Resumo
O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos nutracêuticos do oleorresina de copaíba (ORC) (Copaifera officinalis) e o óleo de coco virgem (OCV) (Cocccus nucifera L). Para tanto foram realizados três experimentos: No experimento 1 avaliou-se os efeitos in vitro do oleorresina de copaíba sobre os seguintes patógenos: fungo Saprolegnia parasitica (teste 1); bactérias gram negativas Aeromonas hydrophila, Aeromonas jandaei, Vibrio parahaemolyticus, Citrobacter sp., e Klebsiella pneumoniae, as bacterias gram positivas Micrococcus luteus e Streptococcus agalactiae; (teste 2), e protozoário Ichthyophthirius multifiliis (teste 3). Para todos os testes in vitro foi realizado uma emulsão de ORC, para facilitar a diluição em meio de cultura. Para os testes 1 e 3 foram utilizados nove tratamentos: (0; 50,6; 101,2; 202,4; 404,7; 607,1; 809,4 e 1011,8 mg ORC/litro) e Tween 80 na maior concentração utilizada. Para o teste 2 foram utilizados dez tratamentos (0, 50,6; 101,2, 202,36; 404,72; 607,08; 809,44 e 1011,8 mg/L), um controle positivo contendo 3mg/L de enrofloxacina e um contendo Tween 80 na maior concentração utilizada. Nesses experimentos in vitro, os halos de crescimento ou inibição foram medidos, e os experimentos tiveram duração de 96h para fungo, 24 h para bactérias e 4 h para o protozoário. No experimento 2, avaliou-se in vivo, os efeitos da suplementação de ORC e OCV em dietas para juvenis de Colossoma macropomum. Para esses experimentos foi realizado um delineamento em fatorial 4x2 sendo quatro níveis de ORC (0, 500, 2.000, 3.500 mg/kg de ração) e dois níveis de substituição de óleo de soja pelo óleo de coco (0 ou 50%) por 90 dias, onde foram avaliados mensalmente, os parâmetros zootécnicos e ao final do experimento, os parâmetros sanguíneos e histológicos. No experimento 3, avaliou-se a resistência de C. macropomum suplementados com ORC e OCV contra a infecção por A. hydrophila, realizado em delineamento contendo 8 tratamentos: T1= ração sem suplementação; T2= 0% OCV + 500 mg ORC; T3= 0% OCV + 2.000 mg ORC; T4= 0% OCV + 3.500 mg ORC; T5= 50% OCV + 0 ORC; T6= 50% OCV + 500 mg ORC; T7= 50% OCV + 2.000 mg ORC; T8´= 50% OCV + 3.500 ORC, mais um controle injetado com solução de cloreto de sódio estéril, que foram alimentados por 90 dias. Após o período de suplementação, os peixes foram desafiados com Aeromonas hydrophila, na concentração de 1 x 106 UFC.g-1. O uso de ORC reduziu o crescimento micelial de S. parasitica quando em concentrações superiores a 50,6 mg/L, e teve efeito inibitório no crescimento de S. agalactiae, M. luteus e K. pneumoniae, a partir de 202,4 mg/L. Além disso, apresentou eficácia de 80% contra I. multifiliis em concentrações superiores a 101,2 mg ORC/litro. Dietas com diferentes concentrações de óleo, tiveram efeitos nos parâmetros zootécnicos durante 60 dias de suplementação. No entanto, após os 90 dias de suplementação dietária com óleos houve aumento do peso total e da biomassa dos peixes. Dietas contendo 2.000 e 3.500 de mg/kg ORC aumentaram o número de linfócitos e leucócitos totais, enquanto a dieta suplementada com 50% de OCV causou aumento do número de linfócitos. Houve efeito sinergico entre os óleos, com aumento de neutrófilos e monócitos. O aumento das concentrações de ORC resultou em alterações hepáticas que podem estar relacionados a um efeito hepatóxico. O aumento da suplementação conjunta do ORC e OCV tende a reduzir os sinais clínicos da aeromoniose, reduzindo assim, as taxas de mortalidade, apesar disso os efeitos da infecção por A. hydrophila causaram uma alta hemolização do sangue que impossibilitando as análises hematimétricas e leucocitárias. A avaliação histológica corroborou o observado pela taxa de mortalidade, onde em conjunto, os óleos reduziram os efeitos proporcionados pela infecção por A. hydrophila. Em conclusão, o ORC apresenta grande potencial para substituição de quimioterápicos na aquicultura, atuando contra importantes patógenos e sua aplicação na alimentação de C. macropomum promoveu, ao longo prazo, o aumento do desempenho, melhorias hematológicas e resistência a Aeromonas hydrophila quando incluída a 2000mg/kg ração em conjunto com OCV. Apesar disso, mais pesquisas devem ser realizadas para avaliar possíveis efeitos hepatotóxicos de altas concentrações de ORC e seus compostos isolados na alimentação de peixes.
The aim of the present study was to evaluate the nutraceutical effects of copaiba oleoresin (ORC) (Copaifera officinalis) and virgin coconut oil (OCV) (Cocccus nucifera L). For that, three experiments were carried out: In experiment 1, the in vitro effects of copaiba oleoresin on the following pathogens were evaluated: the fungus Saprolegnia parasitica (test 1); gram negative bacteria Aeromonas hydrophila, Aeromonas jandaei, Vibrio parahaemolyticus, Citrobacter sp., and Klebsiella pneumoniae, the gram positive bacteria Micrococcus luteus and Streptococcus agalactiae; (test 2), and protozoan Ichthyophthirius multifiliis (test 3). For all in vitro tests, an ORC emulsion was performed to facilitate dilution in culture medium. For tests 1 and 3, nine treatments were used: (0; 50.6; 101.2; 202.4; 404.7; 607.1; 809.4 and 1011.8 mg ORC/liter) and Tween 80 in the highest concentration used. For test 2, ten treatments were used (0, 50.6; 101.2, 202.36; 404.72; 607.08; 809.44 and 1011.8 mg/L), a positive control containing 3mg/L of enrofloxacin and one containing Tween 80 at the highest concentration used. In these in vitro experiments, the growth or inhibition halos were measured, and the experiments lasted 96 h for fungus, 24 h for bacteria and 4 h for the protozoan. In experiment 2, the in vivo effects of ORC and OCV supplementation in diets for Colossoma macropomum juveniles were evaluated. For these experiments, a 4x2 factorial design was carried out, with four levels of ORC (0, 500, 2,000, 3,500 mg/kg of feed) and two levels of replacement of soybean oil by coconut oil (0 or 50%) for 90 days, where the zootechnical parameters were monthly evaluated and, at the end of the experiment, the blood and histological parameters. In experiment 3, the resistance of C. macropomum supplemented with ORC and OCV against A. hydrophila infection was evaluated, carried out in a design containing 8 treatments: T1= feed without supplementation; T2= 0% OCV + 500 mg ORC; T3= 0% OCV + 2000 mg ORC; T4= 0% OCV + 3500 mg ORC; T5= 50% OCV + 0 ORC; T6= 50% OCV + 500 mg ORC; T7= 50% OCV + 2000 mg ORC; T8´= 50% OCV + 3,500 ORC, plus a control injected with sterile sodium chloride solution, which were fed for 90 days. After the supplementation period, the fish were challenged with Aeromonas hydrophila, at a concentration of 1 x 106 CFU.g-1. The use of ORC reduced the mycelial growth of S. parasitica when at concentrations above 50.6 mg/L, and had an inhibitory effect on the growth of S. agalactiae, M. luteus and K. pneumoniae, from 202.4 mg /L. In addition, it showed 80% efficacy against I. multifiliis at concentrations above 101.2 mg ORC/liter. Diets with different oil concentrations had effects on zootechnical parameters during 60 days of supplementation. However, after 90 days of dietary supplementation with oils, there was an increase in the total weight and biomass of the fish. Diets containing 2000 and 3500 mg/kg ORC increased the number of lymphocytes and total leukocytes, while the diet supplemented with 50% OCV caused an increase in the number of lymphocytes. There was a synergistic effect between the oils, with an increase in neutrophils and monocytes. The increase in ORC concentrations resulted in hepatic changes that may be related to a hepatoxic effect. The increase in the joint supplementation of ORC and OCV tends to reduce the clinical signs of aeromoniosis, thus reducing the mortality rates, although the effects of the infection by A. hydrophila caused a high hemolysis of the blood that made it impossible to analyze hematimetric and leukocytes. The histological evaluation corroborated what was observed by the mortality rate, where together, the oils reduced the effects provided by the infection by A. hydrophila. In conclusion, ORC has great potential for replacing chemotherapeutic agents in aquaculture, acting against important pathogens and its application in C. macropomum feeding promoted, in the long term, increased performance, hematological improvements and resistance to Aeromonas hydrophila when included at 2000mg /kg feed together with OCV. Despite this, more research should be carried out to evaluate possible hepatotoxic effects of high concentrations of ORC and its isolated compounds in fish feed.
Resumo
Rhodococcus equi seroepidemiological studies were conducted. Sera used were collected from 290 apparently clinically normal mares and foals. The samples originated from 6 horse-breeding farms, located in the county of Bagé, Rio Grande do Sul, Brazil, which had different histories of Rhodococcus equi infections. To correlate the serological results with the presence of the agent in the intestine 123 fecal samples were collected. The synergistic hemolysis inhibition test was used. The test detects antibody against the "equi factor". Neutralizing antibodies against the equi factor were verified in 87.93% (255/290) of the animales tested. The geometric mean titer (GMT) of antibodies was higher in the foals when comparad with the mares. The serological results had a correlation with the isolation of R. equi in the feces. The rate of R. equi isolation and GMT titers was higher at the horse-breeding farm where clinical cases were registered. Further studies need to be done to establish the relation among the importance of serological titers and disease detection.
Com o objetivo de avaliar a situação soroepidemiológica da infecção por Rhodococcus equi na região de Bagé, RS, foram testadas 290 amostras de soro sanguíneo de éguas e potros aparentemente sadios, obtidos de 6 haras com diferentes histórias de rodococose. Para relacionar o resultado sorológico com a presença deste agente bacteriano no trato intestinal destes animais, foram coletadas 123 amostras de fezes. O teste sorológico utilizado foi a inibição da hemólise sinérgica (IHS) que detecta anticorpos neutralizantes contra o "fator equi". Um percentual de 87,93% (255/290) dos animais amostrados apresentaram estes anticorpos. O título médio geométrico (GMT) destes anticorpos foi mais elevado nos potros do que nas éguas. A soropositividade destes equinos ao teste sorológico teve correlação com o isolamento do R. equi nas fezes dos respectivos animais. A maior taxa de isolamento de R. equi das fezes dos equinos e o maior GMT, ocorreu no único haras com casos clínicos recentes de enfermidade causada por esta bactéria. No entanto, todos os animais deste e dos demais haras, encontravam-se aparentemente sadios, sendo necessário, estabelecer em trabalho futuro, a possível relação entre títulos de anticorpos e sua importância na detecção da enfermidade.
Resumo
Rhodococcus equi seroepidemiological studies were conducted. Sera used were collected from 290 apparently clinically normal mares and foals. The samples originated from 6 horse-breeding farms, located in the county of Bagé, Rio Grande do Sul, Brazil, which had different histories of Rhodococcus equi infections. To correlate the serological results with the presence of the agent in the intestine 123 fecal samples were collected. The synergistic hemolysis inhibition test was used. The test detects antibody against the "equi factor". Neutralizing antibodies against the equi factor were verified in 87.93% (255/290) of the animales tested. The geometric mean titer (GMT) of antibodies was higher in the foals when comparad with the mares. The serological results had a correlation with the isolation of R. equi in the feces. The rate of R. equi isolation and GMT titers was higher at the horse-breeding farm where clinical cases were registered. Further studies need to be done to establish the relation among the importance of serological titers and disease detection.
Com o objetivo de avaliar a situação soroepidemiológica da infecção por Rhodococcus equi na região de Bagé, RS, foram testadas 290 amostras de soro sanguíneo de éguas e potros aparentemente sadios, obtidos de 6 haras com diferentes histórias de rodococose. Para relacionar o resultado sorológico com a presença deste agente bacteriano no trato intestinal destes animais, foram coletadas 123 amostras de fezes. O teste sorológico utilizado foi a inibição da hemólise sinérgica (IHS) que detecta anticorpos neutralizantes contra o "fator equi". Um percentual de 87,93% (255/290) dos animais amostrados apresentaram estes anticorpos. O título médio geométrico (GMT) destes anticorpos foi mais elevado nos potros do que nas éguas. A soropositividade destes equinos ao teste sorológico teve correlação com o isolamento do R. equi nas fezes dos respectivos animais. A maior taxa de isolamento de R. equi das fezes dos equinos e o maior GMT, ocorreu no único haras com casos clínicos recentes de enfermidade causada por esta bactéria. No entanto, todos os animais deste e dos demais haras, encontravam-se aparentemente sadios, sendo necessário, estabelecer em trabalho futuro, a possível relação entre títulos de anticorpos e sua importância na detecção da enfermidade.