The effect of adding L-ergothioneine in culture medium on blastocyst development rates

Background: Oocytes and embryos produce energy through mitochondrial oxidative phosphorylation by using oxygen. The membrane structure of the embryo is mostly composed of unsaturated fatty acids, for this reason DNA fragmentation, apoptosis, and abnormal gene expression are shaped as a result of the lipid peroxidation during culture. Oxidative stress (OS) is one of the most important problems affecting the in vitro embryo development. Antioxidant supplementation to the culture medium has been an alternative way to reduce cell damage caused by oxidative stress in in vitro embryo production systems. In this study, it was aimed to determine the effect of L-ergothioneine on blastocyst development when added to the culture medium. Materials, Methods & Results: The material of the study consisted of oocytes aspirated from the ovaries of Holstein cows which were collected from the local slaughterhouse. The ovaries were delivered to the laboratory within 2-3 h in a thermos which provided a constant temperature of 25-30o C with physiological saline (0.9%) containing antibiotics. All follicles in the 3-8 mm range on the ovaries were aspirated using 20 G needle. The collected follicle fluid was filtered through filters with a pore diameter of 70 micrometers. Cells remaining in the filter were washed with OPU medium and transferred to the petri dishes. Fluids were examined under a stereomicroscope. The cumulus-oocyte complexes were classified, and A and B quality oocytes were included to the study (A, B, C, and D quality COC). Oocytes aspirated from the ovaries and collected later on were incubated in IVM medium for 22 h. After maturation, it was taken into IVF medium, semen was added and incubated for 20-22 h. Possible zygotes to be taken to the culture stage were transferred to culture (IVC) drops with (L-ergothioneine 100 µL/mL (n:121) added and without antioxidant (control (n:124)), and kept in the incubator for 6-7 days. Evaluated on the 7th day differences in in vitro embryo production stages were evaluated with the Chi-square test. The study was run in 5 replicates each time, with at least 20 possible zygotes for per group being cultured. It was determined that 262 (87.33%) of a total of 300 oocytes undergoing in vitro maturation were matured. It was determined that 245 of the mature oocytes were fertilized (93.51%). The cleavage rates of the groups were determined as 87.60% and 86.29%, respectively. Eighty-two (33.47%) blastocysts were obtained from 245 zygotes taken into the culture stage, and the blastocyst rates in the groups were found to be 40.50% and 26.61%, respectively. After the study, it was determined that the statistical difference between L-ergothioneine and control in cleavage rates was insignificant (P > 0.05) and blastocyst rates was significant (P < 0.05) Discussion: Oxygen content above normal ratios can increase the formation of reactive oxygen species (ROS), particularly hydrogen peroxide (H2 O2 ), hydroxyl radical (HO·), and peroxyl radicals (ROO·). The increased rate of ROS negatively affects the success of IVP in mammalian embryos. It was observed that L-ergothioneine, which has high antioxidant activity, improved blastocyst development rates, and higher blastocyst rates could be achieved compared to the control group. By investigating the use of L-ergothioneine in different doses, it was thought that the dose with the highest antioxidant activity could be added to the culture medium in in vitro embryo production and more blastocysts could be produced.

Maturação in vitro de oócitos de cutias (Dasyprocta prymnolopha, Wagler 1831) seguida de fertilização in vitro e ativação partenogenética / In vitro maturation of agoutis (Dasyprocta prymnolopha) oocytes followed by in vitro fertilization and parthenogenetic activation

O objetivo foi avaliar protocolos de maturação in vitro (MIV) para oócitos de cutias, seguida de fertilização in vitro (FIV) e ativação partenogenética (AP). Os oócitos imaturos (CCOs) foram obtidos por fatiamento do ovário, após OSH, e submetidos a três grupos: MAT - 16 (16 horas de maturação), MAT - 20 (20 horas de maturação) e MAT - 24 (24 horas de maturação), em incubadora de cultivo a 38,8°C, com atmosfera de 5% de CO2 e 95% de umidade relativa. A maturação foi analisada pela presença do primeiro corpúsculo polar. Em seguida, os CCOs maduros foram submetidos à FIV, com período de coincubação dos CCOs e dos espermatozoides de 15h, a 38,8ºC e 5% de CO2, e AP com ionomicina. Os grupos de MIV foram analisados utilizando-se o teste qui-quadrado e, nos experimentos de FIV e AP, foram analisadas a taxa de clivagem e a proporção de desenvolvimento embrionário. A análise estatística foi realizada utilizando-se o programa SAS. Houve diferença significativa entre os grupos de maturação, tendo os grupos MAT - 20 e MAT - 24 apresentado maior porcentagem de oócitos maturados in vitro. As taxas de clivagem e de desenvolvimento embrionário foram de 8,6% e 2,9%, respectivamente, na FIV, e de 63,6% e 15,1%, na AP. Entretanto, nos dois casos, o embrião não passou do estágio de mórula.(AU)

The objective was to evaluate IVM protocols for agouti oocytes, followed by in vitro fertilization (IVF) and parthenogenetic activation (PA). The immature oocytes (CCOs) were obtained by slicing the ovary after OSH and submitted to three groups: MAT - 16 (16 hours maturation), MAT - 20 (20 hours maturation) and MAT - (24 hours maturation), in a culture incubator at 38.8°C, with an atmosphere of 5% CO2 and 95% relative humidity. The maturation was analyzed by the presence of the first polar corpuscle. Then, mature CCOs were submitted to IVF, with co-incubation period of CCOs and spermatozoa from 15h to 38.8°C and 5% of CO2, and PA with inomycin. The IVM groups were analyzed using the chi-square test and in the FIV and PA experiment the rate of cleavage and the rate of embryonic development were analyzed. Statistical analysis was performed using the SAS program. There was a significant difference between the maturation groups, and the MAT - 20 and MAT - 24 groups showed a higher percentage of matured oocytes in vitro. The rates of cleavage and embryonic development were 8.6% and 2.9%, respectively in FIV and 63.6% and 15.1% in PA. However, in both cases the embryo did not pass beyond the morula stage.(AU)

Maturação in vitro de oócitos de cutias (Dasyprocta prymnolopha, Wagler 1831) seguida de fertilização in vitro e ativação partenogenética / In vitro maturation of agoutis (Dasyprocta prymnolopha) oocytes followed by in vitro fertilization and parthenogenetic activation

O objetivo foi avaliar protocolos de maturação in vitro (MIV) para oócitos de cutias, seguida de fertilização in vitro (FIV) e ativação partenogenética (AP). Os oócitos imaturos (CCOs) foram obtidos por fatiamento do ovário, após OSH, e submetidos a três grupos: MAT - 16 (16 horas de maturação), MAT - 20 (20 horas de maturação) e MAT - 24 (24 horas de maturação), em incubadora de cultivo a 38,8°C, com atmosfera de 5% de CO2 e 95% de umidade relativa. A maturação foi analisada pela presença do primeiro corpúsculo polar. Em seguida, os CCOs maduros foram submetidos à FIV, com período de coincubação dos CCOs e dos espermatozoides de 15h, a 38,8ºC e 5% de CO2, e AP com ionomicina. Os grupos de MIV foram analisados utilizando-se o teste qui-quadrado e, nos experimentos de FIV e AP, foram analisadas a taxa de clivagem e a proporção de desenvolvimento embrionário. A análise estatística foi realizada utilizando-se o programa SAS. Houve diferença significativa entre os grupos de maturação, tendo os grupos MAT - 20 e MAT - 24 apresentado maior porcentagem de oócitos maturados in vitro. As taxas de clivagem e de desenvolvimento embrionário foram de 8,6% e 2,9%, respectivamente, na FIV, e de 63,6% e 15,1%, na AP. Entretanto, nos dois casos, o embrião não passou do estágio de mórula.(AU)

The objective was to evaluate IVM protocols for agouti oocytes, followed by in vitro fertilization (IVF) and parthenogenetic activation (PA). The immature oocytes (CCOs) were obtained by slicing the ovary after OSH and submitted to three groups: MAT - 16 (16 hours maturation), MAT - 20 (20 hours maturation) and MAT - (24 hours maturation), in a culture incubator at 38.8°C, with an atmosphere of 5% CO2 and 95% relative humidity. The maturation was analyzed by the presence of the first polar corpuscle. Then, mature CCOs were submitted to IVF, with co-incubation period of CCOs and spermatozoa from 15h to 38.8°C and 5% of CO2, and PA with inomycin. The IVM groups were analyzed using the chi-square test and in the FIV and PA experiment the rate of cleavage and the rate of embryonic development were analyzed. Statistical analysis was performed using the SAS program. There was a significant difference between the maturation groups, and the MAT - 20 and MAT - 24 groups showed a higher percentage of matured oocytes in vitro. The rates of cleavage and embryonic development were 8.6% and 2.9%, respectively in FIV and 63.6% and 15.1% in PA. However, in both cases the embryo did not pass beyond the morula stage.(AU)

Reproductive biology of pequira Bryconamericus stramineus (Eigenmann, 1908) in Funil Reservoir-MG, Brazil / Biologia reprodutiva da Pequira Bryconamericus stramineus (Eigenmann, 1908) no reservatório de Funil-MG, Brasil

In order to evaluate aspects of reproductive biology of the pequira ( Bryconamericus stramineus) in the elevator of the Funil Dam - MG, fish capture was carried out from November 2008 to January 2009 and 317 individuals were collected. The mean standard length (SL) of the population was 4.96 cm and mean weight 1.80 g. The females had SL of 5.0 cm, while males had a SL of 4.6 cm. A sex ratio of 2.20: 1 (females: male) was observed. Our results show that 73% of the individuals analyzed were considered adults. The species presented low fecundity, mean of 470.9 oocytes per female and a mean diameter of 221.08 m, with an increase in oocyte diameter over the evaluation period. The length of the first gonadal maturation was estimated at 5.0 cm. The results obtained in this work suggest that the reproductive cycle of the species occurs in the analyzed period. Although this species does not have migratory reproductive habits, the presence of adults in the reproductive stage was observed in the transposition area, which suggests a search for new environments for spawning.(AU)

Com o objetivo de avaliar aspectos da biologia reprodutiva da pequira Bryconamericus stramineus no elevador da represa do Funil - MG foram realizadas capturas entre os meses de novembro de 2008 a janeiro de 2009, sendo coletados 317 indivíduos. O comprimento padrão (CP) médio da população foi de 4,96 cm e peso médio de 1,80 g. As fêmeas apresentaram CP de 5,0 cm, enquanto que os machos obtiveram um CP de 4,6 cm. Foi observada proporção sexual de 2,20:1(fêmeas:macho). Dos indivíduos analisados, 73% foram considerados adultos. A espécie apresentou baixa fecundidade, com média de 470,9 ovócitos por fêmea e diâmetro médio de 221,08 m, ocorrendo aumento no diâmetro de ovócitos com o decorrer do tempo no período avaliado. O comprimento de primeira maturação gonadal foi estimado em 5,0 cm. Os resultados obtidos neste trabalho sugerem que o ciclo reprodutivo da espécie ocorre no período analisado. Embora esta espécie não tenha hábitos reprodutivos migratórios, a presença de adultos no estágio reprodutivo foi observada na área de transposição, o que sugere a busca de novos ambientes para a reprodução.(AU)

Somatic embryos from Phalaenopsis classic Spotted Pink (Orchidaceae) protocorms / Embriões somáticos provenientes de protocormos de Phalaenopsis classic Spotted Pink (Orquidaceae)

The aim of the present study was to induce the formation of somatic embryos in protocorms from Phalaenopsis Classic Spotted Pink hybrids at two physiological maturation stages, namely: 80 and 120 days after seed inoculation (DASI). Protocorms were inoculated in ½ MS medium supplemented with 0.1 mg L-¹ ANA and 3 mg L-¹ TDZ. Protocorms were inoculated 120 days after sowing were more developed at the 15th cultivation day due to the formation of pro-embryogenic structures. It was possible seeing the formation of globular- and torpedo-stage somatic embryos at the 30th day of cultivation in somatic embryogenesis (SE) induction medium. The protocorms inoculated at the 80th DASI did not formed somatic embryos; they oxidized 20 days after cultivation in SE-induction medium. The formation of somatic embryos happened directly on the explant, thus characterizing a direct somatic embryogenesis. The embryos converted into plants when the somatic embryos were transferred to the nutrient medium containing no growth regulator. Therefore, it was concluded that the somatic embryos induction from protocorms 120 days after sowing was positive, since the embryos were able to become plants and presented vegetative organs with morphological traits similar to those of the matrix plant.(AU)

O presente estudo buscou induzir a formação de embriões somáticos em protocormos do híbrido Phalaenopsis Classic Spotted Pink em dois estádios de maturação fisiológica aos 80 e 120 dias após a inoculação das sementes (DAIS). Os protocormos foram inoculados em meio ½ MS suplementado com 0,1 mg L-¹ de ANA e 3 mg L-¹ de TDZ. Aos 15 dias de cultivo os protocormos, inoculados aos 120 dias após a semeadura, apresentavam estádio mais desenvolvido, apresentando formação de estruturas pró-embriogênicas. Aos 30 dias de cultivo em meio de indução de ES observou-se a formação de embriões somáticos na fase globular e torpedo. Os protocormos inoculados com 80 DAIS não evoluíram para a formação de embriões somáticos, ocorrendo a oxidação destes aos 20 dias após o cultivo em meio de indução de ES. A formação dos embriões somáticos ocorreu diretamente no explante, caracterizando uma embriogênese somática direta. Quando os embriões somáticos foram transferidos para o meio nutritivo sem regulador de crescimento, houve a conversão em plantas. Diante disso, conclui-se que a indução de embriões somáticos a partir de protocormos com 120 dias após a semeadura, foi positiva, em que os embriões obtidos apresentaram competência em converter-se em plantas, apresentando os órgãos vegetativos com características morfológicas satisfatórias.(AU)

Reproductive biology of pequira Bryconamericus stramineus (Eigenmann, 1908) in Funil Reservoir-MG, Brazil

Abstract In order to evaluate aspects of reproductive biology of the pequira ( Bryconamericus stramineus) in the elevator of the Funil Dam - MG, fish capture was carried out from November 2008 to January 2009 and 317 individuals were collected. The mean standard length (SL) of the population was 4.96 cm and mean weight 1.80 g. The females had SL of 5.0 cm, while males had a SL of 4.6 cm. A sex ratio of 2.20: 1 (females: male) was observed. Our results show that 73% of the individuals analyzed were considered adults. The species presented low fecundity, mean of 470.9 oocytes per female and a mean diameter of 221.08 m, with an increase in oocyte diameter over the evaluation period. The length of the first gonadal maturation was estimated at 5.0 cm. The results obtained in this work suggest that the reproductive cycle of the species occurs in the analyzed period. Although this species does not have migratory reproductive habits, the presence of adults in the reproductive stage was observed in the transposition area, which suggests a search for new environments for spawning.

Resumo Com o objetivo de avaliar aspectos da biologia reprodutiva da pequira Bryconamericus stramineus no elevador da represa do Funil - MG foram realizadas capturas entre os meses de novembro de 2008 a janeiro de 2009, sendo coletados 317 indivíduos. O comprimento padrão (CP) médio da população foi de 4,96 cm e peso médio de 1,80 g. As fêmeas apresentaram CP de 5,0 cm, enquanto que os machos obtiveram um CP de 4,6 cm. Foi observada proporção sexual de 2,20:1(fêmeas:macho). Dos indivíduos analisados, 73% foram considerados adultos. A espécie apresentou baixa fecundidade, com média de 470,9 ovócitos por fêmea e diâmetro médio de 221,08 m, ocorrendo aumento no diâmetro de ovócitos com o decorrer do tempo no período avaliado. O comprimento de primeira maturação gonadal foi estimado em 5,0 cm. Os resultados obtidos neste trabalho sugerem que o ciclo reprodutivo da espécie ocorre no período analisado. Embora esta espécie não tenha hábitos reprodutivos migratórios, a presença de adultos no estágio reprodutivo foi observada na área de transposição, o que sugere a busca de novos ambientes para a reprodução.

Reproductive biology of pequira Bryconamericus stramineus (Eigenmann, 1908) in Funil Reservoir-MG, Brazil

Abstract In order to evaluate aspects of reproductive biology of the pequira ( Bryconamericus stramineus) in the elevator of the Funil Dam - MG, fish capture was carried out from November 2008 to January 2009 and 317 individuals were collected. The mean standard length (SL) of the population was 4.96 cm and mean weight 1.80 g. The females had SL of 5.0 cm, while males had a SL of 4.6 cm. A sex ratio of 2.20: 1 (females: male) was observed. Our results show that 73% of the individuals analyzed were considered adults. The species presented low fecundity, mean of 470.9 oocytes per female and a mean diameter of 221.08 m, with an increase in oocyte diameter over the evaluation period. The length of the first gonadal maturation was estimated at 5.0 cm. The results obtained in this work suggest that the reproductive cycle of the species occurs in the analyzed period. Although this species does not have migratory reproductive habits, the presence of adults in the reproductive stage was observed in the transposition area, which suggests a search for new environments for spawning.

Resumo Com o objetivo de avaliar aspectos da biologia reprodutiva da pequira Bryconamericus stramineus no elevador da represa do Funil - MG foram realizadas capturas entre os meses de novembro de 2008 a janeiro de 2009, sendo coletados 317 indivíduos. O comprimento padrão (CP) médio da população foi de 4,96 cm e peso médio de 1,80 g. As fêmeas apresentaram CP de 5,0 cm, enquanto que os machos obtiveram um CP de 4,6 cm. Foi observada proporção sexual de 2,20:1(fêmeas:macho). Dos indivíduos analisados, 73% foram considerados adultos. A espécie apresentou baixa fecundidade, com média de 470,9 ovócitos por fêmea e diâmetro médio de 221,08 m, ocorrendo aumento no diâmetro de ovócitos com o decorrer do tempo no período avaliado. O comprimento de primeira maturação gonadal foi estimado em 5,0 cm. Os resultados obtidos neste trabalho sugerem que o ciclo reprodutivo da espécie ocorre no período analisado. Embora esta espécie não tenha hábitos reprodutivos migratórios, a presença de adultos no estágio reprodutivo foi observada na área de transposição, o que sugere a busca de novos ambientes para a reprodução.

Analysis of the onshore competitive recreational fishery in Sergipe / Análise da pesca esportiva competitiva de beira de praia em Sergipe

This study aimed at identifying the species caught in competitive fishing events and to analyze the profile of recreational fishers in Sergipe. Sampling took place during nine rounds of the XXI Campeonato Sergipano de Pesca da ASPA-BV in 2014. Sampled shes were identified, measured, weighed, and had their sex and maturation stage identified. A total of 2,794 fishes (449 kg) were caught, from which 61.7% were sampled. The most commonly caught species were Sciades proops, Menticirrhus littoralis, and Polydactylus virginicus. The minimum catch size (TLmin) was set at 15 cm. At this size, many specimens of these three species were immature and thus we suggest an increase of the minimum size to 20 cm. A questionnaire was used to describe the profile of local anglers. All recreational fishers interviewed (75) were males, 16-64 years old and mainly with monthly mean income of 6-10 minimum wages. All surveyed anglers go fishing in coastal and estuarine regions, 52 in fresh water and 40 in oceanic areas. The main target species cited by respondents, which are also caught, were mojarra, snook, jacks, and mackerels, and the main baits used were Litopenaeus vannamei, Mugil spp., and Clupeiformes.(AU)

Este estudo teve como objetivo identificar as espécies capturadas em eventos de pesca competitiva e analisar o perfil do pescador esportivo em Sergipe. As amostragens foram realizadas durante nove etapas do XXI Campeonato Sergipano de Pesca da ASPA-BV em 2014. Os peixes amostrados foram identificados, medidos, pesados, sexados e seu estágio de maturação avaliado. No campeonato foram capturados 2794 peixes (449 kg), sendo amostrados 61,7%. As espécies capturadas mais comuns foram Sciades proops, Menticirrhus littoralis e Polydactylus virginicus. O tamanho mínimo de captura (CTmin) estabelecido foi 15 cm. Com esse tamanho, um grande número de exemplares das três espécies encontra-se imaturo, sugerindo-se um aumento do tamanho mínimo para 20 cm. Um questionário foi usado para descrever o perfil dos pescadores esportivos. Todos eles (75) eram homens, com 16-64 anos e renda mensal dominante de 6-10 salários mínimos. Todos pescadores entrevistados praticam pesca na região costeira e estuarina, 52 em água doce e 40 em região oceânica. As principais espécies-alvo citadas pelos respondentes, que também são capturadas, foram carapeba, robalo, xaréu, cavala e serra, e as iscas mais usadas são Litopenaeus vannamei, Mugil spp. e Clupeiformes.(AU)

Analysis of the onshore competitive recreational fishery in Sergipe / Análise da pesca esportiva competitiva de beira de praia em Sergipe

This study aimed at identifying the species caught in competitive fishing events and to analyze the profile of recreational fishers in Sergipe. Sampling took place during nine rounds of the XXI Campeonato Sergipano de Pesca da ASPA-BV in 2014. Sampled shes were identified, measured, weighed, and had their sex and maturation stage identified. A total of 2,794 fishes (449 kg) were caught, from which 61.7% were sampled. The most commonly caught species were Sciades proops, Menticirrhus littoralis, and Polydactylus virginicus. The minimum catch size (TLmin) was set at 15 cm. At this size, many specimens of these three species were immature and thus we suggest an increase of the minimum size to 20 cm. A questionnaire was used to describe the profile of local anglers. All recreational fishers interviewed (75) were males, 16-64 years old and mainly with monthly mean income of 6-10 minimum wages. All surveyed anglers go fishing in coastal and estuarine regions, 52 in fresh water and 40 in oceanic areas. The main target species cited by respondents, which are also caught, were mojarra, snook, jacks, and mackerels, and the main baits used were Litopenaeus vannamei, Mugil spp., and Clupeiformes.

Este estudo teve como objetivo identificar as espécies capturadas em eventos de pesca competitiva e analisar o perfil do pescador esportivo em Sergipe. As amostragens foram realizadas durante nove etapas do XXI Campeonato Sergipano de Pesca da ASPA-BV em 2014. Os peixes amostrados foram identificados, medidos, pesados, sexados e seu estágio de maturação avaliado. No campeonato foram capturados 2794 peixes (449 kg), sendo amostrados 61,7%. As espécies capturadas mais comuns foram Sciades proops, Menticirrhus littoralis e Polydactylus virginicus. O tamanho mínimo de captura (CTmin) estabelecido foi 15 cm. Com esse tamanho, um grande número de exemplares das três espécies encontra-se imaturo, sugerindo-se um aumento do tamanho mínimo para 20 cm. Um questionário foi usado para descrever o perfil dos pescadores esportivos. Todos eles (75) eram homens, com 16-64 anos e renda mensal dominante de 6-10 salários mínimos. Todos pescadores entrevistados praticam pesca na região costeira e estuarina, 52 em água doce e 40 em região oceânica. As principais espécies-alvo citadas pelos respondentes, que também são capturadas, foram carapeba, robalo, xaréu, cavala e serra, e as iscas mais usadas são Litopenaeus vannamei, Mugil spp. e Clupeiformes.

Beneficiamento pós-colheita de lima ácida 'Tahiti' afeta sua qualidade e conservação

ABSTRACT: This study aimed to determine the effects of postharvest packing line stages of 'Tahiti' acid lime on their quality and conservation. Fruits were harvested by twisting in physiological maturation stage and packed according to the procedure for export fruits. Five sampling points were set throughout the packing line, which correspond to the treatments studied: "Field"- sampling directly in the plant; "Reception"- collection in the reception area of the packinghouse; "Rest"- collection after the first stage of the packing process; "Complete packing"- collection at the end of the packing process; "Marketing center" and collects at the reception area of the marketing center. Physical and chemical analyzes were conducted for 20 days of storage at 22±2ºC and 70±5% RH. Fruits that have gone through the complete packing process and those collected in the marketing center had higher fresh mass loss, higher incidence of oleocellosis, lower percentage of fruit on condition of marketing at the end of the storage period, pulp browning and higher degradation of ascorbic acid. Quality and conservation of 'Tahiti' lime fruits were affected by movement, handling and mechanical injuries that occur during postharvest processing.

RESUMO: O objetivo deste trabalho foi determinar os efeitos das etapas de beneficiamento pós-colheita de lima ácida 'Tahiti' na sua qualidade e conservação. Foram utilizados frutos colhidos por torção, em estádio de maturação fisiológica e beneficiados de acordo com o procedimento para frutos de exportação. Foram estabelecidos cinco pontos de coleta de frutos ao longo do processo de beneficiamento, os quais correspondem aos tratamentos estudados: "Campo"- coleta diretamente na planta; "Recepção"- na área de recepção da unidade de beneficiamento; "Repouso"- após a primeira etapa do beneficiamento; "Beneficiamento completo"- após o beneficiamento completo; e "Centro de comercialização"- na recepção do centro de comercialização. Foram conduzidas análises físicas e químicas durante 20 dias de armazenamento a 22±2ºC e 70±5% de UR. Os frutos que passaram pelo processo de beneficiamento completo e os que foram coletados no centro de comercialização apresentaram maior perda de massa fresca, maior incidência de oleocelose, menor porcentagem de frutos em condição de comercialização ao final do período de armazenamento, escurecimento da polpa e maior degradação de ácido ascórbico. A qualidade e conservação dos frutos de lima ácida 'Tahiti' foram prejudicadas pela movimentação, manipulação e injúrias mecânicas que ocorrem durante as etapas de beneficiamento pós-colheita.

Beneficiamento pós-colheita de lima ácida 'Tahiti' afeta sua qualidade e conservação

ABSTRACT: This study aimed to determine the effects of postharvest packing line stages of 'Tahiti' acid lime on their quality and conservation. Fruits were harvested by twisting in physiological maturation stage and packed according to the procedure for export fruits. Five sampling points were set throughout the packing line, which correspond to the treatments studied: "Field"- sampling directly in the plant; "Reception"- collection in the reception area of the packinghouse; "Rest"- collection after the first stage of the packing process; "Complete packing"- collection at the end of the packing process; "Marketing center" and collects at the reception area of the marketing center. Physical and chemical analyzes were conducted for 20 days of storage at 22±2ºC and 70±5% RH. Fruits that have gone through the complete packing process and those collected in the marketing center had higher fresh mass loss, higher incidence of oleocellosis, lower percentage of fruit on condition of marketing at the end of the storage period, pulp browning and higher degradation of ascorbic acid. Quality and conservation of 'Tahiti' lime fruits were affected by movement, handling and mechanical injuries that occur during postharvest processing.

RESUMO: O objetivo deste trabalho foi determinar os efeitos das etapas de beneficiamento pós-colheita de lima ácida 'Tahiti' na sua qualidade e conservação. Foram utilizados frutos colhidos por torção, em estádio de maturação fisiológica e beneficiados de acordo com o procedimento para frutos de exportação. Foram estabelecidos cinco pontos de coleta de frutos ao longo do processo de beneficiamento, os quais correspondem aos tratamentos estudados: "Campo"- coleta diretamente na planta; "Recepção"- na área de recepção da unidade de beneficiamento; "Repouso"- após a primeira etapa do beneficiamento; "Beneficiamento completo"- após o beneficiamento completo; e "Centro de comercialização"- na recepção do centro de comercialização. Foram conduzidas análises físicas e químicas durante 20 dias de armazenamento a 22±2ºC e 70±5% de UR. Os frutos que passaram pelo processo de beneficiamento completo e os que foram coletados no centro de comercialização apresentaram maior perda de massa fresca, maior incidência de oleocelose, menor porcentagem de frutos em condição de comercialização ao final do período de armazenamento, escurecimento da polpa e maior degradação de ácido ascórbico. A qualidade e conservação dos frutos de lima ácida 'Tahiti' foram prejudicadas pela movimentação, manipulação e injúrias mecânicas que ocorrem durante as etapas de beneficiamento pós-colheita.

Influence of maturity stage on fruit longevity of cherry tomatoes stored at ambient and controlled temperature / Influência do estádio de maturação na longevidade de frutos de tomate cereja armazenados sob temperatura ambiente e controlada

Fruit maturity stage has direct influence on the post-harvest life and consumer quality. Therefore, the understanding of the maturation process and its quality characteristics for storage are key factors for commercialization. In face of the foregoing, this study aimed to determine shelf life and changes in physical and chemical indexes of cherry tomatoes (Perinha Água Branca (PAB) and Mascot), assessing fruit harvested at four maturity stages and stored at ambient and controlled temperatures. For this, it was used fruit at turning, pink, red and ripe maturity stages, submitted to ambient (25 ± 2 °C) and controlled (12 °C and 90% RH) temperature, and assessed over time the indexes of fresh mass loss, titratable acidity, pH, soluble solids and ascorbic acid. The experimental design was completely randomized design in a factorial scheme of 2×4×7 for ambient temperature and 2×4×8 for controlled temperature. At ambient temperature, a longevity of up to 20 days was observed for PAB and Mascot fruit harvested at turning and pink maturity stages. When harvested at red and ripe stages, the longevity was of 15 days for PAB fruit and of 15 and 11 days, respectively, for Mascot fruit. At controlled temperature, PAB fruit showed longevity of 24 days when harvested at turning and pink stages and of 20 and 7 days, respectively, when harvested at red and ripe stages. A longevity of up to 27 days was observed for Mascot fruit harvested at turning stage and of 24 days for the other stages. The fruit harvested at turning and pink maturity stages, associated with storage under controlled conditions, presented higher longevity and maintenance of physical and chemical indexes of quality.

O estádio de maturação do fruto influencia diretamente na sua vida pós-colheita e na escolha por parte do consumidor, por isso o entendimento do processo de maturação e de suas características de qualidade para o armazenamento são fatores fundamentais para a comercialização. Diante disso, este trabalho teve por objetivo determinar o tempo de prateleira e alterações dos índices físicos e químicos em frutos de tomate do grupo cereja (Perinha Água Branca (PAB) e Mascot), colhidos em quatro estádios de maturação e armazenados sob temperatura ambiente e controlada. Para issa, foram utilizados frutos nos estádios de maturação: de vez, rosado, vermelho e maduro, submetidos às temperaturas: ambiente (25 ± 2 °C) e controlada (12 °C e UR de 90%) e avaliados os índices de perda de massa fresca, acidez titulável, pH, sólidos solúveis e ácido ascórbico ao longo do tempo. O delineamento experimental foi inteiramente casualisado em um fatorial 2x4x7 para temperatura ambiente e 2x4x8 para temperatura controlada. Em temperatura ambiente, longevidade de até 20 dias foi observada para frutos de PAB e Mascot colhidos nos estádios de maturação de vez e rosado. Quando colhidos nos estádios vermelho e maduro a longevidade foi de 15 dias para os frutos de PAB, e de 15 e 11 dias, respectivamente para os frutos de Mascot. Em temperatura controlada, frutos de PAB apresentaram longevidade de 24 dias quando colhidos de vez e rosado e de 20 e 7 dias, respectivamente, quando colhidos vermelho e maduro. Longevidade de até 27 dias foi observada para Mascot em frutos colhidos no estádio de vez e de 24 dias para os demais estádios. Frutos colhidos no estádio de maturação de vez e rosado associado ao armazenamento em condições controladas apresentam maior longevidade e manutenção dos índices físicos e químicos de qualidade.

Influence of maturity stage on fruit longevity of cherry tomatoes stored at ambient and controlled temperature / Influência do estádio de maturação na longevidade de frutos de tomate cereja armazenados sob temperatura ambiente e controlada

Fruit maturity stage has direct influence on the post-harvest life and consumer quality. Therefore, the understanding of the maturation process and its quality characteristics for storage are key factors for commercialization. In face of the foregoing, this study aimed to determine shelf life and changes in physical and chemical indexes of cherry tomatoes (Perinha Água Branca (PAB) and Mascot), assessing fruit harvested at four maturity stages and stored at ambient and controlled temperatures. For this, it was used fruit at turning, pink, red and ripe maturity stages, submitted to ambient (25 ± 2 °C) and controlled (12 °C and 90% RH) temperature, and assessed over time the indexes of fresh mass loss, titratable acidity, pH, soluble solids and ascorbic acid. The experimental design was completely randomized design in a factorial scheme of 2×4×7 for ambient temperature and 2×4×8 for controlled temperature. At ambient temperature, a longevity of up to 20 days was observed for PAB and Mascot fruit harvested at turning and pink maturity stages. When harvested at red and ripe stages, the longevity was of 15 days for PAB fruit and of 15 and 11 days, respectively, for Mascot fruit. At controlled temperature, PAB fruit showed longevity of 24 days when harvested at turning and pink stages and of 20 and 7 days, respectively, when harvested at red and ripe stages. A longevity of up to 27 days was observed for Mascot fruit harvested at turning stage and of 24 days for the other stages. The fruit harvested at turning and pink maturity stages, associated with storage under controlled conditions, presented higher longevity and maintenance of physical and chemical indexes of quality.(AU)

O estádio de maturação do fruto influencia diretamente na sua vida pós-colheita e na escolha por parte do consumidor, por isso o entendimento do processo de maturação e de suas características de qualidade para o armazenamento são fatores fundamentais para a comercialização. Diante disso, este trabalho teve por objetivo determinar o tempo de prateleira e alterações dos índices físicos e químicos em frutos de tomate do grupo cereja (Perinha Água Branca (PAB) e Mascot), colhidos em quatro estádios de maturação e armazenados sob temperatura ambiente e controlada. Para issa, foram utilizados frutos nos estádios de maturação: de vez, rosado, vermelho e maduro, submetidos às temperaturas: ambiente (25 ± 2 °C) e controlada (12 °C e UR de 90%) e avaliados os índices de perda de massa fresca, acidez titulável, pH, sólidos solúveis e ácido ascórbico ao longo do tempo. O delineamento experimental foi inteiramente casualisado em um fatorial 2x4x7 para temperatura ambiente e 2x4x8 para temperatura controlada. Em temperatura ambiente, longevidade de até 20 dias foi observada para frutos de PAB e Mascot colhidos nos estádios de maturação de vez e rosado. Quando colhidos nos estádios vermelho e maduro a longevidade foi de 15 dias para os frutos de PAB, e de 15 e 11 dias, respectivamente para os frutos de Mascot. Em temperatura controlada, frutos de PAB apresentaram longevidade de 24 dias quando colhidos de vez e rosado e de 20 e 7 dias, respectivamente, quando colhidos vermelho e maduro. Longevidade de até 27 dias foi observada para Mascot em frutos colhidos no estádio de vez e de 24 dias para os demais estádios. Frutos colhidos no estádio de maturação de vez e rosado associado ao armazenamento em condições controladas apresentam maior longevidade e manutenção dos índices físicos e químicos de qualidade.(AU)

Postharvest packing process of "Tahiti" acid lime affects their quality and conservation / Beneficiamento pós-colheita de lima ácida "Tahiti" afeta sua qualidade e conservação

This study aimed to determine the effects of postharvest packing line stages of "Tahiti" acid lime on their quality and conservation. Fruits were harvested by twisting in physiological maturation stage and packed according to the procedure for export fruits. Five sampling points were set throughout the packing line, which correspond to the treatments studied: "Field"- sampling directly in the plant; "Reception"- collection in the reception area of the packinghouse; "Rest"- collection after the first stage of the packing process; "Complete packing"- collection at the end of the packing process; "Marketing center" and collects at the reception area of the marketing center. Physical and chemical analyzes were conducted for 20 days of storage at 22±2ºC and 70±5% RH. Fruits that have gone through the complete packing process and those collected in the marketing center had higher fresh mass loss, higher incidence of oleocellosis, lower percentage of fruit on condition of marketing at the end of the storage period, pulp browning and higher degradation of ascorbic acid. Quality and conservation of "Tahiti" lime fruits were affected by movement, handling and mechanical injuries that occur during postharvest processing.(AU)

O objetivo deste trabalho foi determinar os efeitos das etapas de beneficiamento pós-colheita de lima ácida "Tahiti" na sua qualidade e conservação. Foram utilizados frutos colhidos por torção, em estádio de maturação fisiológica e beneficiados de acordo com o procedimento para frutos de exportação. Foram estabelecidos cinco pontos de coleta de frutos ao longo do processo de beneficiamento, os quais correspondem aos tratamentos estudados: "Campo"- coleta diretamente na planta; "Recepção"- na área de recepção da unidade de beneficiamento; "Repouso"- após a primeira etapa do beneficiamento; "Beneficiamento completo"- após o beneficiamento completo; e "Centro de comercialização"- na recepção do centro de comercialização. Foram conduzidas análises físicas e químicas durante 20 dias de armazenamento a 22±2ºC e 70±5% de UR. Os frutos que passaram pelo processo de beneficiamento completo e os que foram coletados no centro de comercialização apresentaram maior perda de massa fresca, maior incidência de oleocelose, menor porcentagem de frutos em condição de comercialização ao final do período de armazenamento, escurecimento da polpa e maior degradação de ácido ascórbico. A qualidade e conservação dos frutos de lima ácida "Tahiti" foram prejudicadas pela movimentação, manipulação e injúrias mecânicas que ocorrem durante as etapas de beneficiamento pós-colheita.(AU)

Fatty acid and proximate composition of wild male and female king angel fish (Holacanthus passer) gonads during the ripe and spend developmental stages

Overfishing of king angelfish Holacanthus Passer reduced populations in the Gulf of California. This study aimed to determine the fatty acid and proximate composition of male and female gonads, and the E2 concentration in plasma of wild organisms with different stages of gonadal development captured during early and mid-summer at El Datil, near Kino Bay, Sonora, Mexico, to help establish basic reproductive aspects and possibly to help develop the aquaculture of this ornamental species. Out of the 45 adult specimens analyzed, 66.7% were females and 33.3% were males; 16.7% of the females had ripe gonads while 83.3% had spent gonads, and 20% of males had ripe gonads while 80% had spent gonads, Indicating they were reproducing earlier, likely in the spring. Females had smaller size but numerically greater gonadosomatic index (GSI) and condition factor (K) than males. Ripe and spent females showed no statistical differences in weight, length or K; however, ripe females showed significantly higher GSI (P = 0.0005) than spent females, 3.43 vs. 0.87%. Lipid content was higher in ripe gonads, with higher content of fatty acids. In both sexes, DHA was quantitatively the major fatty acid, (10.83-16.28 mg of DHA g-1 of gonad wet weight). The n-3/n-6 ratios varied from 1.99 to 3.54, lower for ripe organisms due to a higher content of ARA and n-6 derivatives. Gonad DHA content changed in relation to its developmental stage and it might serve as an additional maturation index. Information on the chemical composition and fatty acid profile of the gonads can be used as indicators of dietary lipid and essential fatty acid requirements of broodfish, which may contribute to the formulation of a balanced diet for the culture of this ornamental species.

Fatty acid and proximate composition of wild male and female king angel fish (Holacanthus passer) gonads during the ripe and spend developmental stages

Overfishing of king angelfish Holacanthus Passer reduced populations in the Gulf of California. This study aimed to determine the fatty acid and proximate composition of male and female gonads, and the E2 concentration in plasma of wild organisms with different stages of gonadal development captured during early and mid-summer at El Datil, near Kino Bay, Sonora, Mexico, to help establish basic reproductive aspects and possibly to help develop the aquaculture of this ornamental species. Out of the 45 adult specimens analyzed, 66.7% were females and 33.3% were males; 16.7% of the females had ripe gonads while 83.3% had spent gonads, and 20% of males had ripe gonads while 80% had spent gonads, Indicating they were reproducing earlier, likely in the spring. Females had smaller size but numerically greater gonadosomatic index (GSI) and condition factor (K) than males. Ripe and spent females showed no statistical differences in weight, length or K; however, ripe females showed significantly higher GSI (P = 0.0005) than spent females, 3.43 vs. 0.87%. Lipid content was higher in ripe gonads, with higher content of fatty acids. In both sexes, DHA was quantitatively the major fatty acid, (10.83-16.28 mg of DHA g-1 of gonad wet weight). The n-3/n-6 ratios varied from 1.99 to 3.54, lower for ripe organisms due to a higher content of ARA and n-6 derivatives. Gonad DHA content changed in relation to its developmental stage and it might serve as an additional maturation index. Information on the chemical composition and fatty acid profile of the gonads can be used as indicators of dietary lipid and essential fatty acid requirements of broodfish, which may contribute to the formulation of a balanced diet for the culture of this ornamental species.(AU)

Gossypol promotes the degeneration of chicken ovarian follicles in vitro

Gossypol, a phenolic compound produced by the pigment glands of cotton, is known to affect male reproduction. In females, exposure to gossypol has been associated with interference with the estrous cycle and embryo development. In laying hens fed cottonseed, gossypol was found to reduce egg production and weight and to cause discoloration of the egg yolk and/or albumen. It is probable that gossypol directly affects ovarian follicles, but this has not been confirmed experimentally yet. Thus, the aim of the present study was to determine if gossypol affected cultivated ovarian follicles of the chicken. Ovarian follicles of adult female chickens were cultivated with different concentrations of gossypol (0, 5, 10 and 20 g/mL) and classified according to the stage of development as primordial, transitional, primary, secondary or antral, and as viable or atretic. The percentages of viable and atretic follicles in the ovaries cultivated for 24 hours in the presence of gossypol were significantly different from those of the controls for all types of follicles except for secondary follicles, but in all types after cultivation for 7 days. The percentage of viable follicles was higher than that of atretic follicles in ovaries cultivated without gossypol. In contrast, ovaries cultivated with gossypol showed a predominance of atretic follicles. Gossypol increased the proportion of atretic follicles at all stages of development in cultivated chicken ovaries. Thus, gossypol may affect ovarian follicular viability and maturation, which might interfere with female fertility.

Gossypol promotes the degeneration of chicken ovarian follicles in vitro

Gossypol, a phenolic compound produced by the pigment glands of cotton, is known to affect male reproduction. In females, exposure to gossypol has been associated with interference with the estrous cycle and embryo development. In laying hens fed cottonseed, gossypol was found to reduce egg production and weight and to cause discoloration of the egg yolk and/or albumen. It is probable that gossypol directly affects ovarian follicles, but this has not been confirmed experimentally yet. Thus, the aim of the present study was to determine if gossypol affected cultivated ovarian follicles of the chicken. Ovarian follicles of adult female chickens were cultivated with different concentrations of gossypol (0, 5, 10 and 20 g/mL) and classified according to the stage of development as primordial, transitional, primary, secondary or antral, and as viable or atretic. The percentages of viable and atretic follicles in the ovaries cultivated for 24 hours in the presence of gossypol were significantly different from those of the controls for all types of follicles except for secondary follicles, but in all types after cultivation for 7 days. The percentage of viable follicles was higher than that of atretic follicles in ovaries cultivated without gossypol. In contrast, ovaries cultivated with gossypol showed a predominance of atretic follicles. Gossypol increased the proportion of atretic follicles at all stages of development in cultivated chicken ovaries. Thus, gossypol may affect ovarian follicular viability and maturation, which might interfere with female fertility.(AU)

DINÂMICA DA MATURAÇÃO NUCLEAR E CITOPLASMÁTICA DE OÓCITOS BOVINOS CULTIVADOS IN VITRO EM MEIO SUPLEMENTADO COM FULEROL

A eficiência da maturação in vitro (MIV) de oócitos está intimamente relacionada com a competência bioquímica, intrínseca ao desenvolvimento do oócito e sua posterior fecundação. Os meios de MIV tem sido suplementados e testados afim de melhorar o potencial oocitário para a produção in vitro de embriões (PIVE). No presente estudo objetivou-se avaliar, in vitro, a dinâmica da maturação nuclear e citoplasmática de oócitos bovinos cultivados em meio MIV suplementado com fulerol. O fulerol é uma nanomolécula derivada da polihidroxilação do fulereno, é estável e formado exclusivamente por átomos de carbono, e tem sido utilizado em algumas áreas biológicas devido sua atividade antioxidante, quando em concentrações mais baixas. Nesse trabalho objetivou-se avaliar se o fulerol é capaz de bloquear a retomada da meiose de oócitos bovinos maturados in vitro. Foram utilizados dois meios de MIV: no tratamento controle (TC), meio utilizado foi o TCM 199 bicarbonato; e o segundo tratamento, com meio TCM 199 bicarbonato suplementado com 50nM de fulerol (MF50). Os oócitos foram maturados por 24 horas em estufa a 38,5ºC, 5% de CO2 e 95% de umidade. A avaliação da maturação nuclear do TC (n=300) e MF50 (n=270) foi realizada a cada 6 horas, durante 36 horas, por meio da coloração dos oócitos com Hoechst 33342. Foram identificados os seguintes estádios: vesícula germinativa (VG), quebra da vesícula germinativa (QVG), metáfase I (MI) e metáfase II (MII). Na maturação citoplasmática avaliou-se oócitos do TC (n=197) e MF50 (n=159) a cada 12 horas, durante 36 horas, corados com Mitotracker Orange (Life® Technologies, Carlsbad, CA, USA), de acordo com a distribuição citoplasmática das mitocôndrias. Durante a experimentação verificou-se dificuldade de desnudamento dos oócitos expostos ao fulerol 50nM como uma informação observacional. De maneira descritiva, a partir de 6 horas, observou-se retardo na maturação nuclear dos oócitos do grupo MF50. Às 6 horas, oócitos do TC (19%) se encontravam em MI, enquanto no MF50 estavam em VG ou QVG, o que também ocorreu com 12 horas. Já às 18 horas, enquanto 46,3% dos oócitos já estavam maturados no TC (oócito em estádio MII), em MF50 o percentual foi de 20%. Com 24 horas de maturação, verificou-se 43,9% de maturação no grupo MF50, quando comparado com 63,8% no controle. Às 30 e 36 horas, o padrão de maturação foi estável, contudo, foi identificado início de degeneração dos oócitos. Com relação à maturação citoplasmática, houve retardo da mesma com 36 horas de maturação (P<0,05) no grupo MF50 (53,9%), comparado ao tratamento controle (69,8% de gametas maduros). E em relação aos oócitos com citoplasma imaturo, foram encontrados 10,4% e 31,7% para o TC e MF50 (P<0,05), respectivamente. Conclui-se que a adição de 50nM de fulerol ao meio de maturação in vitro possivelmente interferiu no mecanismo de expansão das células do cumulus oophorus, bem como retardou a progressão meiótica e a maturação citoplasmática dos oócitos

The efficiency of in vitro maturation (IVM) of oocytes is closely related to biochemical competence, intrinsic to the development of the oocyte and subsequent fertilization. IVM medium is supplemented in order to test and improve the oocyte potential for in vitro embryo production (IVEP). This study aimed to evaluate, in vitro, the dynamics of nuclear and cytoplasmic maturation of bovine oocytes cultured in IVM medium supplemented with fullerol. Fullerol is a nanomolecule derived from fullerene polyhydroxylation, it is stable and formed exclusively by carbon atoms. It is being used in some biological areas due to its antioxidant activity at lower concentrations. This study aimed to evaluate whether fullerol is able to block the resumption of meiosis in bovine oocytes matured in vitro. Two MIV media were used: the control treatment (CT), TCM 199 bicarbonate medium; and treatment with TCM 199 bicarbonate medium supplemented with 50nM fullerol (MF50). The oocytes were matured for 24 hours in a incubator at 38.5ºC, 5% CO2 and 95% humidity. The evaluation of nuclear maturation of CT (n = 300) and MF50 (n = 270) was performed every 6 hours, for 36 hours, by staining the oocytes with Hoechst 33342 and identifying the following stages: germinal vesicle (GV), breakdown of the germinal vesicle (GVB), metaphase I (MI) and metaphase II (MII). At cytoplasmic maturation, oocytes from CT (n = 197) and MF50 (n = 159) were evaluated every 12 hours, for 36 hours, stained with Mitotracker Orange (Life® Technologies, Carlsbad, CA, USA), according to cytoplasmic distribution of mitochondria. During the experimentation, there was difficulty in stripping the oocytes exposed to 50nM fulerol, as an observational information. Descriptively, after 6 hours of incubation, a delay in the nuclear maturation of the oocytes of the MF50 group was observed. At 6 hours of maturation, oocytes of the CT (19%) were in MI, while the MF50 were in GV or GVB, which also occurred with 12 hours. At 18 hours, while 46.3% of oocytes were matured on CT (oocyte in stage MII), on MF50 the percentage was 20%. Within 24 hours of maturation, it was observed 43.9% and 63.8% of matured oocytes for MF50 and CT groups, respectively. At 30 and 36 hours, the pattern of maturation was stable, but degenerate oocytes were identified. Regarding cytoplasmic maturation, there was a delay of 36 hours of maturation (P<0.05) in the MF50 group (53.9%) compared to the control group (69.8% of mature gametes). In relation to cytoplasmic immature oocytes, they were 10.4% for CT and 31.7% for MF50 (P<0.05). It is concluded that the addition of 50nM fullerol to the in vitro maturation medium possibly interfered in the expansion mechanism of cumulus oophorus cells, as well as delayed meiotic progression and cytoplasmic maturation of oocytes.

Alterações na morfologia e na viabilidade no desenvolvimento de embriões bovinos fecundados in vitro com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina Shiga stx2

ABSTRACT:The objective of this study was to evaluate by optical microscopy and transmission electron, changes in morphology and viability of the development of bovine embryos, fertilized with semen experimentally contaminated (STEC). Oocytes were aspirated from ovaries of slaughtered cows and the intact zona pellucida were selected and matured. After 20-24 hours of maturation, the oocytes were divided into 2 groups. The first, control group (n = 4l8),fertilized with semen tested and without any type of contaminant and the second, the infected group (n = 415), fertilized with sperm exposed to STEC. Both semen were treated by the technique of discontinuous Percoll gradient. After the period of fertilization, embryos were evaluated for their morphology and viability by optical and electron microscopy. In morphologic evaluation, the oocytes fertilized with contaminated semen showed cytoplasmic shrinkage, gaps in the division, asymmetry of blastomeres, ooplasm grainy, dark brown color, vacuoles formation, degeneration and zona pellucid disruption. These changes were not observed in the control group. The cleavage rate was 70.3 and 52.8%, respectively, for control and infected groups, significant differences (p = 0.0001). After the 5th day of embryonic development, where it was observed 44.7% of morula in the control group, and 22.4% in the contaminated group, showing a significant difference (p = 0.0001). The presence of STEC interferes with the cleavage rate of embryos and also prevents and causes a decline in embryonic development to the morula stage and cause morphological changes during this development.

RESUMO:O objetivo deste trabalho foi avaliar, por meio de micros- copia óptica e eletrônica de transmissão, as alterações na morfologia e a viabilidade do desenvolvimento de embriões bovinos fecundados com sêmen contaminado experimentalmente à Escherichia coli produtora da toxina shiga stx2 (STEC). Para tanto, oócitos foram aspirados de ovários de vacas abatidas e selecionados para maturação in vitro. Após 20-24 horas de maturação, os oócitos foram divididos em 2 grupos. Sendo o primeiro grupo o controle (n = 418), fertilizado com sêmen testado e sem nenhum tipo de contaminante e o segundo, o grupo contaminado (n = 415), fertilizado com sêmen exposto a STEC. Cada sêmen foi tra tado pela técnica de gradiente descontínuo de Percoll. Após o período de fecundação, os embriões foram avaliados quanto a sua morfologia e viabilidade, com o auxílio da microscopia óptica e eletrônica. Na ava liação morfológica, os oócitos fecundados com o sêmen contaminado apresentaram retração citoplasmática, falhas na divisão, assimetria de blastômeros, ooplasma granuloso, coloração castanho-escuro, formação de vacúolos, degeneração e rompimento da zona pelúcida. Essas alte rações não foram observadas no grupo controle. A avaliação de todos oócitos incluídos mostrou taxas de clivagem de 70,3 e 52,8%, respec tivamente, para embriões controle e contaminado (p = 0,0001). Após o 5° dia de desenvolvimento embrionário foram observadas 44,7% de mórulas no grupo controle e 22,4% no grupo contaminado, apresen tando diferença significativa (p=0,0001). A presença da STEC interfere na taxa de clivagem dos embriões e também inviabiliza e provoca queda no desenvolvimento embrionário ao estádio de mórula, além de causar alterações morfológicas durante esse desenvolvimento.