,XY (5 cells).(AU)

Relata-se um caso de freemartinismo do tipo quimera XX/XY em ovino da raça Santa Inês, proveniente de uma propriedade no Nordeste Paraense (Brasil). In vivo observou-se masculinização discreta, genitália externa apresentando um pseudo-prepúcio com pênis hipoplásico. No exame anatomopatológico verificou-se na genitália interna a ausência de cérvix, ocorrência bilateral de ovário e testículo. Também se observou graus variáveis de desenvolvimento do epidídimo, com considerável agenesia dos ductos deferentes e outras estruturas provenientes dos ductos mesonéfricos. Nos ovários visibilizou-se estruturas foliculares, porção tubular uterina, com maior agenesia e aplasia das tubas uterinas e em algumas porções dos cornos, igualmente como outras partes das estruturas paramesonéfricas. A partir do sangue foi realizado a analise do cariótipo pela analise de dez metáfases, obtidas por cultura temporária de linfócitos, verificando a presença de duas linhagem celulares, sendo 54,XX (5 células) e outra 54,XY (5 células).(AU)

iengenetic analysis / Análise citogenética de bovinos da raça Pardo-Suíça

At 1985, a Brown Swiss herd from the Institute of Animal Science and Pastures, APTA/ SAA was cytogenetically analyzed and 1/29 Robertsonian translocation was observed. Such anomaly is related to fertility reduction. Quimeric abnormality such as 60,XX/60,XY in freemartin females. This study aimed to evaluate the incidence of cromossomic abnormalities in Brown Swiss animals, descending form herd karyotyped earlier. After 25 years, 127 animals (97 females and 30 males) from this herd were karyotyped by metaphases obtained from blood lymphocyte cultures. The typical diploid number 2n=60, 58 acrocentric and two X submetacentric chromosomes were confirmed in 94 females and in 27 males the sexual complement X and Y, both submetacentric, although from different sizes. Four females from gemelar parturition whit males were karyotyped. Three of them presented quimerism 60,XX/60,XY (one with 25.8% of female cells (XX) and 74.2% male cells (XY); one another with 10% of cells XX e 90% of XY and the third with 50% of each type) showing genital masculinization, diagnosed as freemartism and discarded from herd. Two hundred and five cells were analyzed from another female twins and only 60,XX cells were found, diagnosed as normal. His sister also were normal (60,XY). The another three males were also analyzed from gemelar heterosexual parturition, with karyotype 60,XX/60,XY. Cytogenetic analysis

Em 1985 o plantel de bovinos da raça Pardo-Suíça do Instituto de Zootecnia, da Secretaria da Agricultura e Abastecimento de São Paulo (SAA/SP), APTA, foi analisado citogeneticamente e verificado a presença de translocação Robertsoniana 1/29, anomalia está relacionada com a redução da fertilidade. Neste plantel foi detectado também quimerismo 60,XX/60,XY em fêmeas freemartin e em macho gêmeo. O presente estudo teve como objetivo analisar a incidência de anomalias cromossômicas, em animais da raça Pardo-Suíça, descendentes daqueles cariotipados anteriormente. Após 25 anos, 127 bovinos sendo 97 fêmeas e 30 machos, progênies do plantel anterior foram cariotipados através de metáfases obtidas de cultura de linfócitos de sangue periférico. O número diplóide típico dos bovinos de 2n=60 e o cariótipo constituído de 58 autossomos acrocêntricos e dois cromossomos X submetacêntricos foram confirmados em 94 fêmeas, e em 27 machos o complemento sexual formado por um cromossomo X e um Y, ambos submetacêntricos, mas de tamanhos diferentes. Quatro fêmeas nascidas de partos gemelares com machos foram cariotipadas, três apresentaram quimerismo 60,XX/60,XY em suas células sanguíneas (uma com 25,8% de células femininas (XX) e 74,2% de células masculinas (XY); outra 10% de células XX e 90% de XY e a terceira 50% de células de cada tipo), masculinização dos órgãos genitais, sendo diagnosticada com

60,XX/60,XY chimerism and freemartinism in heterosexual bovine twins / Quimerismo 60,XX/60,XY e freemartismo em bovinos nascidos de partos gemelares heterossexuais

In this study, 42 heterosexual bovine twins (10 co-borned couples, 19 females, and three males) were cytogenetically evaluated. These animals from several bovine breeds, mainly Holstein (17) and Brown Swiss (11), were herded in particular farms located in different regions of the State of São Paulo and from the Institute of Animal Science and Pastures (IZ), Nova Odessa, SP. Cytogenetic analysis were assessed in metaphases from cultured lymphocytes. The 60,XX/ 60XY chimerism were observed 90.5% of the animals and it varied from 1.8 to 90.2% of female cells. From all chimeric animals 3,806 cells were evaluated, among them 1,268 were XX cells (33.3%) and 2,538 were XY cells (66.7%). In nine co-borned couples, female cell rates ranged from 24.8 to 21.5% and male cell rates from 75.2 and 78.5% in males and females, respectively. In one couple, there was no evidence of cell exchange between twins with female presenting only female cells and male only male cells. Three adult females were slaughtered and evaluated. Their reproductive tracts presented several degrees of masculinization, including clitoris enlargement, vagina, cervix, uterus and uterine tube subdevelopment, presence of vesicular gland and gonads ovotestis. One of these three females presented cervix absence. Among the 29 evaluated female, three presented the 60,XX karyotype. Two of them were normal females who delivery a

Foram estudados citogeneticamente 42 bovinos nascidos de partos gemelares heterossexuais, sendo 10 casais, 19 fêmeas e três machos de várias raças, principalmente, Holandesa (17) e Pardo Suíça (11), pertencentes ao Instituto de Zootecnia-APTA, Nova Odessa, SP, e a produtores particulares de outras regiões do Estado. A análise citogenética foi realizada em metáfases obtidas após culturas de linfócitos. Em 90,5% (38) dos animais, foi observado o quimerismo 60,XX/ 60,XY com 1,8 a 90,2% de células femininas. Considerando todos os animais quiméricos, foram analisadas 3806 células, sendo 1268 XX (33,3%) e 2538 XY (66,7%). Em nove casais, as freqüências de células femininas foram 24,8 e 21,5% e as de masculinas de 75,2 e 78,5% para fêmeas e machos, respectivamente. Em um casal, não foi evidenciada troca de células, e a fêmea apresentou somente células de linhagem feminina e o macho, de linhagem masculina. Três das fêmeas avaliadas eram adultas e foram abatidas. Seus aparelhos genitais apresentaram vários graus de masculinização como: aumento do clitóris, subdesenvolvimento da vagina, da cérvix (ausente em uma fêmea), do útero, das tubas uterinas, presença de glândulas vesiculares e gônadas ovotestis, (testículos e pênis rudimentares foram encontrados em uma fêmea). O cariótipo 60,XX foi observado em apenas três fêmeas das 29 analisadas: duas delas apresentaram todas as características

Produção de quimeras embrionárias bovinas mediante a agregação de embriões diploides (Bos indicus) e tetraploides (Bos indicus)

No quimerismo por agregação, células de embriões oriundos de fertilizações distintas se distribuem, aleatoriamente, para formar um único indivíduo. Entretanto, a formação de embriões tetraploides (4n), por eletrofusão, e o posterior quimerismo com um embrião diploide (2n) deve resultar em um embrião quimérico, porém com massa celular interna (MCI) não aleatória, isto é, exclusivamente 2n. Desta forma, a agregação de um embrião zebuíno (4n, genótipo termorresistente) com um taurino (2n, genótipo termossensível) resultaria em uma MCI exclusivamente ?taurina?, porém com o trofectoderma (futuro elemento extraembrionário, isto é, o córion) de maior composição zebuína, podendo constituir um modelo para estudos de adaptação - durante a gestação - deste embrião/feto em clima tropical. O objetivo do presente trabalho foi padronizar a produção de embriões 4n da raça Nelore (Bos indicus) bem como o quimerismo por agregação com embriões mestiço Bos taurus (2n) com Bos indicus (4n). Oócitos de vacas Nelore provenientes de abatedouro foram maturados, fertilizados com sêmen de touros Nelore ou Holandês Preto e Branco e cultivados em meio SOF. Embriões da raça Nelore, em estágio de 2 células (30 h pós-inseminação, hpi) e com o eixo interblastômeros bem definido, foram selecionados para o procedimento de eletrofusão (equipamento ECM 830-BTX, Harvard Apparatus) com o intuito de produzir embriões tetraploides. Para este procedimento, foram testados alguns parâmetros, de acordo com o número de pulsos (1 ou 2), voltagem (0,40; 0,50; 0,75; 1,0; 1,4; 5,0 kV/cm) e duração do eletrochoque (20; 25; 50; 60 ?s). Embriões zebuínos 4n, formados após a eletrofusão, e embriões mestiços taurinos 2n, ambos em estágio de 8 a 16 células (72 hpi), foram submetidos a tratamentos com protease...

The embryonic chimeras production by aggregation allows embryonic cells from two distinct fertilizations to be randomly distributed to compose a single individual. However, the formation of tetraploid embryo (4n) by electrofusion and its subsequent chimerism with a diploid embryo (2n) should result in a chimeric conceptus, whose inner cell mass (ICM) would be entirely 2n. Hence, the aggregation of a zebu embryo (4n, thermotolerant) with a European breed embryo (2n, thermosensitive or ?taurine?) would result in an exclusively taurine ICM, but the trophectoderm (future extraembryonic components, i.e. chorion) would be mostly from zebu embryo, which could support taurine embryo/fetus in a different way - during pregnancy - under tropical environment. The aim of this study was to standardize the production of 4n Nelore embryos (Bos indicus) and the production of embryonic chimeras by aggregation of crossbred Bos taurus (2n) with Bos indicus (4n) embryos. Nelore cows ovaries were collected from abattoir and oocytes were obtained, matured, fertilized with semen from Nelore or Holstein bulls, and cultured in SOF (synthetic oviduct fluid). Two-cell stage Nelore embryos (30 hours post insemination or hpi), with a clearly visible interblastomeric axis, were selected for electrofusion procedure (ECM 830-BTX, Harvard Apparatus) to produce tetraploid embryos. For this purpose, some parameters were tested according to the number of pulses (1 or 2), voltage (40, 50, 75, 100, 140, 500 V) and time length of electroshock (20, 25, 50, 60 ?s). Nelore tetraploid embryos produced after electrofusion and diploid crossbred taurine embryos, both on 8 to 16-cells stage (72 hpi) were subjected to protease treatment to remove the zona pellucida, and subsequently treated with the agglutinant agent...

Sexual polyploidization in red clover

Because sexual polyploidization broadens genetic basis and supply plant breeders with more variability for the selection process, it can be useful in red clover breeding. This paper reports results of three crossing cycles, starting from a parental generation of tetraploid red clover plants (female parent), and diploids from the Quiñiqueli cultivar, selected for production of more than 1% of giant pollen grains (male parent) aiming to obtain tetraploid plants to be used in red clover breeding programs. Crosses in the next generations were performed by mutual cross-pollinations. Chromosome number chimerism and high pollen sterility were detected in F1, F2 and F3, but there was a trend towards increasing seed production and seed viability along the generations, probably due to successful competition between fertile and sterile gametes. The identification of fertile triploids, as well as their recurrent formation along the generations, indicates that triploid block is not complete in red clover, and that triploids may be successfully used as a bridge for the production of sexual polyploids.

Porque a poliploidização sexual amplia a base genética e proporciona aos melhoristas maior variabilidade para o processo de seleção, ela pode ser uma ferramenta útil ao melhoramento de trevo vermelho. Com o objetivo de obter plantas tetraplóides que possam ser utilizadas em programas de melhoramento de trevo vermelho, este trabalho relata resultados de três ciclos de cruzamentos, partindo de uma população parental de plantas tetraplóides de trevo vermelho, como genitores femininos, e de diplóides da cultivar Quiñiqueli, selecionados para produção de mais de 1% de grãos de pólen gigantes, como genitores masculinos. Nas outras gerações, os cruzamentos foram realizados por polinizações cruzadas mútuas. Quimerismo para número cromossômico e alta esterilidade de pólen foram detectados em F1 , F2 e F3, mas houve uma tendência para aumento da produção e viabilidade das sementes ao longo das gerações, provavelmente devido à competição bem sucedida entre gametas férteis e estéreis. A identificação de triplóides férteis, assim como sua formação recorrente ao longo das gerações, indica que o bloco triplóide não é completo em trevo vermelho e que triplóides podem ser utilizados com sucesso para a produção de poliplóides sexuais.

Sexual polyploidization in red clover

Because sexual polyploidization broadens genetic basis and supply plant breeders with more variability for the selection process, it can be useful in red clover breeding. This paper reports results of three crossing cycles, starting from a parental generation of tetraploid red clover plants (female parent), and diploids from the Quiñiqueli cultivar, selected for production of more than 1% of giant pollen grains (male parent) aiming to obtain tetraploid plants to be used in red clover breeding programs. Crosses in the next generations were performed by mutual cross-pollinations. Chromosome number chimerism and high pollen sterility were detected in F1, F2 and F3, but there was a trend towards increasing seed production and seed viability along the generations, probably due to successful competition between fertile and sterile gametes. The identification of fertile triploids, as well as their recurrent formation along the generations, indicates that triploid block is not complete in red clover, and that triploids may be successfully used as a bridge for the production of sexual polyploids.

Porque a poliploidização sexual amplia a base genética e proporciona aos melhoristas maior variabilidade para o processo de seleção, ela pode ser uma ferramenta útil ao melhoramento de trevo vermelho. Com o objetivo de obter plantas tetraplóides que possam ser utilizadas em programas de melhoramento de trevo vermelho, este trabalho relata resultados de três ciclos de cruzamentos, partindo de uma população parental de plantas tetraplóides de trevo vermelho, como genitores femininos, e de diplóides da cultivar Quiñiqueli, selecionados para produção de mais de 1% de grãos de pólen gigantes, como genitores masculinos. Nas outras gerações, os cruzamentos foram realizados por polinizações cruzadas mútuas. Quimerismo para número cromossômico e alta esterilidade de pólen foram detectados em F1 , F2 e F3, mas houve uma tendência para aumento da produção e viabilidade das sementes ao longo das gerações, provavelmente devido à competição bem sucedida entre gametas férteis e estéreis. A identificação de triplóides férteis, assim como sua formação recorrente ao longo das gerações, indica que o bloco triplóide não é completo em trevo vermelho e que triplóides podem ser utilizados com sucesso para a produção de poliplóides sexuais.

1/29 Robertsonian translocation and chimaerism in brown Swiss cattle / Translocação Robertisoniana 1/29 e quimerismo em bovinos da raça suíça parda

Blood samples of 63 head of Brown Swiss cattle born in Nova Odessa, State of São Paulo, Brazil, took from 1980 to 1983 and 17 imported from the United States were submitted to a cytogenetic analysis through the chromosome metaphasic culture of lymphocytes. Five animals showed abnormalities in their chromosomes. Three animals (one male and two females freemartins) of heterosexual twins showed chimerism (60,XX/60,XY). Two females, one born in Brazil and one imported showed 1/29 Robertsonian translocation.

Amostras de sangue periférico de 80 bovinos (45 fêmeas e 18 machos nascidos no país e 17 fêmeas importadas dos EUA), da raça suíça parda, foram submetidas a exame de cariótipo, de 1980 a 1983, no Instituto de Zootecnia, Nova Odessa, SP, através de cromossomos metafásicos de cultura de linfócitos. Anomalias cromossômicas foram encontradas em cinco animais: três nascidos de partos gemelares heterossexuais (um macho e duas fêmeas freemartins) apresentaram quimerismo 60,XX/60,XY; uma fêmea nascida no país (crioula) e outra importada apresentaram translocação robertsoniana 1/29.

Cytogenetic studies in cattle of the tropical and mantiqueira crossbreeds / Estudos citogenéticos em bovinos do tipo tropical leiteiro e ecótipo matiqueira

Cytogentic studies were performed in 114 bovines Tropical and Mantiqueira breeds. In 33 bulls of the Tropical crossbreed, the cytogenetic analysis showed two types of Y chromosome. The submetacentric chromosome was present in 28 animals, and the acrocentyric one was present in 5 ones. In samples from 69 bulls of Mantiqueira there was only submetacentric chromosome. In one of the two (Tropical crossbreed) females studied it was observed quimerism 60,XX/60,XY.

Foram realizadas análises citogenéticas em amostras de dois plantéis de bovinos oriundos de cruzamentos para formação do tipo Tropical Leiteiro e do ecótipo Mantiqueira. No Tropical Leiteiro, os exames citogenéticos de 33 reprodutores e duas fêmeas evidenciaram que 28 machos apresentaram o cromossomo Y submetacêntrico e, em 5 machos, o referido cromossomo era acrocêntrico. Em uma das fêmeas foi detectado quimerismo 60,XX/6O,XY. No ecótipo Mantiqueira, as análises de amostras dos 69 machos estudados revelaram apenas cromossomo Y submetacêntrico, enquanto todas as 10 fêmeas apresentaram cariótipos normais.

1/29 Robertsonian translocation and chimaerism in brown Swiss cattle / Translocação Robertisoniana 1/29 e quimerismo em bovinos da raça suíça parda

Blood samples of 63 head of Brown Swiss cattle born in Nova Odessa, State of São Paulo, Brazil, took from 1980 to 1983 and 17 imported from the United States were submitted to a cytogenetic analysis through the chromosome metaphasic culture of lymphocytes. Five animals showed abnormalities in their chromosomes. Three animals (one male and two females freemartins) of heterosexual twins showed chimerism (60,XX/60,XY). Two females, one born in Brazil and one imported showed 1/29 Robertsonian translocation.

Amostras de sangue periférico de 80 bovinos (45 fêmeas e 18 machos nascidos no país e 17 fêmeas importadas dos EUA), da raça suíça parda, foram submetidas a exame de cariótipo, de 1980 a 1983, no Instituto de Zootecnia, Nova Odessa, SP, através de cromossomos metafásicos de cultura de linfócitos. Anomalias cromossômicas foram encontradas em cinco animais: três nascidos de partos gemelares heterossexuais (um macho e duas fêmeas freemartins) apresentaram quimerismo 60,XX/60,XY; uma fêmea nascida no país (crioula) e outra importada apresentaram translocação robertsoniana 1/29.

Cytogenetic studies in cattle of the tropical and mantiqueira crossbreeds / Estudos citogenéticos em bovinos do tipo tropical leiteiro e ecótipo matiqueira

Cytogentic studies were performed in 114 bovines Tropical and Mantiqueira breeds. In 33 bulls of the Tropical crossbreed, the cytogenetic analysis showed two types of Y chromosome. The submetacentric chromosome was present in 28 animals, and the acrocentyric one was present in 5 ones. In samples from 69 bulls of Mantiqueira there was only submetacentric chromosome. In one of the two (Tropical crossbreed) females studied it was observed quimerism 60,XX/60,XY.

Foram realizadas análises citogenéticas em amostras de dois plantéis de bovinos oriundos de cruzamentos para formação do tipo Tropical Leiteiro e do ecótipo Mantiqueira. No Tropical Leiteiro, os exames citogenéticos de 33 reprodutores e duas fêmeas evidenciaram que 28 machos apresentaram o cromossomo Y submetacêntrico e, em 5 machos, o referido cromossomo era acrocêntrico. Em uma das fêmeas foi detectado quimerismo 60,XX/6O,XY. No ecótipo Mantiqueira, as análises de amostras dos 69 machos estudados revelaram apenas cromossomo Y submetacêntrico, enquanto todas as 10 fêmeas apresentaram cariótipos normais.

iengenetic analysis / Análise citogenética de bovinos da raça Pardo-Suíça

At 1985, a Brown Swiss herd from the Institute of Animal Science and Pastures, APTA/ SAA was cytogenetically analyzed and 1/29 Robertsonian translocation was observed. Such anomaly is related to fertility reduction. Quimeric abnormality such as 60,XX/60,XY in freemartin females. This study aimed to evaluate the incidence of cromossomic abnormalities in Brown Swiss animals, descending form herd karyotyped earlier. After 25 years, 127 animals (97 females and 30 males) from this herd were karyotyped by metaphases obtained from blood lymphocyte cultures. The typical diploid number 2n=60, 58 acrocentric and two X submetacentric chromosomes were confirmed in 94 females and in 27 males the sexual complement X and Y, both submetacentric, although from different sizes. Four females from gemelar parturition whit males were karyotyped. Three of them presented quimerism 60,XX/60,XY (one with 25.8% of female cells (XX) and 74.2% male cells (XY); one another with 10% of cells XX e 90% of XY and the third with 50% of each type) showing genital masculinization, diagnosed as freemartism and discarded from herd. Two hundred and five cells were analyzed from another female twins and only 60,XX cells were found, diagnosed as normal. His sister also were normal (60,XY). The another three males were also analyzed from gemelar heterosexual parturition, with karyotype 60,XX/60,XY. Cytogenetic analysis

Em 1985 o plantel de bovinos da raça Pardo-Suíça do Instituto de Zootecnia, da Secretaria da Agricultura e Abastecimento de São Paulo (SAA/SP), APTA, foi analisado citogeneticamente e verificado a presença de translocação Robertsoniana 1/29, anomalia está relacionada com a redução da fertilidade. Neste plantel foi detectado também quimerismo 60,XX/60,XY em fêmeas freemartin e em macho gêmeo. O presente estudo teve como objetivo analisar a incidência de anomalias cromossômicas, em animais da raça Pardo-Suíça, descendentes daqueles cariotipados anteriormente. Após 25 anos, 127 bovinos sendo 97 fêmeas e 30 machos, progênies do plantel anterior foram cariotipados através de metáfases obtidas de cultura de linfócitos de sangue periférico. O número diplóide típico dos bovinos de 2n=60 e o cariótipo constituído de 58 autossomos acrocêntricos e dois cromossomos X submetacêntricos foram confirmados em 94 fêmeas, e em 27 machos o complemento sexual formado por um cromossomo X e um Y, ambos submetacêntricos, mas de tamanhos diferentes. Quatro fêmeas nascidas de partos gemelares com machos foram cariotipadas, três apresentaram quimerismo 60,XX/60,XY em suas células sanguíneas (uma com 25,8% de células femininas (XX) e 74,2% de células masculinas (XY); outra 10% de células XX e 90% de XY e a terceira 50% de células de cada tipo), masculinização dos órgãos genitais, sendo diagnosticada com

60,XX/60,XY chimerism and freemartinism in heterosexual bovine twins / Quimerismo 60,XX/60,XY e freemartismo em bovinos nascidos de partos gemelares heterossexuais

In this study, 42 heterosexual bovine twins (10 co-borned couples, 19 females, and three males) were cytogenetically evaluated. These animals from several bovine breeds, mainly Holstein (17) and Brown Swiss (11), were herded in particular farms located in different regions of the State of São Paulo and from the Institute of Animal Science and Pastures (IZ), Nova Odessa, SP. Cytogenetic analysis were assessed in metaphases from cultured lymphocytes. The 60,XX/ 60XY chimerism were observed 90.5% of the animals and it varied from 1.8 to 90.2% of female cells. From all chimeric animals 3,806 cells were evaluated, among them 1,268 were XX cells (33.3%) and 2,538 were XY cells (66.7%). In nine co-borned couples, female cell rates ranged from 24.8 to 21.5% and male cell rates from 75.2 and 78.5% in males and females, respectively. In one couple, there was no evidence of cell exchange between twins with female presenting only female cells and male only male cells. Three adult females were slaughtered and evaluated. Their reproductive tracts presented several degrees of masculinization, including clitoris enlargement, vagina, cervix, uterus and uterine tube subdevelopment, presence of vesicular gland and gonads ovotestis. One of these three females presented cervix absence. Among the 29 evaluated female, three presented the 60,XX karyotype. Two of them were normal females who delivery a

Foram estudados citogeneticamente 42 bovinos nascidos de partos gemelares heterossexuais, sendo 10 casais, 19 fêmeas e três machos de várias raças, principalmente, Holandesa (17) e Pardo Suíça (11), pertencentes ao Instituto de Zootecnia-APTA, Nova Odessa, SP, e a produtores particulares de outras regiões do Estado. A análise citogenética foi realizada em metáfases obtidas após culturas de linfócitos. Em 90,5% (38) dos animais, foi observado o quimerismo 60,XX/ 60,XY com 1,8 a 90,2% de células femininas. Considerando todos os animais quiméricos, foram analisadas 3806 células, sendo 1268 XX (33,3%) e 2538 XY (66,7%). Em nove casais, as freqüências de células femininas foram 24,8 e 21,5% e as de masculinas de 75,2 e 78,5% para fêmeas e machos, respectivamente. Em um casal, não foi evidenciada troca de células, e a fêmea apresentou somente células de linhagem feminina e o macho, de linhagem masculina. Três das fêmeas avaliadas eram adultas e foram abatidas. Seus aparelhos genitais apresentaram vários graus de masculinização como: aumento do clitóris, subdesenvolvimento da vagina, da cérvix (ausente em uma fêmea), do útero, das tubas uterinas, presença de glândulas vesiculares e gônadas ovotestis, (testículos e pênis rudimentares foram encontrados em uma fêmea). O cariótipo 60,XX foi observado em apenas três fêmeas das 29 analisadas: duas delas apresentaram todas as características