Canine atopic dermatitis: systemic immunomodulatory protocol based on clinical phenotype / Dermatite atópica canina: protocolos imunomodulatórios sistêmicos baseados no fenótipo clínico

Canine atopic dermatitis (cAD) is a multifactorial allergic disease associated with immune dysfunction and abnormal skin barrier. Several immunological mediators play a role in its pathogenesis. Such molecules are produced by the activation of T helper lymphocytes (Th) through polarization to Th1 and/or Th2, which contributes to different lesion patterns. Acute lesions are mediated by an activation of the Th2 cytokine axis, which clinically induces erythema and pruritus. Conversely, in chronic injuries a mixed immune response of Th1/Th2 cytokines occurs, leading to hyperpigmented and lichenified skin. The clinical understanding of these patterns and the mode of action of immunomodulators are crucial for the best clinical management of the atopic patient. In this context, this review discussed the role of the immune response and the immunomodulatory drugs in dogs with atopic dermatitis and suggested a therapeutic protocol based on clinical phenotype. Based on the evidences showed in this review, it is considered appropriate to use immunomodulatory drugs that target cytokine spectrum related with the clinical phenotype of cAD.

A dermatite atópica canina (DAC) é uma doença alérgica multifatorial associada à disfunção imune e barreira cutânea anormal. Vários mediadores imunológicos desempenham um papel na sua patogênese. Tais moléculas são produzidas pela ativação de linfócitos T auxiliares (Th) por meio da polarização para Th1 e/ou Th2, o que contribui para diferentes padrões de lesão. Lesões agudas são mediadas pela ativação do eixo de citocinas Th2, que clinicamente induz eritema e prurido. Por outro lado, nas lesões crônicas ocorre uma resposta imune mista de citocinas Th1/Th2, levando à pele hiperpigmentada e liquenificada. O entendimento clínico desses padrões e o modo de ação dos imunomoduladores são cruciais para o melhor manejo clínico do paciente atópico. Esta revisão visa discutir o papel da resposta imune e das drogas imunomoduladoras em cães com dermatite atópica e sugerir um protocolo terapêutico baseado no fenótipo clínico. Baseado nas evidências apresentadas nessa revisão, é considerado apropriado utilizar drogas imunomoduladoras que abrangem o espectro de citocinas relacionadas ao fenótipo clínico da DAC.

Impact of persistent bovine viral diarrhea virus infection on indicators of innate and adaptive immune function in holstein calves and cows / Impacto da infecção persistente pelo vírus da diarreia viral bovina sobre indicadoresde função imunológica inata e adaptativa em bezerras e vacas holandesas

ABSTRACT: We evaluated some indicators of innate and humoral immune response in persistently infected (PI) Holstein calves and cows from 1 to 36 months of age matched with controls from the same herd. The effects were cataloged by grouping animals into the following age groups: <12 months, 13 to 24 months, and 25 to 36 months of age. Blood samples were collected once from each animal to measure total serum protein, haptoglobin, and neutralizing antibodies titers induced by respiratory virus vaccination. Total serum protein (g/dL) was lowest in PI calves younger until 24 months old, while haptoglobin concentration was higher in PI cattle. The serum neutralizing titers against BVDV and BRSV were lower in all PI calves and cattle than in controls. PI cattle have a high serum concentration of haptoglobin, and its possible dysregulated innate immune response appears to impact the efficacy of their adaptative immune responses, resulting in poor vaccine responsiveness.

RESUMO: O objetivo desta pesquisa foi avaliar alguns indicadores da resposta imune inata e humoral em bezerros a vacas persistentemente infectadas, entre um a 36 meses de idade, pareados com controles oriundos de um mesmo rebanho. As variáveis respostas foram avaliadas agrupando-se os animais nos seguintes grupos etários: < 12 meses, 13 a 24 meses, 25 a 36 meses de idade. Amostras sanguíneas foram coletadas para mensurar as concentrações séricas de proteína, haptoglobina e anticorpos neutralizantes induzidos pela vacinação contra as viroses respiratórias. Os teores de proteína sérica total (g/dL) foram menores nos animais persistentemente infectados (PI) jovens até 24 meses de idade, enquanto que a concentração de haptoglobina foi maior nos animais PI mais velhos (25 a 36 meses). Os títulos de anticorpos neutralizantes contra o BVDV e BRSV foi menor nos animais PIs independentemente da idade, comparado com o grupo controle. Os valores reduzidos ou nulos de anticorpos contra as viroses respiratórias, combinado com a evidência de resposta imune inata desregulada, contribui com a susceptibilidade dos animais PIs para as infecções secundárias.

Impact of persistent bovine viral diarrhea virus infection on indicators of innate and adaptive immune function in holstein calves and cows / Impacto da infecção persistente pelo vírus da diarreia viral bovina sobre indicadores de função imunológica inata e adaptativa em bezerras e vacas holandesas

We evaluated some indicators of innate and humoral immune response in persistently infected (PI) Holstein calves and cows from 1 to 36 months of age matched with controls from the same herd. The effects were cataloged by grouping animals into the following age groups: <12 months, 13 to 24 months, and 25 to 36 months of age. Blood samples were collected once from each animal to measure total serum protein, haptoglobin, and neutralizing antibodies titers induced by respiratory virus vaccination. Total serum protein (g/dL) was lowest in PI calves younger until 24 months old, while haptoglobin concentration was higher in PI cattle. The serum neutralizing titers against BVDV and BRSV were lower in all PI calves and cattle than in controls. PI cattle have a high serum concentration of haptoglobin, and its possible dysregulated innate immune response appears to impact the efficacy of their adaptative immune responses, resulting in poor vaccine responsiveness.

O objetivo desta pesquisa foi avaliar alguns indicadores da resposta imune inata e humoral em bezerros a vacas persistentemente infectadas, entre um a 36 meses de idade, pareados com controles oriundos de um mesmo rebanho. As variáveis respostas foram avaliadas agrupando-se os animais nos seguintes grupos etários: < 12 meses, 13 a 24 meses, 25 a 36 meses de idade. Amostras sanguíneas foram coletadas para mensurar as concentrações séricas de proteína, haptoglobina e anticorpos neutralizantes induzidos pela vacinação contra as viroses respiratórias. Os teores de proteína sérica total (g/dL) foram menores nos animais persistentemente infectados (PI) jovens até 24 meses de idade, enquanto que a concentração de haptoglobina foi maior nos animais PI mais velhos (25 a 36 meses). Os títulos de anticorpos neutralizantes contra o BVDV e BRSV foi menor nos animais PIs independentemente da idade, comparado com o grupo controle. Os valores reduzidos ou nulos de anticorpos contra as viroses respiratórias, combinado com a evidência de resposta imune inata desregulada, contribui com a susceptibilidade dos animais PIs para as infecções secundárias.

Evaluation of three alum-precipitated Aeromonas hydrophila vaccines administered to Labeo rohita, Cirrhinus mrigala and Ctenopharyngodon idella: immunokinetics, immersion challenge and histopathology

Abstract Aeromonas hydrophila is a cause of infectious disease outbreaks in carp species cultured in South Asian countries including Pakistan. This bacterium has gained resistance to a wide range of antibiotics and robust preventive measures are necessary to control its spread. No prior use of fish vaccines has been reported in Pakistan. The present study aims to develop and evaluate inactivated vaccines against local strain of A. hydrophila in Pakistan with alum-precipitate as adjuvant. The immunogenic potential of vaccine was evaluated in two Indian major carps (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) and a Chinese carp (Grass carp: Ctenopharyngodon idella). Fish were vaccinated intraperitoneally followed by a challenge through immersion. Fish with an average age of 4-5 months were randomly distributed in three vaccinated groups with three vaccine concentrations of 108, 109 and 1010 colony forming unit (CFU)/ml and a control group. Fixed dose of 0.1ml was applied to each fish on 1st day and a booster dose at 15 days post-vaccination (DPV). Blood samples were collected on 14, 28, 35, 48 and 60 DPV to determine antibody titers in blood serum using compliment fixation test (CFT). Fish were challenged at 60 DPV with infectious A. hydrophila with 108 CFU/ml through immersion. Significantly higher levels of antibody titers were observed from 28 DPV in all vaccinated groups as compared to those in the control group. In challenge experiment the average RPS (relative percent survivability) was 71% for groups vaccinated with 109 and 1010 CFU/ml and 86% for 108 CFU/ml. Vaccine with 108 CFU/ml induced highest immune response followed by 109 and 1010 CFU/ml. The immune response of L. rohita and C. idella was better than that of C. mrigala. In general, normal histopathology was observed in different organs of vaccinated fish whereas minor deteriorative changes were found in fish vaccinated with higher concentrations of the vaccine.

Resumo Aeromonas hydrophila é uma causa de surtos de doenças infecciosas em espécies de carpas cultivadas em países do sul da Ásia, incluindo o Paquistão. Essa bactéria ganhou resistência a uma ampla gama de antibióticos, e medidas preventivas robustas são necessárias para controlar sua disseminação. Nenhum uso anterior de vacinas para peixes foi relatado no Paquistão. O presente estudo tem como objetivo desenvolver e avaliar vacinas inativadas contra cepa local de A. hydrophila no Paquistão com precipitado de alúmen como adjuvante. O potencial imunogênico da vacina foi avaliado em duas carpas principais indianas (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) e uma carpa chinesa (Grass Carp: Ctenopharyngodon idella). Os peixes foram vacinados por via intraperitoneal, seguido de um desafio por imersão. Peixes com idade média de 4-5 meses foram distribuídos aleatoriamente em três grupos vacinados com três concentrações de vacina de 108, 109 e 1010 unidades formadoras de colônias (UFC) / ml e um grupo de controle. Foi aplicada dose fixa de 0,1ml em cada peixe no 1º dia e dose de reforço 15 dias pós-vacinação (DPV). Amostras de sangue foram coletadas em 14, 28, 35, 48 e 60 DPV para determinar os títulos de anticorpos no soro sanguíneo usando o teste de fixação de elogio (CFT). Os peixes foram desafiados a 60 DPV com infecciosa A. hydrophila com 108 CFU / ml por imersão. Níveis significativamente mais elevados de títulos de anticorpos foram observados em 28 DPV em todos os grupos vacinados, em comparação com aqueles no grupo de controle. Na experiência de desafio, o RPS médio (sobrevivência percentual relativa) foi de 71% para os grupos vacinados com 109 e 1010 CFU / ml e 86% para 108 CFU / ml. A vacina com 108 UFC / ml induziu a maior resposta imune seguida por 109 e 1010 UFC / ml. A resposta imune de L. rohita e C. idella foi melhor do que a de C. mrigala. Em geral, histopatologia normal foi observada em diferentes órgãos de peixes vacinados, enquanto pequenas alterações deteriorantes foram encontradas no grupo de controle e nos peixes vacinados com concentrações mais altas da vacina.

Impact of dietary leaf extracts of Black pepper Piper nigrum L. on the growth, hematological and immunological parameters of Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultured in glass aquaria

Abstract A study was conducted to evaluate the effect of Piper nigrum (black pepper) leaf extract on on the growth performance, proximate composition, hematological parameters, and immune response of Labeo rohita fingerlings with an average weight of 22.14 ± 0.98g. Aftrer acclimation for two weeks, fish (n=25) were randomly selected and placed in four glass aquaria (T0, T1, T2 and T3) at constant water temperature (30.0 ± 1.0 °C), pH (7.50 ± 0.5) and total hardness (200 ± 2.0 mgL,-1) for a period of 12 weeks, with three replicates each. Fish were fed with P. nigrum leaf extract supplemented feed @ 0.0%, 1.0%, 2.0% and 3.0% in T0, T1,T2 and T3, respectively. At the end of experiment, five fish were randomly selected from each aquaria for proximate composition, gut and skin microbial load, hematological parameters. Total proteins, albumins, and globulins were also recorded to evaluate immunological memory. The result revealed that fish in T2 showed better growth performance with an average weight gain of 56.11 ± 0.51 g. Thus, it had been concluded that Piper nigrum, a medicinal plant, can also be used to enhance the growth performance and immune response of Labeo rohita as attractive alternatives against antibiotics and vaccines and has shown no negative side effects on fish health as well as on its environment.

Resumo Um estudo foi conduzido para avaliar o efeito do extrato da folha de Piper nigrum (pimenta-do-reino) sobre o desempenho de crescimento, composição centesimal, parâmetros hematológicos e resposta imune de alevinos de Labeo rohita com peso médio de 22,14 ± 0,98g. Após aclimatação por duas semanas, os peixes (n = 25) foram selecionados aleatoriamente e colocados em quatro aquários de vidro (T0, T1, T2 e T3) em temperatura constante da água (30,0 ± 1,0 °C), pH (7,50 ± 0,5) e dureza total (200 ± 2,0 mgL-1) por um período de 12 semanas, com três repetições cada. Os peixes foram alimentados com ração suplementada com extrato de folha de P. nigrum @ 0,0%, 1,0%, 2,0% e 3,0% em T0, T1, T2 e T3, respectivamente. Ao final do experimento, cinco peixes foram selecionados aleatoriamente de cada aquário para composição centesimal, carga microbiana intestinal e cutânea e parâmetros hematológicos. Proteínas totais, albuminas e globulinas também foram registradas para avaliar a memória imunológica. O resultado revelou que os peixes em T2 apresentaram melhor desempenho de crescimento com ganho de peso médio de 56,11 ± 0,51 g. Assim, concluiu-se que Piper nigrum, uma planta medicinal, também pode ser usado para melhorar o desempenho de crescimento e resposta imunológica de Labeo rohita como alternativas atraentes contra antibióticos e vacinas e não mostrou efeitos colaterais negativos na saúde dos peixes, bem como sobre seu ambiente.

Phagocytotic activity and gene expression of leukocytes isolated from Astyanax lacustris / Atividade fagocítica e expressão gênica de leucócitos isolados de Astyanax lacustris

The constant intensification of aquaculture has considerable increased the stress levels of farmed fish and, consequently, the number and intensity of diseases outbreaks. Thus, studies on fish immune response, especially regarding the interaction of fish leukocytes with potential pathogens and xenobiotics are of great importance in order to develop new prophylactic and curative strategies. We isolated leukocytes from the head kidney of Astyanax lacustris­an important Neotropical fish species for aquaculture and a potential model for Neotropical aquaculture research­using a Percoll centrifugation protocol. The isolated leukocytes were incubated with lipopolysaccharide (LPS), and the expression of genes IL-1ß, IL-8, LysC, and LysG were measured. We assessed the phagocytotic activity of leukocytes using Congo red-dyed yeast, a novel and cost-effective protocol that has been developed in this study. The isolated leukocytes responded to LPS induction, exhibiting strong IL-1ß and IL-8 upregulation, two of the most important pro-inflammatory interleukins for vertebrates immune reponse. The optimal concentration of yeast for the phagocytic assay was 106 cells mL-1, resulting in acceptable phagocytic capacity (PC) but without excess of yeasts during the counting process, ensuring a high precision and accuracy of the method. To the best of our knowledge, the present study is the first to investigate the in vitro gene expression and phagocytic activity of leukocytes isolated from A. lacustris. Our findings will serve as a reference for future studies on the immunology and toxicology of Neotropical fish.

A constante intensificação da aquicultura tem aumentado consideravelmente os níveis de estresse dos animais cultivados e, consequentemente, o número e a intensidade dos surtos de doenças. Logo, estudos sobre a resposta imune dos peixes, especialmente relacionados com a interação dos leucócitos de peixes com potenciais patógenos e xenobióticos, são de grande importância para o desenvolvimento de novas estratégias profiláticas e curativas. No presente trabalho, nós obtivemos sucesso ao isolar leucócitos oriundos do rim cranial de Astyanax lacustris ­ uma importante espécie de peixe Neotropical para a aquicultura e um modelo em potencial para pesquisas em aquicultura Neotropical ­ usando um protocolo de centrifugação com Percoll. Os leucócitos isolados foram incubados com lipossacarídeo (LPS) e, a expressão dos genes IL-1ß, IL-8, LysC, e LysG foi avaliada. Ainda, um novo protocolo para avaliação da atividade fagocítica dos leucócitos utilizando leveduras coradas com Vermelho Congo foi estabelecido. Os leucócitos isolados responderam à indução com LPS, exibindo up regulation dos genes IL-1ß e IL-8, duas das interleucinas pró-inflamatórias mais importantes para a resposta imune de vertebrados. Além do mais, a concentração ótima de leveduras para a avaliação da fagocitose foi de 106 células mL-1, resultando em uma capacidade fagocítica (PC) aceitável, mas sem excesso de leveduras durante o processo de contagem, garantindo maior precisão e eficácia do método. Até o presente momento, o presente estudo é o primeiro a investigar a expressão gênica e atividade fagocítica de leucócitos isolados de A. lacustris através da abordagem in vitro. Ainda, nossos resultados servirão de referência para futuros estudos em imunologia e toxicologia de peixes Neotropicais.

In-house serological ELISA as a leishmaniosis diagnostic test: development and applications in canines from the western border of Brazil / ELISA "in house" para o diagnóstico de leishmaniose: desenvolvimento e aplicação em caninos da fronteira Oeste do Brasil

ABSTRACT: Leishmaniosis is a great public health problem affecting both humans and animals. The disease is caused by the protozoan Leishmania spp., which has a complex cycle involving a phlebotomine vector. The ELISA test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) along with a chromatographic immunoassay was defined by the Brazil Health Ministry as the confirmatory screening protocol in 2011. Uruguaiana city is 630 km away from Porto Alegre, which makes it difficult to send samples and diagnose leishmaniasis, as well as receive quick results. In view of this, the present study evaluated an in-house indirect ELISA method compared to indirect immunofluorescence assay (IFA) and dual-path platform chromatographic immunoassay (DPP-BioManguinhos®) for the detection of an immune response to Leishmania spp. in canine species. The serological evaluation included 48 canines from the western border of Brazil (Uruguaiana and Barra do Quaraí city). Among the 48 canine samples tested, 18 were positive when using the ELISA technique, 19 were positive with IFA, and 17 were positive with rapid test DPP®. The ELISA technique showed a sensitivity/specificity of 83.3%/86.7% when compared to IFA and 100%/96.8% compared to DPP®. The present study showed a prevalence of 37.5%, demonstrating that the infection circulates in the studied population. It can be concluded that the ELISA technique was valuable for use in field conditions when performing screening tests in endemic areas.

RESUMO: A leishmaniose é um grande problema de saúde pública que afeta tanto humanos quanto animais. A doença é causada pelo protozoário Leishmania spp., que possui um ciclo complexo envolvendo um vetor flebotomíneo. O teste ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), juntamente com um imunoensaio cromatográfico, foi definido pelo Ministério da Saúde do Brasil como protocolo de triagem confirmatória em 2011. A cidade de Uruguaiana fica a 630 km de Porto Alegre, o que dificulta o envio de amostras e o diagnóstico da leishmaniose, além da demora para obter os resultados. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar um método de ELISA indireto in-house comparado ao ensaio de imunofluorescência indireta (IFA) e imunoensaio cromatográfico de plataforma de dupla via (DPP-BioManguinhos®) para a detecção de uma resposta imune contra Leishmania spp. na espécie canina. A avaliação sorológica incluiu 48 caninos da fronteira oeste do Brasil (cidade de Uruguaiana e Barra do Quaraí). Das 48 amostras caninas testadas, 18 foram positivas na técnica de ELISA, 19 foram positivas com IFA e 17 foram positivas com o teste rápido DPP®. A técnica de ELISA apresentou sensibilidade/especificidade de 83,3%/86,7% quando comparada ao IFA e 100%/96,8% em relação ao DPP®. O presente estudo apresentou prevalência de 37,5%, demonstrando que a infecção circula na população estudada. Pode-se concluir que a técnica de ELISA foi valiosa para uso em condições de campo na realização de testes de triagem em áreas endêmicas.

Evaluation of three alum-precipitated Aeromonas hydrophila vaccines administered to Labeo rohita, Cirrhinus mrigala and Ctenopharyngodon idella: immunokinetics, immersion challenge and histopathology / Avaliação de três vacinas de Aeromonas hydrophila precipitadas com alúmen administradas a Labeo rohita, Cirrhinus mrigala e Ctenopharyngodon idella: imunocinética, desafio de imersão e histopatologia

Aeromonas hydrophila is a cause of infectious disease outbreaks in carp species cultured in South Asian countries including Pakistan. This bacterium has gained resistance to a wide range of antibiotics and robust preventive measures are necessary to control its spread. No prior use of fish vaccines has been reported in Pakistan. The present study aims to develop and evaluate inactivated vaccines against local strain of A. hydrophila in Pakistan with alum-precipitate as adjuvant. The immunogenic potential of vaccine was evaluated in two Indian major carps (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) and a Chinese carp (Grass carp: Ctenopharyngodon idella). Fish were vaccinated intraperitoneally followed by a challenge through immersion. Fish with an average age of 4-5 months were randomly distributed in three vaccinated groups with three vaccine concentrations of 108, 109 and 1010 colony forming unit (CFU)/ml and a control group. Fixed dose of 0.1ml was applied to each fish on 1st day and a booster dose at 15 days post-vaccination (DPV). Blood samples were collected on 14, 28, 35, 48 and 60 DPV to determine antibody titers in blood serum using compliment fixation test (CFT). Fish were challenged at 60 DPV with infectious A. hydrophila with 108 CFU/ml through immersion. Significantly higher levels of antibody titers were observed from 28 DPV in all vaccinated groups as compared to those in the control group. In challenge experiment the average RPS (relative percent survivability) was 71% for groups vaccinated with 109 and 1010 CFU/ml and 86% for 108 CFU/ml. Vaccine with 108 CFU/ml induced highest immune response followed by 109 and 1010 CFU/ml. The immune response of L. rohita and C. idella was better than that of C. mrigala. In general, normal histopathology was [...].

Aeromonas hydrophila é uma causa de surtos de doenças infecciosas em espécies de carpas cultivadas em países do sul da Ásia, incluindo o Paquistão. Essa bactéria ganhou resistência a uma ampla gama de antibióticos, e medidas preventivas robustas são necessárias para controlar sua disseminação. Nenhum uso anterior de vacinas para peixes foi relatado no Paquistão. O presente estudo tem como objetivo desenvolver e avaliar vacinas inativadas contra cepa local de A. hydrophila no Paquistão com precipitado de alúmen como adjuvante. O potencial imunogênico da vacina foi avaliado em duas carpas principais indianas (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) e uma carpa chinesa (Grass Carp: Ctenopharyngodon idella). Os peixes foram vacinados por via intraperitoneal, seguido de um desafio por imersão. Peixes com idade média de 4-5 meses foram distribuídos aleatoriamente em três grupos vacinados com três concentrações de vacina de 108, 109 e 1010 unidades formadoras de colônias (UFC) / ml e um grupo de controle. Foi aplicada dose fixa de 0,1ml em cada peixe no 1º dia e dose de reforço 15 dias pós-vacinação (DPV). Amostras de sangue foram coletadas em 14, 28, 35, 48 e 60 DPV para determinar os títulos de anticorpos no soro sanguíneo usando o teste de fixação de elogio (CFT). Os peixes foram desafiados a 60 DPV com infecciosa A. hydrophila com 108 CFU / ml por imersão. Níveis significativamente mais elevados de títulos de anticorpos foram observados em 28 DPV em todos os grupos vacinados, em comparação com aqueles no grupo de controle. Na experiência de desafio, o RPS médio (sobrevivência percentual relativa) foi de 71% para os grupos vacinados com 109 e 1010 CFU / ml e 86% para 108 CFU / ml. A vacina com 108 UFC / ml induziu a maior resposta imune seguida por 109 e 1010 UFC / ml. A resposta imune de L. rohita e C. idella foi melhor do que a de C. mrigala. Em geral, histopatologia normal foi observada em diferentes [...].

Evaluation of three alum-precipitated Aeromonas hydrophila vaccines administered to Labeo rohita, Cirrhinus mrigala and Ctenopharyngodon idella: immunokinetics, immersion challenge and histopathology / Avaliação de três vacinas de Aeromonas hydrophila precipitadas com alúmen administradas a Labeo rohita, Cirrhinus mrigala e Ctenopharyngodon idella: imunocinética, desafio de imersão e histopatologia

Abstract Aeromonas hydrophila is a cause of infectious disease outbreaks in carp species cultured in South Asian countries including Pakistan. This bacterium has gained resistance to a wide range of antibiotics and robust preventive measures are necessary to control its spread. No prior use of fish vaccines has been reported in Pakistan. The present study aims to develop and evaluate inactivated vaccines against local strain of A. hydrophila in Pakistan with alum-precipitate as adjuvant. The immunogenic potential of vaccine was evaluated in two Indian major carps (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) and a Chinese carp (Grass carp: Ctenopharyngodon idella). Fish were vaccinated intraperitoneally followed by a challenge through immersion. Fish with an average age of 4-5 months were randomly distributed in three vaccinated groups with three vaccine concentrations of 108, 109 and 1010 colony forming unit (CFU)/ml and a control group. Fixed dose of 0.1ml was applied to each fish on 1st day and a booster dose at 15 days post-vaccination (DPV). Blood samples were collected on 14, 28, 35, 48 and 60 DPV to determine antibody titers in blood serum using compliment fixation test (CFT). Fish were challenged at 60 DPV with infectious A. hydrophila with 108 CFU/ml through immersion. Significantly higher levels of antibody titers were observed from 28 DPV in all vaccinated groups as compared to those in the control group. In challenge experiment the average RPS (relative percent survivability) was 71% for groups vaccinated with 109 and 1010 CFU/ml and 86% for 108 CFU/ml. Vaccine with 108 CFU/ml induced highest immune response followed by 109 and 1010 CFU/ml. The immune response of L. rohita and C. idella was better than that of C. mrigala. In general, normal histopathology was observed in different organs of vaccinated fish whereas minor deteriorative changes were found in fish vaccinated with higher concentrations of the vaccine.

Resumo Aeromonas hydrophila é uma causa de surtos de doenças infecciosas em espécies de carpas cultivadas em países do sul da Ásia, incluindo o Paquistão. Essa bactéria ganhou resistência a uma ampla gama de antibióticos, e medidas preventivas robustas são necessárias para controlar sua disseminação. Nenhum uso anterior de vacinas para peixes foi relatado no Paquistão. O presente estudo tem como objetivo desenvolver e avaliar vacinas inativadas contra cepa local de A. hydrophila no Paquistão com precipitado de alúmen como adjuvante. O potencial imunogênico da vacina foi avaliado em duas carpas principais indianas (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) e uma carpa chinesa (Grass Carp: Ctenopharyngodon idella). Os peixes foram vacinados por via intraperitoneal, seguido de um desafio por imersão. Peixes com idade média de 4-5 meses foram distribuídos aleatoriamente em três grupos vacinados com três concentrações de vacina de 108, 109 e 1010 unidades formadoras de colônias (UFC) / ml e um grupo de controle. Foi aplicada dose fixa de 0,1ml em cada peixe no 1º dia e dose de reforço 15 dias pós-vacinação (DPV). Amostras de sangue foram coletadas em 14, 28, 35, 48 e 60 DPV para determinar os títulos de anticorpos no soro sanguíneo usando o teste de fixação de elogio (CFT). Os peixes foram desafiados a 60 DPV com infecciosa A. hydrophila com 108 CFU / ml por imersão. Níveis significativamente mais elevados de títulos de anticorpos foram observados em 28 DPV em todos os grupos vacinados, em comparação com aqueles no grupo de controle. Na experiência de desafio, o RPS médio (sobrevivência percentual relativa) foi de 71% para os grupos vacinados com 109 e 1010 CFU / ml e 86% para 108 CFU / ml. A vacina com 108 UFC / ml induziu a maior resposta imune seguida por 109 e 1010 UFC / ml. A resposta imune de L. rohita e C. idella foi melhor do que a de C. mrigala. Em geral, histopatologia normal foi observada em diferentes órgãos de peixes vacinados, enquanto pequenas alterações deteriorantes foram encontradas no grupo de controle e nos peixes vacinados com concentrações mais altas da vacina.

Evaluation of three alum-precipitated Aeromonas hydrophila vaccines administered to Labeo rohita, Cirrhinus mrigala and Ctenopharyngodon idella: immunokinetics, immersion challenge and histopathology / Avaliação de três vacinas de Aeromonas hydrophila precipitadas com alúmen administradas a Labeo rohita, Cirrhinus mrigala e Ctenopharyngodon idella: imunocinética, desafio de imersão e histopatologia

Aeromonas hydrophila is a cause of infectious disease outbreaks in carp species cultured in South Asian countries including Pakistan. This bacterium has gained resistance to a wide range of antibiotics and robust preventive measures are necessary to control its spread. No prior use of fish vaccines has been reported in Pakistan. The present study aims to develop and evaluate inactivated vaccines against local strain of A. hydrophila in Pakistan with alum-precipitate as adjuvant. The immunogenic potential of vaccine was evaluated in two Indian major carps (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) and a Chinese carp (Grass carp: Ctenopharyngodon idella). Fish were vaccinated intraperitoneally followed by a challenge through immersion. Fish with an average age of 4-5 months were randomly distributed in three vaccinated groups with three vaccine concentrations of 108, 109 and 1010 colony forming unit (CFU)/ml and a control group. Fixed dose of 0.1ml was applied to each fish on 1st day and a booster dose at 15 days post-vaccination (DPV). Blood samples were collected on 14, 28, 35, 48 and 60 DPV to determine antibody titers in blood serum using compliment fixation test (CFT). Fish were challenged at 60 DPV with infectious A. hydrophila with 108 CFU/ml through immersion. Significantly higher levels of antibody titers were observed from 28 DPV in all vaccinated groups as compared to those in the control group. In challenge experiment the average RPS (relative percent survivability) was 71% for groups vaccinated with 109 and 1010 CFU/ml and 86% for 108 CFU/ml. Vaccine with 108 CFU/ml induced highest immune response followed by 109 and 1010 CFU/ml. The immune response of L. rohita and C. idella was better than that of C. mrigala. In general, normal histopathology was [...].(AU)

Aeromonas hydrophila é uma causa de surtos de doenças infecciosas em espécies de carpas cultivadas em países do sul da Ásia, incluindo o Paquistão. Essa bactéria ganhou resistência a uma ampla gama de antibióticos, e medidas preventivas robustas são necessárias para controlar sua disseminação. Nenhum uso anterior de vacinas para peixes foi relatado no Paquistão. O presente estudo tem como objetivo desenvolver e avaliar vacinas inativadas contra cepa local de A. hydrophila no Paquistão com precipitado de alúmen como adjuvante. O potencial imunogênico da vacina foi avaliado em duas carpas principais indianas (Rohu: Labeo rohita, Mori: Cirrhinus mrigala) e uma carpa chinesa (Grass Carp: Ctenopharyngodon idella). Os peixes foram vacinados por via intraperitoneal, seguido de um desafio por imersão. Peixes com idade média de 4-5 meses foram distribuídos aleatoriamente em três grupos vacinados com três concentrações de vacina de 108, 109 e 1010 unidades formadoras de colônias (UFC) / ml e um grupo de controle. Foi aplicada dose fixa de 0,1ml em cada peixe no 1º dia e dose de reforço 15 dias pós-vacinação (DPV). Amostras de sangue foram coletadas em 14, 28, 35, 48 e 60 DPV para determinar os títulos de anticorpos no soro sanguíneo usando o teste de fixação de elogio (CFT). Os peixes foram desafiados a 60 DPV com infecciosa A. hydrophila com 108 CFU / ml por imersão. Níveis significativamente mais elevados de títulos de anticorpos foram observados em 28 DPV em todos os grupos vacinados, em comparação com aqueles no grupo de controle. Na experiência de desafio, o RPS médio (sobrevivência percentual relativa) foi de 71% para os grupos vacinados com 109 e 1010 CFU / ml e 86% para 108 CFU / ml. A vacina com 108 UFC / ml induziu a maior resposta imune seguida por 109 e 1010 UFC / ml. A resposta imune de L. rohita e C. idella foi melhor do que a de C. mrigala. Em geral, histopatologia normal foi observada em diferentes [...].(AU)

Performance of the tetra-primer PCR technique compared to PCR-RFLP in the search for rs12979860 (C/T) and rs8099917 (T/G) single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the IFNL4 gene / Desempenho da técnica tetra-primer PCR em relação a PCR-RFLP na pesquisa de polimorfismos de nucleotídeos únicos (SNPs) rs12979860 (C/T) e rs8099917 (T/G) no gene IFNL4

Single nucleotide polymorphisms (SNPs, rs12979860 e rs8099917) in the Interferon Lambda 4 gene (IFNL4, formerly IFNL3and/or IL28B) has been associated with failure in the innate immune response, sustained virological response in hepatitis C, and HTLV-1-associated myelopathy (HAM) development. To search for these polymorphisms several methodologies can be employed, such as sequencing, real-time or quantitative polymerase chain reaction (qPCR), restriction fragment length polymorphism analysis in PCR products (PCR-RFLP), and tetra-primer PCR. The present study compared the performance of the tetra-primer PCR in relation to the PCR-RFLP, both optimized in the Research HTLV Laboratory of the Center of Immunology of Instituto Adolfo Lutz in São Paulo. One hundred DNA samples obtained from patients of STD/Aids Reference Centre in São Paulo, previously analyzed for IL28B SNPs by PCR-RFLP were selected for analysis, after confirming that they represent all IL28B SNPs patterns described in the literature. The results obtained showed concordance between the PCR-RFLP and the tetra-primer PCR SNPs results, and because of the low cost, easy to perform, and minor employment of biological specimen and reagents, the tetra-primer PCR is of choice to be used in routine. (AU)

Polimorfismos de nucleotídeos únicos (single nucleotide polymorphisms, SNPs rs12979860 e rs8099917) no gene que codifica o Interferon Lambda 4 (IFNL4, antigamente IFNL3 e/ou IL28B) têm sido associados às falhas na resposta imune inata e resposta virológica sustentada na hepatite C, e a mielopatia associada ao HTLV-1 (HTLV-1-associated myelopathy, HAM). A pesquisa destes polimorfismos pode empregar diversas metodologias: sequenciamento, reação em cadeia da polimerase em tempo real ou quantitativa (quantitative polymerase chain reaction, qPCR), análise de fragmentos de restrição enzimática em produtos de PCR (restriction fragment length polymorphism in PCR products, PCR-RFLP) e a tetra-primer PCR. Este estudo comparou o desempenho da tetra-primer PCR em relação a PCR-RFLP, ambas otimizadas no Laboratório de Pesquisa em HTLV do Centro de Imunologia do Instituto Adolfo Lutz de São Paulo. Foram selecionadas 100 amostras de DNA obtidas de pacientes do Centro de Referência e Treinamento em DST/Aids de São Paulo cujos SNPs na IL28B foram anteriormente determinados por PCR-RFLP e representaram todos os perfis descritos em literatura. Os resultados obtidos mostraram concordância entre elas, e pelo fato da tetra-primer PCR ter menor custo, ser de fácil execução, empregar menos tempo, insumos e material biológico, é a técnica de escolha para uso em rotina. (AU)

The in vitro effects of n-3 fatty acids on immune response regulation of bovine ex vivo endometrial explants / Os efeitos in vitro dos ácidos graxos n-3 na regulação da resposta imune de explantes endometriais bovinos ex vivo

Fatty acids are considered metabolic intermediaries, although new facts indicate they also work as signaling molecules with different roles in the immune response. Based on that, in this study, we investigated the anti-inflammatory effects of n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFAs) as eicosapentaenoic acid (EPA), docosahexaenoic acid (DHA), and α-linolenic acid (LNA) in ex vivo bovine endometrial explants. For this, two groups were formed: (1) LPS-challenged and (2) control, both to evaluate the accumulation of proinflammatory cytokines as interleukin 1ß (IL1B) and interleukin 6 (IL6). To develop the study, bovine female reproductive tracts from non-pregnant Angus heifers without evidence of reproductive diseases were selected. Endometrial explants were processed and treated for 24 h with EPA, DHA, and LNA in five different concentrations (0µM, 50µM, 100 µM, 200µM and 400 µM) and then, challenged with LPS for 24 h. Supernatants were collected to evaluate the concentration of IL1B and IL6 by ELISA. Explants treated with EPA from control groups reduced the concentrations of ILB (200µM) and IL6 (400 µM), and IL6 (50 µM; 100 µM) from the LPS-challenged group. DHA decreased the accumulation of IL1B and IL6 at 200 µM on explants from the LPS-challenged group, and 200 µM reduced IL6 from the control group. In contrast, explants treated with LNA only reduced the accumulation of IL1B to 400µM (from both groups). In conclusion, the EPA acid is the best anti-inflammatory option to decrease the concentration of both pro-inflammatory cytokines (IL1B and IL6) from LPS-challenged and control groups in bovine endometrial explants; while LNA evidence to be the last option to promote an anti-inflammatory response.(AU)

Os ácidos graxos são considerados intermediários metabólicos, embora novos fatos indiquem que eles também atuem como moléculas sinalizadoras com diferentes papéis na resposta imune. Dessa forma, este estudo investigou os efeitos anti-inflamatórios de ácidos graxos poliinsaturados n-3 (PUFAs) como ácido eicosapentaenóico (EPA), ácido docosahexaenóico (DHA) e ácido α-linolênico (LNA) em explantes endometriais ex vivo de bovinos. Para tal, o experimento foi divido em dois grupos: (1) Desafiado-LPS e (2) Controle, para que então pudesse avaliar o acúmulo de citocinas pró-inflamatórias como interleucina 1ß (IL1B) e interleucina 6 (IL6). Foram selecionados tratos reprodutivos de fêmeas bovinas de novilhas Angus não prenhes sem evidência de doenças reprodutivas. Explantes endometriais foram processados e tratados por 24h com EPA, DHA e LNA em cinco concentrações diferentes (0µM, 50µM, 100 µM, 200µM e 400 µM) e, em seguida, desafiados com LPS por mais 24h. Os sobrenadantes foram colhidos para avaliar a concentração de IL1B e IL6 pelo teste de ELISA. Os explantes tratados com EPA dos grupos de controle reduziram as concentrações de ILB (200 µM) e IL6 (400 µM) e no grupo desafiado com LPS houve redução das concentrações de IL6 (50 µM; 100 µM). Nos explantes do grupo desafiado com LPS, o DHA diminuiu o acúmulo de IL1B e IL6 nas concentrações de 200 µM, e no grupo controle reduziu IL6 nas concentrações de 200 µM, enquanto os explantes tratados com LNA reduziram apenas o acúmulo de IL1B a 400 µM (de ambos os grupos). Em conclusão, o ácido EPA provou ser a melhor opção anti-inflamatória para diminuir a concentração de ambas as citocinas pró-inflamatórias (IL1B e IL6) de grupos desafiados com LPS e controle em explantes endometriais bovinos; enquanto o LNA evidencia ser a opção menos viável para promover uma resposta anti-inflamatória.(AU)

Comparative analysis of various sources of selenium on the growth performance and antioxidant status in broilers under heat stress

Abstract The supplementation of Selenium-enriched probiotics is effective in reducing oxidative stress and maintaining meat quality stability in broiler chicken especially under heat stress. An experimental study was conducted to perform Comparative analysis of Selenium yeast with inorganic Se in broilers under heat stress. A total of 120 broilers chicks of one day were assigned to 4 groups each consisting 30 chicks fed on same basal diet but different selenium sources. The basal diet of group D1 was not supplemented with Se source (Negative control), group D2 basal diet was supplemented with inorganic selenium (Sodium selenite 0.22mg/Kg starter phase and 0.15mg/Kg finisher phase), group D3 basal diet was supplemented with commercially available organic selenium (Seleno-methionine 0.22mg/Kg starter phase and 0.15mg/Kg finisher phase) and group D4 basal diet was supplemented with self-developed organic selenium (Se-enriched yeast 0.22mg/Kg starter phase and 0.15mg/Kg finisher phase). The performance parameters i.e. feed intake (FI), live body weight (BW) and FCR were not significantly (p>0.05) effected by selenium supplementation in the starter phase but were significantly (p 0.05) effected in the finisher phase. Selenium supplementation significantly (p 0.05) effected serum Se level in different supplemented groups. Higher serum Se value (58.20±0.06) was recorded in D4 group. Similarly significantly lower selenium value was recorded for D4 and higher was recorded for D1 (11.36±0.08). However lower serum Paraoxonase (PON) value was recorded for D4 (13.24±0.01) and higher for D1 (13.33±0.03). Comparatively self-developed Se enriched yeast increased the Se accumulation and improved antioxidant system. Glutathione peroxidase (GPx) was found higher in D4 (12.333±0.03) followed by D3, D2 and D1 respectively. Whereas superoxide dismutase (SOD) was significantly lower (p 0.05) in D4 (0.1437±0.003) followed by D3 (0.1457±0.002). Selenium supplementation increased the birds survival rate. Birds fed on Se enriched yeast showed higher Se deposition and better antioxidant capacity as compared to other sources of selenium. Se-enriched yeast displayed an improved result on Se deposition in tissues, and oxidative capacity, meat tenderness and immune response level as compared to other sources of selenium.

Resumo A suplementação de probióticos enriquecidos com selênio é eficaz na redução do estresse oxidativo e na manutenção da estabilidade da qualidade da carne em frangos de corte, especialmente sob estresse por calor. Um estudo experimental foi conduzido para realizar uma análise comparativa da levedura selênio com o Se inorgânico em frangos de corte sob estresse térmico. Um total de 120 pintos de um dia foi dividido em 4 grupos, cada um consistindo de 30 pintos alimentados com a mesma dieta basal, mas com diferentes fontes de selênio. A dieta basal do grupo D1 não foi suplementada com fonte de Se (controle negativo), a dieta basal do grupo D2 foi suplementada com selênio inorgânico (selenito de sódio 0,22 mg / kg fase inicial e 0,15 mg / kg fase finalizadora), a dieta basal do grupo D3 foi suplementada com selênio orgânico disponível comercialmente (fase inicial de seleno-metionina 0,22 mg / kg e fase finalizadora de 0,15 mg / kg) e a dieta basal do grupo D4 foi suplementada com selênio orgânico autodesenvolvido (fermento enriquecido com Se 0,22 mg / kg fase inicial e 0,15 mg / kg fase finalizadora). Os parâmetros de desempenho, ou seja, consumo de ração (FI), peso corporal vivo (PC) e FCR não foram significativamente (p > 0,05) afetados pela suplementação de selênio na fase inicial, mas foram significativamente (p 0,05) afetados na fase final. A suplementação de selênio afetou significativamente (p 0,05) o nível de Se sérico em diferentes grupos suplementados. O maior valor de Se sérico (58,20 ± 0,06) foi registrado no grupo D4. Da mesma forma, valor de selênio significativamente menor foi registrado para D4 e maior foi registrado para D1 (11,36 ± 0,08). No entanto, um valor mais baixo de Paraoxonase (PON) sérica foi registrado para D4 (13,24 ± 0,01) e mais alto para D1 (13,33 ± 0,03). A levedura enriquecida com Se comparativamente autodesenvolvida aumentou o acúmulo de Se e melhorou o sistema antioxidante. A glutationa peroxidase (GPx) foi encontrada maior em D4 (12,333 ± 0,03) seguido por D3, D2 e D1 respectivamente. Enquanto a superóxido dismutase (SOD) foi significativamente menor (p 0,05) em D4 (0,1437 ± 0,003) seguido por D3 (0,1457 ± 0,002). A suplementação de selênio aumentou a taxa de sobrevivência da ave. Aves alimentadas com levedura enriquecida com Se apresentaram maior deposição de Se e melhor capacidade antioxidante em comparação com outras fontes de selênio. A levedura enriquecida com Se apresentou um resultado melhorado na deposição de Se nos tecidos, capacidade oxidativa, maciez da carne e nível de resposta imune em comparação com outras fontes de selênio.

Impact of dietary leaf extracts of Black pepper Piper nigrum L. on the growth, hematological and immunological parameters of Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultured in glass aquaria / Impacto de extratos de folhas da dieta de pimenta-do-reino Piper nigrum L. sobre o crescimento, parâmetros hematológicos e imunológicos de Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultivado em aquários de vidro

Abstract A study was conducted to evaluate the effect of Piper nigrum (black pepper) leaf extract on on the growth performance, proximate composition, hematological parameters, and immune response of Labeo rohita fingerlings with an average weight of 22.14 ± 0.98g. Aftrer acclimation for two weeks, fish (n=25) were randomly selected and placed in four glass aquaria (T0, T1, T2 and T3) at constant water temperature (30.0 ± 1.0 °C), pH (7.50 ± 0.5) and total hardness (200 ± 2.0 mgL,-1) for a period of 12 weeks, with three replicates each. Fish were fed with P. nigrum leaf extract supplemented feed @ 0.0%, 1.0%, 2.0% and 3.0% in T0, T1,T2 and T3, respectively. At the end of experiment, five fish were randomly selected from each aquaria for proximate composition, gut and skin microbial load, hematological parameters. Total proteins, albumins, and globulins were also recorded to evaluate immunological memory. The result revealed that fish in T2 showed better growth performance with an average weight gain of 56.11 ± 0.51 g. Thus, it had been concluded that Piper nigrum, a medicinal plant, can also be used to enhance the growth performance and immune response of Labeo rohita as attractive alternatives against antibiotics and vaccines and has shown no negative side effects on fish health as well as on its environment.

Resumo Um estudo foi conduzido para avaliar o efeito do extrato da folha de Piper nigrum (pimenta-do-reino) sobre o desempenho de crescimento, composição centesimal, parâmetros hematológicos e resposta imune de alevinos de Labeo rohita com peso médio de 22,14 ± 0,98g. Após aclimatação por duas semanas, os peixes (n = 25) foram selecionados aleatoriamente e colocados em quatro aquários de vidro (T0, T1, T2 e T3) em temperatura constante da água (30,0 ± 1,0 °C), pH (7,50 ± 0,5) e dureza total (200 ± 2,0 mgL-1) por um período de 12 semanas, com três repetições cada. Os peixes foram alimentados com ração suplementada com extrato de folha de P. nigrum @ 0,0%, 1,0%, 2,0% e 3,0% em T0, T1, T2 e T3, respectivamente. Ao final do experimento, cinco peixes foram selecionados aleatoriamente de cada aquário para composição centesimal, carga microbiana intestinal e cutânea e parâmetros hematológicos. Proteínas totais, albuminas e globulinas também foram registradas para avaliar a memória imunológica. O resultado revelou que os peixes em T2 apresentaram melhor desempenho de crescimento com ganho de peso médio de 56,11 ± 0,51 g. Assim, concluiu-se que Piper nigrum, uma planta medicinal, também pode ser usado para melhorar o desempenho de crescimento e resposta imunológica de Labeo rohita como alternativas atraentes contra antibióticos e vacinas e não mostrou efeitos colaterais negativos na saúde dos peixes, bem como sobre seu ambiente.

Benefícios do matcha: um estudo de revisão / Benefits of matcha: a review study

O Chá Verde matcha é uma erva muito utilizada na culinária japonesa, produzida a partir das folhas da planta Camellia sinensis. A sua forma tradicional de cultivo, em ambiente sombreado por bambu natural, potencializa o teor de polifenóis, cafeína e clorofila. Suas propriedades promotoras de saúde são atribuídas ao alto teor de antioxidantes e substâncias antiinflamatórias. O objetivo do estudo foi realizar uma revisão narrativa acerca dos efeitos benéficos do matcha para a saúde humana, por meio de buscas nas bases de dados Google Acadêmico, Scientific Electronic Library Online (Scielo), Literatura Latino-americana e do National Library of Medicine (Pubmed), utilizando as palavras-chave: chá verde, matcha, benefícios, matcha tea. Os estudos indicam que o matcha presenta propriedades antioxidantes e antiinflamatórias, melhora as funções imunológicas, atua na prevenção do declínio cognitivo e apresenta potencial de impactar a microbiota intestinal, alterando a composição das bactérias presentes. Diante das evidências encontradas, notase a necessidade de realizar mais estudos para elucidar as propriedades e os mecanismos de ação de cada um dos compostos desta bebida.(AU)

Matcha green tea is an herb widely used in Japanese cuisine, produced from the leaves of the Camellia sinensis plant. Its traditional way of cultivation, in an environment shaded by natural bamboo, enhances the content of polyphenols, caffeine and chlorophyll. Its healthpromoting properties are attributed to its high content of antioxidants and anti inflammatory substances. The aim of the study was to perform a narrative review about the beneficial effects of matcha on human health, through searches in the databases Google Scholar, Scientific Electronic Library Online (Scielo) and Latin American Literature and the National Library of Medicine (Pubmed), using the keywords: green tea, matcha, benefits, matcha tea. Studies indicate that matcha has antioxidant and anti-inflammatory properties, improves immune functions, acts to prevent cognitive decline and has the potential to impact the intestinal microbiota, changing the composition of the bacteria present. In view of the evidence found, there is a need to carry out further studies to elucidate the properties and mechanisms of action of each of the compounds in this drink.(AU)

Comparative analysis of various sources of selenium on the growth performance and antioxidant status in broilers under heat stress / Análise comparativa de várias fontes de selênio no desempenho de crescimento e status antioxidante em frangos de corte sob estresse térmico

Abstract The supplementation of Selenium-enriched probiotics is effective in reducing oxidative stress and maintaining meat quality stability in broiler chicken especially under heat stress. An experimental study was conducted to perform Comparative analysis of Selenium yeast with inorganic Se in broilers under heat stress. A total of 120 broilers chicks of one day were assigned to 4 groups each consisting 30 chicks fed on same basal diet but different selenium sources. The basal diet of group D1 was not supplemented with Se source (Negative control), group D2 basal diet was supplemented with inorganic selenium (Sodium selenite 0.22mg/Kg starter phase and 0.15mg/Kg finisher phase), group D3 basal diet was supplemented with commercially available organic selenium (Seleno-methionine 0.22mg/Kg starter phase and 0.15mg/Kg finisher phase) and group D4 basal diet was supplemented with self-developed organic selenium (Se-enriched yeast 0.22mg/Kg starter phase and 0.15mg/Kg finisher phase). The performance parameters i.e. feed intake (FI), live body weight (BW) and FCR were not significantly (p>0.05) effected by selenium supplementation in the starter phase but were significantly (p<0.05) effected in the finisher phase. Selenium supplementation significantly (p<0.05) effected serum Se level in different supplemented groups. Higher serum Se value (58.20±0.06) was recorded in D4 group. Similarly significantly lower selenium value was recorded for D4 and higher was recorded for D1 (11.36±0.08). However lower serum Paraoxonase (PON) value was recorded for D4 (13.24±0.01) and higher for D1 (13.33±0.03). Comparatively self-developed Se enriched yeast increased the Se accumulation and improved antioxidant system. Glutathione peroxidase (GPx) was found higher in D4 (12.333±0.03) followed by D3, D2 and D1 respectively. Whereas superoxide dismutase (SOD) was significantly lower (p<0.05) in D4 (0.1437±0.003) followed by D3 (0.1457±0.002). Selenium supplementation increased the bird's survival rate. Birds fed on Se enriched yeast showed higher Se deposition and better antioxidant capacity as compared to other sources of selenium. Se-enriched yeast displayed an improved result on Se deposition in tissues, and oxidative capacity, meat tenderness and immune response level as compared to other sources of selenium.

Resumo A suplementação de probióticos enriquecidos com selênio é eficaz na redução do estresse oxidativo e na manutenção da estabilidade da qualidade da carne em frangos de corte, especialmente sob estresse por calor. Um estudo experimental foi conduzido para realizar uma análise comparativa da levedura selênio com o Se inorgânico em frangos de corte sob estresse térmico. Um total de 120 pintos de um dia foi dividido em 4 grupos, cada um consistindo de 30 pintos alimentados com a mesma dieta basal, mas com diferentes fontes de selênio. A dieta basal do grupo D1 não foi suplementada com fonte de Se (controle negativo), a dieta basal do grupo D2 foi suplementada com selênio inorgânico (selenito de sódio 0,22 mg / kg fase inicial e 0,15 mg / kg fase finalizadora), a dieta basal do grupo D3 foi suplementada com selênio orgânico disponível comercialmente (fase inicial de seleno-metionina 0,22 mg / kg e fase finalizadora de 0,15 mg / kg) e a dieta basal do grupo D4 foi suplementada com selênio orgânico autodesenvolvido (fermento enriquecido com Se 0,22 mg / kg fase inicial e 0,15 mg / kg fase finalizadora). Os parâmetros de desempenho, ou seja, consumo de ração (FI), peso corporal vivo (PC) e FCR não foram significativamente (p > 0,05) afetados pela suplementação de selênio na fase inicial, mas foram significativamente (p < 0,05) afetados na fase final. A suplementação de selênio afetou significativamente (p < 0,05) o nível de Se sérico em diferentes grupos suplementados. O maior valor de Se sérico (58,20 ± 0,06) foi registrado no grupo D4. Da mesma forma, valor de selênio significativamente menor foi registrado para D4 e maior foi registrado para D1 (11,36 ± 0,08). No entanto, um valor mais baixo de Paraoxonase (PON) sérica foi registrado para D4 (13,24 ± 0,01) e mais alto para D1 (13,33 ± 0,03). A levedura enriquecida com Se comparativamente autodesenvolvida aumentou o acúmulo de Se e melhorou o sistema antioxidante. A glutationa peroxidase (GPx) foi encontrada maior em D4 (12,333 ± 0,03) seguido por D3, D2 e ​​D1 respectivamente. Enquanto a superóxido dismutase (SOD) foi significativamente menor (p < 0,05) em D4 (0,1437 ± 0,003) seguido por D3 (0,1457 ± 0,002). A suplementação de selênio aumentou a taxa de sobrevivência da ave. Aves alimentadas com levedura enriquecida com Se apresentaram maior deposição de Se e melhor capacidade antioxidante em comparação com outras fontes de selênio. A levedura enriquecida com Se apresentou um resultado melhorado na deposição de Se nos tecidos, capacidade oxidativa, maciez da carne e nível de resposta imune em comparação com outras fontes de selênio.

In-house serological ELISA as a leishmaniosis diagnostic test: development and applications in canines from the western border of Brazil / ELISA "in house" para o diagnóstico de leishmaniose: desenvolvimento e aplicação em caninos da fronteira Oeste do Brasil

Leishmaniosis is a great public health problem affecting both humans and animals. The disease is caused by the protozoan Leishmania spp., which has a complex cycle involving a phlebotomine vector. The ELISA test (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) along with a chromatographic immunoassay was defined by the Brazil Health Ministry as the confirmatory screening protocol in 2011. Uruguaiana city is 630 km away from Porto Alegre, which makes it difficult to send samples and diagnose leishmaniasis, as well as receive quick results. In view of this, the present study evaluated an in-house indirect ELISA method compared to indirect immunofluorescence assay (IFA) and dual-path platform chromatographic immunoassay (DPP-BioManguinhos®) for the detection of an immune response to Leishmania spp. in canine species. The serological evaluation included 48 canines from the western border of Brazil (Uruguaiana and Barra do Quaraí city). Among the 48 canine samples tested, 18 were positive when using the ELISA technique, 19 were positive with IFA, and 17 were positive with rapid test DPP®. The ELISA technique showed a sensitivity/specificity of 83.3%/86.7% when compared to IFA and 100%/96.8% compared to DPP®. The present study showed a prevalence of 37.5%, demonstrating that the infection circulates in the studied population. It can be concluded that the ELISA technique was valuable for use in field conditions when performing screening tests in endemic areas.

A leishmaniose é um grande problema de saúde pública que afeta tanto humanos quanto animais. A doença é causada pelo protozoário Leishmania spp., que possui um ciclo complexo envolvendo um vetor flebotomíneo. O teste ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay), juntamente com um imunoensaio cromatográfico, foi definido pelo Ministério da Saúde do Brasil como protocolo de triagem confirmatória em 2011. A cidade de Uruguaiana fica a 630 km de Porto Alegre, o que dificulta o envio de amostras e o diagnóstico da leishmaniose, além da demora para obter os resultados. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar um método de ELISA indireto in-house comparado ao ensaio de imunofluorescência indireta (IFA) e imunoensaio cromatográfico de plataforma de dupla via (DPP-BioManguinhos®) para a detecção de uma resposta imune contra Leishmania spp. na espécie canina. A avaliação sorológica incluiu 48 caninos da fronteira oeste do Brasil (cidade de Uruguaiana e Barra do Quaraí). Das 48 amostras caninas testadas, 18 foram positivas na técnica de ELISA, 19 foram positivas com IFA e 17 foram positivas com o teste rápido DPP®. A técnica de ELISA apresentou sensibilidade/especificidade de 83,3%/86,7% quando comparada ao IFA e 100%/96,8% em relação ao DPP®. O presente estudo apresentou prevalência de 37,5%, demonstrando que a infecção circula na população estudada. Pode-se concluir que a técnica de ELISA foi valiosa para uso em condições de campo na realização de testes de triagem em áreas endêmicas.

Impact of dietary leaf extracts of Black pepper Piper nigrum L on the growth, hematological and immunological parameters of Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultured in glass aquaria / Impacto de extratos de folhas da dieta de pimenta-do-reino Piper nigrum L sobre o crescimento, parâmetros hematológicos e imunológicos de Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultivado em aquários de vidro

A study was conducted to evaluate the effect of Piper nigrum (black pepper) leaf extract on on the growth performance, proximate composition, hematological parameters, and immune response of Labeo rohita fingerlings with an average weight of 22.14 ± 0.98g. After acclimation for two weeks, fish (n=25) were randomly selected and placed in four glass aquaria (T0, T1, T2 and T3) at constant water temperature (30.0 ± 1.0 °C), pH (7.50 ± 0.5) and total hardness (200 ± 2.0 mgL,-¹) for a period of 12 weeks, with three replicates each. Fish were fed with P. nigrum leaf extract supplemented feed @ 0.0%, 1.0%, 2.0% and 3.0% in T0, T1, T2 and T3, respectively. At the end of experiment, five fish were randomly selected from each aquaria for proximate composition, gut and skin microbial load, hematological parameters. Total proteins, albumins, and globulins were also recorded to evaluate immunological memory. The result revealed that fish in T2 showed better growth performance with an average weight gain of 56.11 ± 0.51 g. Thus, it had been concluded that Piper nigrum, a medicinal plant, can also be used to enhance the growth performance and immune response of Labeo rohita as attractive alternatives against antibiotics and vaccines and has shown no negative side effects on fish health as well as on its environment.

Um estudo foi conduzido para avaliar o efeito do extrato da folha de Piper nigrum (pimenta-do-reino) sobre o desempenho de crescimento, composição centesimal, parâmetros hematológicos e resposta imune de alevinos de Labeo rohita com peso médio de 22,14 ± 0,98g. Após aclimatação por duas semanas, os peixes (n = 25) foram selecionados aleatoriamente e colocados em quatro aquários de vidro (T0, T1, T2 e T3) em temperatura constante da água (30,0 ± 1,0 °C), pH (7,50 ± 0,5) e dureza total (200 ± 2,0 mgL-¹) por um período de 12 semanas, com três repetições cada. Os peixes foram alimentados com ração suplementada com extrato de folha de P. nigrum @ 0,0%, 1,0%, 2,0% e 3,0% em T0, T1, T2 e T3, respectivamente. Ao final do experimento, cinco peixes foram selecionados aleatoriamente de cada aquário para composição centesimal, carga microbiana intestinal e cutânea e parâmetros hematológicos. Proteínas totais, albuminas e globulinas também foram registradas para avaliar a memória imunológica. O resultado revelou que os peixes em T2 apresentaram melhor desempenho de crescimento com ganho de peso médio de 56,11 ± 0,51 g. Assim, concluiu-se que Piper nigrum, uma planta medicinal, também pode ser usado para melhorar o desempenho de crescimento e resposta imunológica de Labeo rohita como alternativas atraentes contra antibióticos e vacinas e não mostrou efeitos colaterais negativos na saúde dos peixes, bem como sobre seu ambiente.

Effects of autolyzed yeast on leukocyte oxidative metabolism and pneumonia occurrence in feedlot steers / Efeito da levedura autolisada no metabolismo oxidativo leucocitário e na ocorrência de pneumonia em novilhos terminados em confinamento

Although yeast supplementation has shown an immunostimulant effect in feedlot cattle, the question remains whether it influences the occurrence of the bovine respiratory disease complex (BRD) in feedlot cattle. Therefore, our objective was to evaluate whether dietary supplementation with autolyzed yeast affects the efficiency of blood phagocytes, reducing inflammation and the occurrence of BRD in feedlot cattle. A randomized experimental trial was conducted with whole steers with half Angus blood for 106 days: control (n=10): diet without yeast; Y4 (n=12): yeast diet (4g per animal per day); and Y7 (n=7): yeast diet (7g per animal per day). On Days 0, 14, 42, 70, and 105, blood count, leukocyte oxidative metabolism, serum haptoglobin, frequency of nasal secretion and orbital temperature were evaluated. On slaughter day, a lung evaluation was performed. On Days 42 and 70 of feedlot finishing, the treated animals showed increased leukocyte oxidative metabolism (D42 P=0.04; D70 P=0.02) compared to the control group. These animals had a lower frequency of mucopurulent nasal secretion, lower orbital temperature and reduced pneumonia occurrence than the treated groups (P=0.05) with less lung lesion severity (P=0.01), allowing us to infer that the autolyzed yeast improves blood phagocytic function and decreases the inflammation and BRD of feedlot steers, especially at a dose of 4g.

Embora a suplementação com leveduras tenha demonstrado efeito imunoestimulante em bovinos, permanece-se a dúvida se ela influencia na ocorrência do complexo doença respiratória bovina (CDRB) em bovinos confinados. Portanto, objetivou-se avaliar se a suplementação dietética com levedura autolisada influencia a eficiência de fagócitos sanguíneos, reduzindo inflamações e a ocorrência de CDRB em bovinos confinados. Realizou-se um ensaio experimental randomizado com 36 novilhos inteiros 1/2 sangue Angus por 106 dias: controle (n=10): dieta sem levedura; Y4 (n=12): dieta com levedura (4g por animal por dia); e Y7 (n=7): dieta com levedura (7g por animal por dia). Nos dias 0, 14, 42, 70 e 105, hemograma, metabolismo oxidativo de leucócitos, haptoglobina sérica, frequência de secreção nasal e temperatura orbital foram avaliados. No dia do abate, foi realizada avaliação pulmonar. Nos dias 42, e 70 de terminação em confinamento, os animais tratados apresentaram aumento do metabolismo oxidativo dos leucócitos (D42 P=0,04; D70 P=0,02) em relação ao grupo controle. Esses animais apresentaram menor frequência de secreção nasal mucopurulenta, menor temperatura orbital, menor ocorrência de pneumonias (P=0,05) com menor gravidade das lesões pulmonares (P=0,01), permitindo inferir que a levedura autolisada na dieta melhorou a eficiência dos fagócitos sanguíneos, reduzindo inflamações e a ocorrência de CDRB, especialmente na dosagem de 4g.

Impact of dietary leaf extracts of Black pepper Piper nigrum L on the growth, hematological and immunological parameters of Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultured in glass aquaria / Impacto de extratos de folhas da dieta de pimenta-do-reino Piper nigrum L sobre o crescimento, parâmetros hematológicos e imunológicos de Labeo rohita (Hamilton, 1822) cultivado em aquários de vidro

A study was conducted to evaluate the effect of Piper nigrum (black pepper) leaf extract on on the growth performance, proximate composition, hematological parameters, and immune response of Labeo rohita fingerlings with an average weight of 22.14 ± 0.98g. After acclimation for two weeks, fish (n=25) were randomly selected and placed in four glass aquaria (T0, T1, T2 and T3) at constant water temperature (30.0 ± 1.0 °C), pH (7.50 ± 0.5) and total hardness (200 ± 2.0 mgL,-¹) for a period of 12 weeks, with three replicates each. Fish were fed with P. nigrum leaf extract supplemented feed @ 0.0%, 1.0%, 2.0% and 3.0% in T0, T1, T2 and T3, respectively. At the end of experiment, five fish were randomly selected from each aquaria for proximate composition, gut and skin microbial load, hematological parameters. Total proteins, albumins, and globulins were also recorded to evaluate immunological memory. The result revealed that fish in T2 showed better growth performance with an average weight gain of 56.11 ± 0.51 g. Thus, it had been concluded that Piper nigrum, a medicinal plant, can also be used to enhance the growth performance and immune response of Labeo rohita as attractive alternatives against antibiotics and vaccines and has shown no negative side effects on fish health as well as on its environment.(AU)

Um estudo foi conduzido para avaliar o efeito do extrato da folha de Piper nigrum (pimenta-do-reino) sobre o desempenho de crescimento, composição centesimal, parâmetros hematológicos e resposta imune de alevinos de Labeo rohita com peso médio de 22,14 ± 0,98g. Após aclimatação por duas semanas, os peixes (n = 25) foram selecionados aleatoriamente e colocados em quatro aquários de vidro (T0, T1, T2 e T3) em temperatura constante da água (30,0 ± 1,0 °C), pH (7,50 ± 0,5) e dureza total (200 ± 2,0 mgL-¹) por um período de 12 semanas, com três repetições cada. Os peixes foram alimentados com ração suplementada com extrato de folha de P. nigrum @ 0,0%, 1,0%, 2,0% e 3,0% em T0, T1, T2 e T3, respectivamente. Ao final do experimento, cinco peixes foram selecionados aleatoriamente de cada aquário para composição centesimal, carga microbiana intestinal e cutânea e parâmetros hematológicos. Proteínas totais, albuminas e globulinas também foram registradas para avaliar a memória imunológica. O resultado revelou que os peixes em T2 apresentaram melhor desempenho de crescimento com ganho de peso médio de 56,11 ± 0,51 g. Assim, concluiu-se que Piper nigrum, uma planta medicinal, também pode ser usado para melhorar o desempenho de crescimento e resposta imunológica de Labeo rohita como alternativas atraentes contra antibióticos e vacinas e não mostrou efeitos colaterais negativos na saúde dos peixes, bem como sobre seu ambiente.(AU)