Resumo

The objective of this research was to evaluate the efficacy of serological and molecular tests in the detection of Mycoplasma gallisepticum (MG) and Mycoplasma synoviae (MS) in laying and broiler flocks. For this analysis, 344 blood serum samples, 220 tracheal swab samples, and 66 trachea samples were collected. The serum samples were subjected to a rapid agglutination (RSA) test, a hemagglutination inhibition (HI) assay, and an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Polymerase Chain Reaction (PCR), nPCR, and vaccine strain PCR were performed on the trachea and tracheal swab samples. RSA was conducted at 1:10 dilution, and resulted in 14.8% (51/344) of samples positive for MG and 28.5% (98/344) for MS. Regarding the results of the HI test, 8.7% (30/344) and 20.3% (70/344) were positive for MG and MS, respectively. Based on the ELISA, 45.6% (177/344) of the samples showed seropositivity for MG, and 57.3% (189/344) for MS. Out of all tracheal swab and trachea samples subjected to PCR, 25.9% (57/220) and 42.8% (31/66) were positive for MG, while 10.0% (22/220) and 18.2% (12/66) were positive for MS, respectively. As determined by the vaccine strain PCR, 56.1% (32/57) of the tracheal swab samples that were positive for MG originated from the MG-F strain, whereas, of the positive trachea samples, 40.6% (13/32) were positive for that vaccine strain. The importance of using different serological and molecular tools in the diagnosis of MG and MS is clear, considering the great variation of results between the techniques, in addition to the possibility that DNA of the agent detected in flocks not having presented seroconversion.(AU)

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ABSTRACT Brucellosis is an important bacterial disease of global distribution with zoonotic potencial. Serological tests used in Brazil for diagnosis of bovine brucellosis, including the Rose Bengal test (RBT), 2-mercaptoethanol (2-ME), fluorescent polarization (FPA), and complement fixation (FC), are based on the smooth lipopolysaccharide antigen (S-LPS) of Brucella abortus. The aim of this study was to evaluate a recombinant BP26 protein used as antigen in a rapid lateral flow immunochromatographic assay (rBP26-LFIA) for serological diagnosis of bovine brucellosis. Analytical performance of rBP26-LFIA was evaluated in positive and negative bovine serum samples previously characterized by RBT and 2-ME. Estimates of analytical sensitivity and specificity were 73.91% and 97.14%, respectively. Bovine sera reactive to Neospora, Trypanosoma vivax or Leptospira were used to assess specificity because these diseases are commonly associated with abortion in cattle. In addition to a possible cross-reaction induced by commercial vaccines against Leptospira in serological tests for bovine brucellosis using S-LPS as an antigen. In conclusion, rBP26-LFIA, with its current standardization, had good analytical performance. However, a future evaluation of diagnostic performance by rBP26-LFIA with samples from regions with known prevalence is necessary for its recommendation for use in the Brazilian program for the control and eradication of bovine brucellosis.

RESUMO A brucelose é uma importante zoonose de proporções mundiais. Os testes sorológicos utilizados no Brasil, antígeno acidificado tamponado (RBT), soroaglutinação lenta/2-mercaptoetanol (2-ME), polarização fluorescente (FPA) e fixação de complemento (FC), são baseados no antígeno lipopolissacarídeo liso (S-LPS) da Brucella abortus. O objetivo deste estudo foi avaliar uma proteína BP26 recombinante utilizada como antígeno em um teste rápido imunocromatográfico de fluxo lateral (rBP26-LFIA) para o diagnóstico sorológico da brucelose bovina. As características de desempenho analítico foram avaliadas em amostras de soro bovino positivas e negativas previamente caracterizadas pelos testes RBT e 2-ME. As estimativas da sensibilidade e especificidade analíticas foram de 73,91% e 97,14%, respectivamente. Soros bovinos reagentes à Neospora, Trypanossoma vivax e Leptospira foram utilizados para avaliação de especificidade, em razão de essas doenças serem causas frequentes de aborto em bovinos, além de ser possível reação cruzada induzida por vacinas comerciais contra Leptospira, em testes sorológicos para a brucelose bovina que utilizam S-LPS como antígeno. Como conclusão, o teste rBP26-LFIA, com sua atual padronização, apresentou um bom desempenho analítico. Contudo, uma futura avaliação do desempenho diagnóstico do teste rBP26-LFIA com amostras provenientes de regiões com prevalência conhecidas é necessária para sua recomendação de uso no programa brasileiro de controle e erradicação da brucelose bovina.

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The aim of this study was to detect trypomastigote forms of Trypanosoma vivax, in blood smears, DNA of T. vivax and anti-T. vivax antibodies in samples from buffalos reared in the lowlands of Maranhão, Brazil. Blood samples were collected from 116 buffalos and 25 ectoparasite specimens. Blood smears were produced to diagnose forms compatible with Trypanosoma spp.; the indirect enzyme-linked immunosorbent assay (iELISA) and lateral-flow immunochromatography (Imunotest®) serological tests were used; and the polymerase chain reaction (PCR) was used to make molecular diagnoses. No forms compatible with Trypanosoma spp. were observed in blood smears. Among the 116 serum samples analyzed, 79.31% and 76.72% were positive in the ELISA and rapid tests, respectively. One sample was positive in the molecular test. Twenty-five lice of the species Haematopinus tuberculatus were collected. When subjected to PCR for detection of DNA of T. vivax, all of them were negative. The louse specimens were negative for T. vivax. There were no statistically significant differences (p < 0.05) in the presence of T. vivax in this region, in relation to the animals' age and sex. It can be concluded that these protozoa are circulating in the buffalo herd of the lowlands of Maranhão displaying crypitc parasitemias.(AU)

O objetivo deste estudo foi detectar formas tripomastigotas de Trypanosoma vivax em esfregaço sanguíneo, DNA de T. vivax e anticorpos anti-T. vivax, em amostras de búfalos, criados na Baixada Maranhense, Brasil. Foram coletadas amostras de sangue de 116 búfalos e 25 espécimes de ectoparasitas. Para o diagnóstico, foi realizada a confecção de esfregaços sanguíneos a fim de observar formas compatíveis com Trypanosoma spp., a sorologia por Ensaio Imunoenzimático Indireto ((iELISA), a Imunocromatografia de fluxo lateral (Imunotest®) e o diagnóstico molecular por meio da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Não foram observadas formas compatíveis com Trypanosoma spp. nos esfregaços sanguíneos. Dentre as 116 amostras de soro analisadas, 79,31% e 76,72% mostraram-se positivas nos ensaios de ELISA e teste rápido, respectivamente. Uma amostra foi positiva no teste molecular. Foram coletados 25 piolhos da espécie Haematopinus tuberculatus. Quando submetidos a PCR para a detecção do DNA de T. vivax, todos mostraram-se negativos. Os espécimes de piolhos estavam negativos para T. vivax. Não houve diferença estatística significante (p<0,05) em relação à idade e sexo dos animais e a presença de T. vivax na região. Pode-se concluir que o protozoário está circulando em rebanho bubalino da Baixada Maranhense, demostrando parasitemias crípticas.(AU)

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This study aimed to determine the frequency of anti-Neospora caninum antibody detection in three samples and sampling methods: A prevalence study, routine diagnostic laboratory samples, and fetal bovine serum samples. These samples were collected from cattle in Rio Grande do Sul (RS), southern Brazil, and analyzed using the indirect immunofluorescence reaction technique. For each sampling method, a historical study was used as a reference for comparison. In the prevalence study, 1,248 serum samples were collected from 2020 to 2022. The prevalence of N. caninum in the RS state was 22.8% (285/1248). This figure was statistically different compared to previous studies conducted in 2002, which reported a prevalence of 11.2% (p<0.001). In the routine diagnostic samples, an average rate of 29.95% (985/3289) of anti-N. caninum antibodies were detected. This rate was statistically higher than that of a previous study conducted in 2003, which reported a rate of 20% (p=0.01). Similar data were found in the fetal bovine serum samples, which showed an increase compared to previous studies conducted in 2010 that reported a rate of 15% (p=0.003). The increase in the detection rate of N. caninum antibodies underscores the need for measures to control and prevent bovine neosporosis.

Este estudo teve como objetivo determinar a frequência de detecção de anticorpos anti-Neospora caninum em três diferentes amostras e métodos de coleta: um estudo de prevalência, amostras de laboratório de diagnóstico de rotina e amostras de soro fetal bovino. Essas amostras foram coletadas de bovinos no Rio Grande do Sul (RS), região Sul do Brasil, e analisadas usando a técnica de reação de imunofluorescência indireta. Para cada método de coleta, um estudo histórico foi usado como referência para comparação. No estudo de prevalência, foram coletadas 1.248 amostras de soro entre 2020 e 2022. A prevalência de N. caninum no estado do RS foi de 22,8% (285/1248). Esse valor foi estatisticamente diferente quando comparado a estudos anteriores realizados em 2002, que relataram uma prevalência de 11,2% (p<0,001). Nas amostras de diagnóstico de rotina, foi detectada uma taxa média de 29,95% (985/3289) de anticorpos anti-N. caninum. Essa taxa foi estatisticamente maior do que a de um estudo anterior realizado em 2003, que relatou uma taxa de 20% (p=0,01). Dados semelhantes foram encontrados nas amostras de soro fetal bovino, que mostraram um aumento em comparação com estudos anteriores realizados em 2010 que relataram uma taxa de 15% (p=0,003). O aumento na taxa de detecção de anticorpos anti-N. caninum destaca a necessidade de medidas para controlar e prevenir a neosporose bovina.

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A leishmaniose visceral (LV) é uma antropozoonose global que afeta humanos, cães e animais silvestres. O cão é considerado o principal reservatório urbano da doença, causada pelo protozoário Leishmania infantum e transmitida pela picada do vetor Lutzomyia longipalpis. A infecção pode ser assintomática ou sintomática, apresentando alterações que incluem anemia, caquexia, febre, linfadenomegalia, esplenomegalia e hepatomegalia, lesões cutâneas e onicogrifose. O diagnóstico ocorre por meio da pesquisa direta ou indireta do parasita em amostras de sangue, lesões cutâneas, fígado, baço, aspirado de linfonodo e medula óssea. Este estudo descreve três casos de LV em cães oriundos de Pirajuí e importados para Jaboticabal, SP, Brasil. Os diagnósticos foram confirmados por testes clínicos, sorológicos, moleculares e parasitários, destacando variações nos resultados. A necessidade de múltiplos métodos diagnósticos é enfatizada devido às diferentes manifestações da doença. O artigo ambém ressalta a importância do controle do trânsito de cães entre regiões para evitar a disseminação da LV, sugerindo medidas de prevenção e controle para áreas não endêmicas.(AU)

Visceral leishmaniasis (VL) is a global anthropozoonosis that affects humans, dogs, and wild animals. The dog is considered the main urban reservoir of the disease, caused by the protozoan Leishmania infantum and transmitted by the bite of the vector Lutzomyia longipalpis. The infection can be asymptomatic or symptomatic, presenting changes that include anemia, cachexia, fever, lymphadenopathy, splenomegaly and hepatomegaly, skin lesions, and onychogryphosis. Diagnosis occurs through the direct or indirect search of the parasite in blood samples, skin lesions, liver, spleen, lymph node aspirate, and bone marrow. This study describes three cases of VL in dogs from Pirajuí imported to Jaboticabal, SP, Brazil. Diagnoses were confirmed by clinical, serological, molecular, and parasitic tests, highlighting variations in results. The need for multiple diagnostic methods is emphasized due to the different manifestations of the disease. The article also highlights the importance of controlling the movement of dogs between regions to prevent the spread of VL, suggesting prevention and control measures for non-endemic areas.(AU)

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Aujeszky's Disease (AD) is a highly infectious swine disease caused by Suid herpesvirus 1 (SuHV 1). The present study evaluated the biosafety of commercial swine farms and carried out the first serological survey for Aujeszky's Disease in Espírito Santo State, Brazil. A total of 55 farms in 27 municipalities of the state were selected, where 416 swine serum samples were collected to be submitted to serological diagnosis for AD. Finally, a survey was carried out using a questionnaire to obtain information on the biosecurity of the farms. The results by the ELISA technique indicated the absence of antibodies for AD. Regarding the biosecurity of the farms, 56.4% of the farms did not meet the requirement of internal isolation, 67.3% did not have changing rooms, 72.7% did not provide specific clothing for employees and visitors, 85.5% did not require visitors bathe to access the sheds and only 10.9% of the farms controlled the flow of visitors and vehicles accessing the property. Another noteworthy factor is that only 25.5% of the farms had an area to quarantine replacement animals and 69.1% had an access ramp located close to the animal pens. With the results, it was concluded that there is a need to improve biosecurity measures on commercial farms in the state of Espírito Santo and that there was no presence of Aujeszky's Disease in the evaluated animals.

A Doença de Aujeszky (DA) é uma enfermidade de suínos altamente infecciosa, causada pelo herpesvírus suíno 1 (SuHV 1). O presente estudo objetivou avaliar a biosseguridade das granjas comerciais capixabas de suínos e realizar o primeiro inquérito sorológico para Doença de Aujeszky no Estado do Espírito Santo, Brasil. Foram selecionadas 55 granjas em 27 municípios do Estado, onde se coletou 416 amostras de soro de suínos para serem submetidos ao diagnóstico sorológico para DA. Por fim, foi realizado inquérito, mediante questionário para obter informações sobre a biosseguridade das granjas. Os resultados pela técnica de ELISA indicaram ausência de anticorpos para DA. Em relação à biosseguridade das granjas, 56,4% das granjas não atenderam o requisito de cerca de isolamento interno, 67,3% não possuíam vestiários, 72,7% não disponibilizavam roupas específicas para funcionários e visitantes, 85,5% não exigiam a prática de banho dos visitantes para acesso aos galpões e somente 10,9% das granjas faziam o controle do fluxo de visitantes e veículos que acessam a propriedade. Outro fator destacado é que apenas 25,5% das granjas apresentavam área para realizar quarentena dos animais de reposição e 69,1% possuíam o embarcador localizado próximo às baias dos animais. Com os resultados, concluiu-se que há necessidade de melhoria das medidas de biosseguridade nas granjas comerciais no Estado do Espírito Santo e que não houve presença da Doença de Aujeszky nos animais avaliados.

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Feline leishmaniosis is infrequent worldwide, and cats have been suggested as secondary reservoirs for the parasite. However, specific diagnostic techniques for feline samples are scarce. In this study, we standardized an in-house indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) using crude Leishmaniainfantum antigen to detect antibodies in feline samples from an endemic canine visceral leishmaniosis (CVL) area in the western border of Brazil. The results were compared with those of an indirect immunofluorescence assay (IFA). We tested semi-domiciled felines residing in Uruguaiana and Barra do Quaraí, Rio Grande do Sul. Among the 41 samples, 25 (61%) were positive using ELISA and 24 (58%) were positive using IFA (1:40). Our findings demonstrated a high seropositivity of feline samples from the endemic CVL area in the western border of Brazil, and we proposed the use of an in-house ELISA with crude antigen for population screening. This is the first serological survey on felines in a region where CVL is well established.

A leishmaniose felina é relatada esporadicamente em todo o mundo e, a espécie foi sugerida como um reservatório secundário para o parasita. Apesar disso, há carência de técnicas diagnósticas específicas para amostras de felinos. O presente estudo teve como objetivo padronizar um Ensaio de Imunoabsorção Enzimática (ELISA) indireto interno, utilizando o antígeno cru de L. infantum para detectar anticorpos em amostras felinas em uma área endêmica de CVL na fronteira oeste do Brasil e, comparar os resultados com o ensaio de imunofluorescência indireta (IFA). Foram testados felinos residentes em Uruguaiana e Barra do Quaraí - RS, semi-domiciliados. Entre as 41 amostras testadas, 25 (61%) foram positivas no ELISA e 24 (58%) no IFA (1:40). O presente estudo elucidou uma alta soropositividade de amostras felinas em uma área endêmica de leishmaniose visceral canina na fronteira Oeste do Brasil e demonstrou a possibilidade de aplicar um ELISA com antígeno bruto para diagnóstico de triagem populacional. Além disso, este é o primeiro inquérito sorológico em felinos na região onde a leishmaniose visceral canina está bem estabelecida.

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Diseases such as those caused by feline immunodeficiency virus (FIV) and feline leukemia virus (FeLV) represent health problems for cats. Feline leishmaniasis (FL) has been reported in several cities across the country. The objective was to carry out a clinical-epidemiological and laboratory study of FIV, FeLV and FL in cats from shelters in Dourados, Mato Grosso do Sul, Brazil. Blood samples and swabs from the conjunctival and nasal mucosa were obtained from 75 cats, from four animal shelters. Serology for FIV and FeLV was performed. For Leishmania, polymerase chain reaction (PCR) was performed on blood, conjunctiva and nasal mucosa. In the immunochromatographic serological test, seven cats tested positive for FIV and none for FeLV. No samples was positive in PCR for Leishmania. The study showed that despite the presence of human and canine leishmaniasis in the studied region, Leishmania spp. were absent in the cats studied. To avoid an increase in contagion in shelters, it is essential isolate cats with FIV.(AU)

Doenças como as causadas pelos vírus da imunodeficiência felina (FIV) e vírus da leucemia felina (FeLV) representam problemas de saúde para os gatos. A leishmaniose felina (LF) tem sido relatada em diversas cidades do país. O objetivo deste trabalho foi realizar um estudo clínico-epidemiológico e laboratorial de FIV, FeLV e LF em gatos de abrigos em Dourados, Mato Grosso do Sul, Brasil. Amostras de sangue e swabs da mucosa conjuntival e da mucosa nasal foram obtidas de 75 gatos, dos quatro abrigos de animais. Foi feita a sorologia para FIV e FeLV. Para Leishmania foi realizada a reação em cadeia da polimerase (PCR) em sangue, conjuntiva e mucosa nasal. No teste sorológico imunocromatografico, sete gatos apresentaram resultado positivo para FIV e nenhum para FeLV. Nenhuma amostra foi positiva na PCR para Leishmania. O estudo demonstrou que apesar da presença de leishmaniose humana e canina, na região estudada, não foi encontrado Leishmania spp. nos gatos analisados. Para evitar o aumento do contágio em abrigos é fundamental isolar os gatos com FIV.(AU)

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This study aimed to detect Toxoplasma gondii in artisanal salted meat products sold in street markets in the Ilhéus-Itabuna microregion and to assess the salt concentration used in their preparation and its influence on the parasite's viability. A total of 125 samples of various artisanal meat products sold in street markets located in the Ilhéus-Itabuna microregion were collected during 2021. Serological analysis using indirect hemagglutination (HAI) and molecular analysis (PCR) were performed on these samples to detect the presence of the parasite. Möhr's method was utilized to determine the sodium chloride concentration in the samples. Of all samples, 21 were subjected to a bioassay in albino mice to verify the viability of possible tissue cysts. Among the 125 meat products, 10 (8%) tested positive in the serological analysis including four cured pork sausages, five beef sun-dried meats, and one mixed fresh sausage (pork and chicken). None of 125 samples tested positive in the molecular analysis. On bioassay, all mice tested negative for the presence of the parasite. The NaCl concentration in the positive samples ranged from 2.9% to 8%. The results demonstrated that the salt concentration in the collected samples was sufficient to inactivate the parasite T. gondii.(AU)

Este estudo teve como objetivo detectar Toxoplasma gondii em produtos cárneos salgados artesanais, comercializados em feiras livres da microrregião Ilhéus-Itabuna, e avaliar a concentração do sal utilizado no preparo e sua influência na viabilidade do parasito. Foram coletadas 125 amostras de diversos produtos cárneos artesanais, vendidos em feiras livres localizadas na microrregião Ilhéus-Itabuna, durante o ano de 2021. Nessas amostras, a fim de detectar a presença do parasito, foram realizadas análises sorológicas de hemaglutinação indireta (HAI) e molecular (PCR). Para a determinação da concentração de cloreto de sódio presente nas amostras, foi realizado o Método de Möhr. Do total, 21 amostras foram destinadas ao bioensaio em camundongos albinos, na intenção de verificar a viabilidade de possíveis cistos teciduais presentes. Dos 125 produtos cárneos, 10 (8%) foram positivos na análise sorológica, sendo quatro linguiças curadas suína, cinco carnes de sol bovina e uma linguiça frescal mista (suíno e frango). Nenhuma amostra foi positiva na análise molecular. No bioensaio, todos os camundongos testaram negativo para a presença do parasito. Das amostras positivas na sorologia, as concentrações de NaCl variaram de 2,9% a 8%. Os resultados evidenciaram que a concentração de sal das amostras coletadas foi suficiente para inativar o parasito Toxoplasma gondii.(AU)

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The occurrence of Toxoplasma gondii, Neospora caninum, Ehrlichia canis and Babesia vogeli in dogs from the municipality of Cândido Sales, Bahia, was investigated. Total and peripheral blood samples were obtained from 131 dogs. Blood smears were performed to check for morulae. Toxoplasma gondii and N. caninum infections were determined by an Indirect Immunofluorescence Reaction. Nested-PCR and PCR were used for the diagnoses of E. canis and B. vogeli infections, respectively. Additionally, the risk factors associated with infection by these agents were analyzed. The frequency of infection was 70.2% for N. caninum, 67.9% for T. gondii and 37.4% for E. canis. None of the dogs tested positive for B. vogeli. Morulae of Ehrlichia spp. were identified in two animals and the piroplasm in one animal. Age (> 3 years) was considered a risk factor for infections by E. canis and N. caninum and the rural habitat for infections by N. caninum. Co-infections were frequent, mainly with N. caninum and T. gondii (45.03% of dogs). Ehrlichia canis infection was significantly associated with N. caninum and T. gondii infection. These findings indicated a high occurrence of T. gondii, N. caninum, and E. canis in the studied region.

Avaliou-se a ocorrência de infecções por Toxoplasma gondii, Neospora caninum, Ehrlichia canis e Babesia vogeli em cães do município de Cândido Sales - BA. Para isso, foram obtidas amostras de sangue total e periférico de 131 cães. Esfregaços sanguíneos foram confeccionados para verificação de mórulas. Infecções por T. gondii e N. caninum foram determinadas pela reação de imunofluorescência indireta. O diagnóstico das infecções por E. canis e B. vogeli foi feito por meio de Nested-PCR e PCR, respectivamente. Adicionalmente, foram analisados os fatores de risco associados à infecção por esses agentes. Verificou-se frequência de infecção de 70,2% para N. caninum, 67,9% para T. gondii e de 37,4% para E. canis. Nenhum cão foi positivo para B. vogeli. Mórulas de Ehrlichia spp. foram identificadas em dois animais, e piroplasma em um. A idade (acima de 3 anos) foi fator de risco para infecções por E. canis e N. caninum, e hábitat rural para N. caninum. Coinfecções foram frequentes, principalmente por N. caninum e T. gondii (45,03%). Infecção por E. canis foi associada significativamente às infecções por N. caninum e T. gondii. Os achados indicam elevada ocorrência de T. gondii, N. caninum, e E. canis na região.

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The present study aimed to investigate the occurrence of Leishmania spp., hemotropic Mycoplasma spp., tick-borne pathogens (TBP), and co-infection in dogs with clinical signs suggestive of visceral leishmaniasis (VL). It also aimed to determine the factors associated with infection and to map the distribution of co-infected dogs in an endemic area in the Northeast region of Brazil. Blood samples from 168 dogs were evaluated for serological analysis to Leishmania spp., Anaplasma spp., Ehrlichia spp., Babesia spp., and molecular assays to Leishmania spp., Anaplasma platys, Ehrlichia canis, Babesia spp., and hemotropic Mycoplasma spp. In serological and molecular analysis, 29.8% and 5.9% of dogs were co-infected. In the regression analysis, seropositivity for Ehrlichia spp., Babesia spp., and Leishmania spp. was significantly associated with the presence of petechiae, young dogs, and weight loss. Serology revealed that co-exposure with Babesia spp. and Ehrlichia spp. was associated with fever and thrombocytopenia, and there was an association between seropositivity for Ehrlichia spp. and Babesia spp. in dogs seropositive for Leishmania spp. The presence of hemotropic Mycoplasma spp. DNA was associated with anorexia. Thus, dogs with clinical VL have co-infection with other pathogens, reinforcing the importance of this study for a better understanding of these co-infections in dogs from endemic areas.

O presente estudo objetivou investigar a prevalência de Leishmania spp., Mycoplasma spp. hemotrópico, patógenos transmitidos por carrapatos (PTC), e coinfecção em cães com sinais clínicos sugestivos de leishmaniose visceral (LV), determinar os fatores associados à infecção, e mapear a distribuição de cães coinfectados em uma área endêmica no Nordeste do Brasil. Amostras de sangue de 168 cães foram avaliadas por análises sorológicas para Leishmania spp., Anaplasma spp., Ehrlichia spp., Babesia spp., e ensaio molecular para Leishmania spp., Anaplasma platys, Ehrlichia canis, Babesia spp., e Mycoplasma hemotrópico. Pelas análises sorológicas e moleculares, 29,8% e 5,9% dos cães apresentaram coinfecção, respectivamente. Na análise de regressão, a soropositividade para Ehrlichia spp., Babesia spp., e Leishmania spp. foram significantemente associadas com a presença de petéquias, cães jovens, e perda de peso. O diagnóstico sorológico revelou que a coexposição à Babesia spp. e Ehrlichia spp. está associada com febre e trombocitopenia, havendo associação entre a soropositividade para Ehrlichia spp. e Babesia spp. em cães soropositivos para Leishmania spp. A presença de DNA de Mycoplasma foi associada à anorexia. Desta forma, cães com sinais de LV possuem coinfecção com outros patógenos, reforçando a importância deste estudo para um melhor entendimento dessas coinfecções em cães de áreas endêmicas.

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Bovine trypanosomosis, caused by Trypanosoma vivax, is a disease that originated in Africa and currently affects cattle in several South American countries, including almost all Brazilian states. Despite the reports on T. vivax infection in southern Brazil, data on its circulation status is currently unavailable. In this study, we aimed to detect anti-Trypanosoma spp. IgG antibodies in cattle from Rio Grande do Sul and suggest areas with T. vivax transmission risk. A total of 691 serum samples from cattle in the intermediate regions of Rio Grande do Sul were analyzed using indirect immunofluorescence assay (IFA). The overall seroprevalence of anti-Trypanosoma antibodies in cattle was 24.6% (170/691). The detection rate ranged from 0-37.3%, with a high prevalence in the intermediate regions of Ijuí (37.3%), Uruguaiana (30.7%), and Passo Fundo (28.9%). Thus, these regions were suggested as possible bovine trypanosomosis risk areas due to the high seroprevalence. This is the first serological study to determine Trypanosoma spp. infection status in cattle from Rio Grande do Sul, providing data on the epidemiology of trypanosomosis in the state.(AU)

A tripanossomose bovina, causada por Trypanosoma vivax, é uma doença que teve origem na África, e atualmente, afeta bovinos em diversos países da América do Sul, incluindo quase todos os estados brasileiros. Apesar dos relatos de infecção por T. vivax, no sul do Brasil, dados sobre seu status de circulação não estão disponíveis atualmente. Neste estudo, o objetivo foi detectar anticorpos IgG anti-Trypanosoma spp. em bovinos do Rio Grande do Sul e sugerir possíveis áreas de risco de transmissão de T. vivax. Foi analisado um total de 691 amostras de soro de bovinos, das regiões intermediárias do Rio Grande do Sul, usando-se o ensaio de imunofluorescência indireta (IFA). A soroprevalência geral de anticorpos anti-Trypanosoma em bovinos foi de 24,6% (170/691). A taxa de detecção variou de 0 a 37,3%, com uma alta prevalência nas regiões intermediárias de Ijuí (37,3%), Uruguaiana (30,7%) e Passo Fundo (28,9%). Portanto, essas regiões foram sugeridas como possíveis áreas de risco para a tripanossomose bovina, devido à alta soroprevalência. Este é o primeiro estudo sorológico a determinar o status de infecção por Trypanosoma spp., em bovinos do Rio Grande do Sul, fornecendo dados sobre a epidemiologia da tripanossomose no estado.(AU)

Resumo

The Caatinga biome is unique to Brazil, with unfavorable environmental characteristics for the survival of Leptospira spp. However, recent studies have shown high positivity at PCR (polymerase chain reaction) in small ruminants. There are no Leptospira spp. studies based on sample calculation in pigs in the Caatinga. The aim of this study was to assess the importance of pigs in the spread of leptospirosis in the Caatinga biome. Overall, 200 biological samples (urine, blood, vaginal fluid, and tissues of reproductive and urinary tracts) were collected from 40 slaughtered sows, and MAT (microscopic agglutination test) and PCR tests were carried out to detect anti-Leptospira spp. antibodies and the agent's DNA, respectively. The serological analysis showed a positivity rate of 5% (2/40), and the PCR identified Leptospira spp. DNA in 62.5% (25/40) of the animals. Only 2.5% (1/40) of the animals were positive for both techniques. The detected serogroups were Australis (50%) and Bataviae (50%), with antibody titers of 25 and 50. Leptospira spp. DNA was detected in 40% (16/40) of the reproductive tract samples, 32.5% (13/40) of the urinary tract, 32.5% (13/40) of the vaginal fluid and 30% (12/40) of the urine. There was no agreement (Kappa <0) between PCR samples from the genital tract vs. urinary tract or serological results. Genetic sequencing of one urine and one urinary tract tissue sample revealed 99% identity with L. borgpetersenii. The results indicate that leptospirosis is a concern in pigs in the context of Caatinga, with a high prevalence of infection detected by different diagnostic methods. The molecular analysis revealed a considerable proportion of infected animals. The findings emphasize the importance of a multifaceted approach in the diagnosis of leptospirosis in pigs, with a focus on the use of genital tract samples for the diagnosis of leptospirosis in this animal species, providing valuable insights for the control and prevention of this disease in both animals and the zoonotic context. Finally, the detection of leptospires in the genital tract indicates a possibility of male-female transmission in the venereal context.

O bioma Caatinga é único no Brasil, com características ambientais desfavoráveis à sobrevivência de Leptospira spp. Porém, estudos recentes demonstraram alta positividade na PCR (reação em cadeia da polimerase) em pequenos ruminantes. Não existem estudos para a infecção por Leptospira spp. baseados em cálculo amostral em suínos na Caatinga. O objetivo deste estudo foi avaliar a importância dos suínos na disseminação da leptospirose no bioma Caatinga. Foram coletadas 200 amostras biológicas (urina, sangue, fluido vaginal e tecidos do trato reprodutivo e urinário) de 40 porcas abatidas e realizados testes SAM (teste de soroaglutinação microscópica) e PCR para detecção de anticorpos anti-Leptospira spp. e DNA do agente, respectivamente. A análise sorológica mostrou taxa de positividade de 5% (2/40) e a PCR identificou o DNA de Leptospira spp. em 62,5% (25/40) dos animais. Apenas 2,5% (1/40) dos animais foram positivos para ambas as técnicas. Os sorogrupos detectados foram Australis (50%) e Bataviae (50%), com títulos de anticorpos de 25 e 50. O DNA de Leptospira spp. foi detectado em 40% (16/40) das amostras do trato reprodutivo, 32,5% (13/40) do trato urinário, 32,5% (13/40) do fluido vaginal e 30% (12/40) de urina. Não houve concordância (Kappa <0) entre amostras de PCR do trato genital vs. trato urinário ou resultados sorológicos. O sequenciamento genético de uma amostra de urina e de uma amostra de tecido do trato urinário revelou 99% de identidade com L. borgpetersenii. Os resultados obtidos indicam que a leptospirose representa uma preocupação em suínos no contexto da Caatinga, com alta prevalência de infecção detectada por diferentes métodos diagnósticos, bem como análises moleculares revelaram proporção considerável de animais infectados. Os resultados enfatizam a importância de uma abordagem multifacetada no diagnóstico da leptospirose em suínos, com foco no uso de amostras do trato genital para o diagnóstico da leptospirose nesta espécie animal, fornecendo informações valiosas para o controle e prevenção desta doença em animais e no contexto zoonótico. Por fim, a detecção de leptospiras no trato genital indica possibilidade de transmissão macho-fêmea no contexto venéreo.

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Rabies is a fatal viral disease that affects animals and humans and is widespread among national ecological systems. We describe the anatomopathological and immunohistochemical findings of a case of rabies in a jaguarundi (Herpailurus yagouaroundi) found in a rural peri-domestic area after showing aggression and attacking two animals. Histopathology of brain tissue showed lymphoplasmacytic meningoencephalitis associated with intracytoplasmic eosinophilic inclusion bodies in neurons, gliosis and neuronophagia. The diagnosis of rabies was based on the lesions and confirmed by immunohistochemistry and qPCR. In Brazil, rabies in wild felines of the genus Puma has only been described in animals through serological examinations. The pathological findings are essential for the diagnosis and elucidation of the participation of this species in the wild cycle of the disease, as well as in the maintenance and conservation of the balance of wild fauna.

A raiva é uma doença viral fatal que afeta animais e o homem, estando disseminada entre os sistemas ecológicos nacionais. Descrevem-se os achados anatomopatológicos e imuno-histoquímicos de um caso de raiva em um jaguarundi (Herpailurus yagouaroundi), encontrado em área peridomiciliar rural, após apresentar agressividade e ataque a dois animais. Microscopicamente, observou-se meningoencefalite linfoplasmocítica associada a corpúsculos de inclusão intracitoplasmáticos eosinofílicos em neurônios, gliose e neuronofagia. O diagnóstico de raiva foi estabelecido pelos achados patológicos e confirmado por imuno-histoquímica e qPCR. A ocorrência de raiva em felinos silvestres do gênero Puma só foi descrita por meio de exames sorológicos. Os achados patológicos são essenciais para o diagnóstico e elucidação da participação desta espécie no ciclo silvestre da doença, bem como na manutenção e conservação do equilíbrio da fauna silvestre.

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Leptospirosis is a globally important zoonosis that causes death in humans and animals, especially unvaccinated dogs. Dogs are infected through contact with urine or water contaminated by pathogenic spirochaete bacteria of the genus Leptospira. This study aimed to assess the performance of two diagnostic tests in characterizing dogs with leptospirosis and associate it with the main clinical-pathological alterations in dogs with suspected infection. From September 2019 to September 2020, 24 dogs with suspected canine leptospirosis were treated at the Veterinary Hospital of the Federal University of Uberlândia (UFU). Complementary tests such as a complete blood count (CBC) and serum creatinine, ALT (alanine transaminase) and ALP (alkaline phosphatase) levels were prescribed. In order to confirm the leptospirosis diagnosis, serum and molecular tests were performed using the microscopic agglutination test (MAT) and real-time quantitative polymerase chain reaction (qPCR). Of the 24 suspected cases of canine leptospirosis, six (25%) were positive in the MAT and three (12.5%) in the qPCR, with one (4.17%) returning positive results in both diagnostic tests. Positive results were obtained for 8/24 (33.3%) for combined MAT + qPCR. The predominant reactive serogroups were Icterohaemorrhagiae (33.33%) and Djasiman (33.33%), followed by Ballum (16.60%). The sensitivity and specificity of the qPCR in relation to the gold standard test (MAT) were 16.7 and 88.9%, respectively. Changes were observed in serum levels of creatinine, urea and ALP in the group that tested positive (MAT/qPCR); however, only urea and ALP levels were high in the negative group. Comparison of biochemical parameters in the positive (MAT/qPCR) and negative groups showed no statistically significant difference between the elements assessed (p>0.05). It was concluded that in order to diagnose acute canine leptospirosis, veterinarians should combine the clinical-pathological findings with paired sample MAT and qPCR urine test results.(AU)

A leptospirose é uma zoonose de importância mundial que causa mortes tanto em humanos, como em animais, especialmente em cães não vacinados. A infecção em cães ocorre pelo contato com urina ou água contaminada pela bactéria espiroqueta patogênica do gênero Leptospira. Objetivou-se avaliar dois testes diagnósticos na caracterização de cães com leptospirose, e associar com as principais alterações clínicos-patológicas de cães suspeitos. Foram atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Uberlândia no período de setembro de 2019 a setembro de 2020, 24 cães com suspeita clínica de leptospirose canina. Exames complementares como hemograma completo, dosagens séricas de creatinina, ureia, ALT (alanina aminotransferase), FA (fosfatase alcalina) foram solicitados. Para o diagnóstico confirmatório de leptospirose foi realizado teste sorológico pelo teste de aglutinação microscópica (MAT) e também teste molecular pela reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR). Dos 24 casos de cães suspeitos de leptospirose, seis (25%) foram positivos no MAT, e três (12,5%) no qPCR, sendo 1 (um) (4,17%) positivo nos dois testes diagnósticos avaliados. Quando se associou MAT + qPCR a positividade foi para 8/24 (33,3%). Os sorogrupos reativos predominantes foram Icterohaemorrhagiae (33,33%) e Djasiman (33,33%), seguido de Ballum (16,60%). A sensibilidade e especificidade da qPCR em relação teste padrão ouro (MAT) foi 16,7 % e 88,9%, respectivamente. Houve alterações nos níveis séricos de creatinina, ureia e FA no grupo positivo aos testes diagnósticos (MAT/qPCR), porém somente ureia e FA apresentaram valores elevados no grupo negativo. Quando se comparou os parâmetros bioquímicos no grupo positivo aos testes diagnósticos (MAT/qPCR), e negativo, não se observou nenhuma diferença estatística significativa entre os elementos avaliados (p>0,05). Conclui-se para o diagnóstico de leptospirose canina aguda, o médico veterinário deve associar os achados clínicos-patológicos aos resultados do MAT de forma pareada e o qPCR de urina.(AU)

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Background: Serological evaluation performed by double agar gel immunodiffusion test (DID) is used for diagnosis, evaluation of severity, management of paracoccidioidomycosis patients, and development of new clinical studies. For these reasons, the Botucatu Medical School of UNESP maintains a serum bank at the Experimental Research Unit with patient clinical data. This study aimed to evaluate the influence of the freeze-thaw cycle and different blood matrices on the titration of circulating antibodies. Methods: The study included 207 patients with confirmed (etiology-demonstrated) or probable (serology-demonstrated) paracoccidioidomycosis, and DID was performed with culture filtrate from Paracoccidioides brasiliensis B339 as antigen. First experiment: the antibody levels were determined in serum samples from 160 patients with the chronic form and 20 with the acute/subacute form, stored at ­80o C for more than six months. Second experiment: titers of 81 samples of serum and plasma with ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) or heparin, from 27 patients, were compared according to matrix and effect of storage at ­20o C for up to six months. Differences of titers higher than one dilution were considered discordant. Results: First experiment: test and retest presented concordant results in serum stored for up to three years, and discordant titers in low incidence in storage for four to six years but high incidence when stored for more than six years, including conversion from reagent test to non-reagent retest. Second experiment: serum, plasma-EDTA and plasma-heparin samples showed concordant titers, presenting direct correlation, with no interference of storage for up to six months. Conclusions: Storage at ­80o C for up to six years has no or little influence on the serum titers determined by DID, permitting its safe use in studies depending on this parameter. The concordant titrations in different blood matrices demonstrated that the plasma can be used for immunodiffusion test in paracoccidioidomycosis, with stability for at least six months after storage at ­20o C.(AU)

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The objective of this work was to describe the clinical, pathological, and serological aspects of paratuberculosis in a bullock on dairy and beef farm in the municipality of Inhangapí, state of Pará. The animal was raised extensively and presented progressive weight loss, pale mucous membranes, and chronic diarrhea. A blood sample was collected for serology by the indirect ELISA technique. Due to the unfavorable prognosis, the animal was euthanized and necropsied. At necropsy, there was thickened and wrinkled intestinal mucosa, enlarged mesenteric lymph nodes and liquid intestinal contents with a brown color. Organ fragments were fixed in 10% buffered formaldehyde, embedded in paraffin wax, cut, and stained by hematoxylin and eosin and by Ziehl-Neelsen techniques. Histopathology showed intense granulomatous infiltration with Langhans giant cells in the lamina propria and submucosa of the small intestine, Peyer patches and mesenteric lymph nodes. Ziehl-Neelsen staining revealed many intralesional acid-fast bacilli. Antibody searching against Mycobacterium avium (subsp.) paratuberculosis was positive. The diagnosis of paratuberculosis was based on epidemiological, clinical, pathological, and serological data. This is the first report of clinical paratuberculosis, confirmed by pathology and serology, in a bullock in the state of Pará.

Descrevem-se os aspectos clínicos, patológicos e sorológicos de paratuberculose diagnosticada em um bovino, no município de Inhangapi, estado do Pará, em uma propriedade de leite e corte. O bovino era criado extensivamente e apresentava emagrecimento progressivo, mucosas pálidas e diarreia crônica. Foi coletada amostra de sangue para realização da sorologia pela técnica de ELISA indireto. Em razão do prognóstico desfavorável, foi realizada a eutanásia e a necropsia do animal. À necropsia, observou-se mucosa do intestino espessada e enrugada, linfonodos mesentéricos aumentados de tamanho e conteúdo intestinal líquido e com coloração marrom. Fragmentos dos órgãos foram fixados em formalina 10%, incluídos em parafina, cortados e corados pelas técnicas de hematoxilina e eosina e Ziehl-Neelsen. Na histopatologia, havia intensa infiltração granulomatosa com células gigantes de Langhans na lâmina própria e submucosa do intestino delgado, placas de Peyer e linfonodos mesentéricos. A coloração de Ziehl-Neelsen revelou numerosos bacilos álcool-ácido resistentes intralesionais. A pesquisa de anticorpos anti-Mycobacterium avium (subsp.) paratuberculosis foi positiva. O diagnóstico da paratuberculose foi baseado nos dados epidemiológicos, clínicos, patológicos e sorológicos. Este é o primeiro relato de paratuberculose clínica, confirmada pela patologia e sorologia, em um bovino no estado do Pará.

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Canine Monocytic Ehrlichiosis (CME) is a tick-borne disease caused by Ehrlichia canis that manifests as acute, chronic, or subclinical forms without specific clinical symptoms. This disease is diagnosed using clinical and laboratory findings (blood smears, molecular techniques, and serology). This study aimed to demonstrate the occurrence of false-positive results for Ehrlichia spp. in veterinary clinical practice. Seventy dogs with positive blood smears before treatment for Ehrlichia spp. subjected to doxycycline and imidazole treatment were analyzed using hematological examination, polymerase chain reaction (PCR), and indirect immunofluorescence assay. PCR analysis identified no samples positive for E. canis according to PCR analysis, while serological techniques showed a frequency of 51.4% in dogs with antibodies (IgG) against Ehrlichia spp. There was a correlation between hyperproteinemia and titers > 10,240. Nonspecific changes occurred in 24.3% (17/70) of the patients with CME, such as anemia, leukopenia, and thrombocytopenia. The results indicated that the blood count and blood smear analysis were insufficient for diagnosis and that positive serological results associated with hematological changes suggestive of ehrlichiosis in dogs can be incorrectly assigned by a veterinarian, putting animals at risk.(AU)

A Erliquiose Monocítica Canina (EMC) é uma doença transmitida por carrapatos causada pela Ehrlichia canis, apresentando formas aguda, crônica ou subclínica, sem sintomatologia clínica específica. O diagnóstico da doença é baseado na associação entre achados clínicos e laboratoriais (esfregaços de sangue, técnicas moleculares e sorologia). O objetivo deste estudo foi demonstrar a ocorrência de resultados falso-positivos para Ehrlichia spp. na prática clínica veterinária. Neste contexto, 70 cães com esfregaços sanguíneos positivos, antes do tratamento, para Ehrlichia spp. submetidos ao tratamento com doxiciclina e/ou imizol foram analisados por exame hematológico, testados por reação em cadeia da polimerase (PCR) e por ensaio de imunofluorescência indireta. Não houve a detecção de amostras positivas para E. canispela análise de PCR, enquanto as técnicas sorológicas mostraram uma frequência de 51,4% de cães com anticorpos (IgG) contra Ehrlichia spp. Houve correlação entre hiperproteinemia e títulos > 10.240. 24,3% (17/70) apresentaram alterações inespecíficas que ocorreram na EMC, como anemia, leucopenia e trombocitopenia. Os resultados indicaram que o hemograma e a análise do esfregaço sanguíneo não foram suficientes para completar o diagnóstico em cães. No entanto, resultados sorológicos positivos associados a alterações hematológicas sugestivas de erliquiose em cães podem ser erroneamente atribuídos pelo veterinário, o que pode colocar em risco a vida dos animais.(AU)

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This study establishes the serological frequency against Neospora caninum on day zero and the presence of N. caninum DNA surveyed throughout the gestation of Bubalus bubalis females in a bovine buffalo system in the central zone of the state of Veracruz, Mexico. Blood samples were taken from 11 females in 6 different sampling periods and analyzed for N. caninum antibodies detection on day zero. DNA detection by PCR was performed on all sampling periods. The gestation months of the females were recorded for five trimesters by ultrasonography, as well as births and pregnancy losses. Recorded seropositivity and positivity for agent DNA were 90.9% (95% CI 58.7-9.7) and 36.3% (95% CI 10.9-69.2), respectively, on day zero. N. caninum DNA was detected between 18.1% (95% CI 2.3-51.7) and 45.4% (95% CI 16.7-76.6) over the five trimesters of observation, with three births and three abortions recorded. The studied water buffalo population had a high presence of N. caninum antibodies; however, the detection of N. caninum DNA remained below 47% in the females. The association was only observed in the detection of DNA with pregnant females (P 0.007). Our results support the hypothesis of the resistance of water buffaloes to infection and the onset of clinical signs against infection by N. caninum even upon a high possibility of infection and reinfection described in this production system in Mexico.(AU)

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This study investigated the association between neurological signs as well as plausible risk factors and the seroprevalence of Toxoplasma gondii and Neospora caninum infection in dogs of the Campo Grande region of Mato Grosso do Sul, Brazil. In this study, the dogs were divided into two groups based on the presence and the absence of neurological signs (n=30 in each group). Serological diagnosis was performed using the indirect fluorescent antibody test. In the group with neurological disorders, 23.3% and 30% of the dogs had anti-T. gondii and anti-N. caninum antibodies, respectively. Moreover, three dogs from this group showed co-infection with both protozoa. In the group without neurological signs, 16.7% and 13.3% of the dogs were seropositive for T. gondii and N. caninum, respectively. Although presence of neurological signs was not associated with T. gondii and N. caninum infections (P = 0.747 and P = 0.21, respectively), there was a statistical association between T. gondii seropositivity and peripheral neurological alteration (P = 0.016) among dogs with neurological signs. Raw meat ingestion was the only risk factor associated with the presence of anti-N. caninum antibodies (P = 0.041). Results revealed evidence of exposure to N. caninum and T. gondii in dogs irrespective of the presence of neurological signs. Moreover, this study highlighted the need for serological investigation of T. gondii in dogs with disturbances in peripheral nervous systems and not offering raw meat to animals to avoid the risk of N. caninum infection.

Este estudo teve como objetivo investigar a associação entre sinais neurológicos, assim como possíveis fatores de risco e soroprevalência de Toxoplasma gondii e Neospora caninum em cães de Campo Grande, região de Mato Grosso do Sul, Brasil. Nesse estudo, os cães foram divididos em dois grupos, baseado na presença ou ausência de sinais neurológicos (n = 30 em cada grupo). O diagnóstico sorológico foi realizado por meio do teste imunofluorescência indireta (RIFI). No grupo com distúrbios neurológicos, 23.3% e 30% dos cães tinham anticorpos anti-T. gondii e anti-N. caninum, respectivamente. Além disso, três cães deste grupo estavam coinfectados com ambos os protozoários. No grupo sem sinais neurológicos, 16.7% e 13.3% dos cães foram soropositivos para T. gondii e N. caninum, respectivamente. Apesar da presença de sinais neurológicos não ter sido associado a infecção por T. gondii ou N. caninum ( P = 0.747 e P = 0.21, respectivamente), houve associação estatística entre soropositividade para T. gondii e alteração neurológica periférica (P = 0.016) entre os cães com sinais neurológicos. A ingestão de carne crua foi o único fator de risco que apresentou associação com a presença de anticorpos para N. caninum (P = 0.041). Estes resultados mostraram evidência de que a exposição a N. caninum e T. gondii em cães independe da presença de sinais neurológicos. Além disso, este estudo destaca a necessidade de investigação sorológica para T. gondii em cães com distúrbios neurológicos periféricos, e o oferecimento de carne crua aos animais deve ser evitada devido ao risco de infecção por neosporose.