Induction to tetraploidy in Pacific oysters (Crassostrea gigas)

As an alternative to the use of cytochalasin B(CB), 6-dimethylamino-purine (6-DMAP) and thermal shock (heat shock by increasing the temperature from 25 to 36ºC) could be used to induce tetraploidy in Pacific oyster (Crassostrea gigas) diploids. Induction was performed by applying shocks after elimination of the first polar corpuscle at the end of meiosis I. Ploidy rates were verified using flow cytometry. Tetraploid larvae were obtained using all inductor (6-DMAP, thermal shock and CB) treatments. No difference in the efficiency of tetraploidy induction was noted among 6-DMAP, thermal shock and CB. The number of D-larvae and their yield, determined by calculating the percentage of well-formed D-larvae in relation to the total number of larvae, was similar (p>0.05) among the evaluated induction methods. We suggest that 6-DMAP and thermal shock should be used in tetraploidy induction protocols, thereby avoiding the use of CB, which is a harmful agent for both humans and the environment.(AU)

Dry matter productivity and bromatological quality of ryegrass genotypes cultivated in southern Brazil / [Produtividade de matéria seca e qualidade bromatológica de genótipos de azevém cultivados no Sul do Brasil]

The goal of this work was to assess the biomass production and bromatological quality of ryegrass genotypes in ten municipalities of the Western and North Plateau regions of the State of Santa Catarina, Brazil. The cultivars La Estanzuela 284 (diploid), Bar HQ, Barjumbo, INIA Escorpio, Potro, and Winter Star (tetraploids) were compared, distributed in a randomized block design, in which the municipalities constituted the blocks, with three replications. The cuts were performed when the plants reached 30cm, leaving a residue of 10cm. In three cuts, the cultivars Barjumbo and Bar HQ were the most productive, exceeding 4.6 t ha-1 of dry matter. In the places in which five cuts were performed, the production of these cultivars exceeded 7.3 t ha-1, placing them again ahead of the others. The average crude protein content in three cuts was greater than 25% in all cultivars. There was no difference between the genotypes in the content of neutral detergent fiber and total digestible nutrients. There was a significant correlation between quantitative and qualitative productive variables. The assessed cultivars represented good options for composing short-term or long-term winter-feeding systems, adjusted to the integration with annual crops or warm-season pastures.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a produção de biomassa e qualidade bromatológica de genótipos de azevém, em dez municípios das regiões Oeste e Planalto Norte Catarinense, Estado de Santa Catarina, Brasil. Foram comparados os cultivares La Estanzuela 284 (diploide), Bar HQ, Barjumbo, INIA Escorpio, Potro e Winter Star (tetraploides), distribuídos em um delineamento blocos casualizados, em que os municípios constituíram os blocos, com três repetições. Os cortes foram realizados quando as plantas atingiram 30cm, deixando um resíduo de 10cm. Sob três cortes, os cultivares Barjumbo e Bar HQ foram os mais produtivos, ultrapassando 4,6 t ha-1 de matéria seca. Nos locais em que ocorreram cinco cortes, a produção destes cultivares superou 7,3 t ha-1, posicionando-os novamente à frente dos demais. O teor médio de proteína bruta em três cortes foi superior a 25% em todos os cultivares. Não houve diferença entre os genótipos no teor de fibra detergente neutro e de nutrientes digestíveis totais. Verificou-se correlação significativa entre variáveis produtivas quantitativas e qualitativas. Os cultivares testados representam boas opções para compor sistemas forrageiros hiberno-primaveris de curta ou longa duração, ajustando-se à integração com lavouras ou pastagens anuais de estação quente.(AU)

Tetraploidia em Rhamdia quelen (Quoy e Gaimard, 1824) por choque térmico duplo (quente e frio) / Tetraploidy in Rhamdia quelen (Quoy & Gaimard 1824) by a dual thermal shock (heat and cold)

Avaliou-se a eficiência do choque térmico duplo para induzir tetraploidia em jundiá Rhamdia quelen em diferentes tempos pós-fertilização. Vinte mililitros de ovos (10, 15, 20, 25, 30 e 35 mpf minutos pós-fertilização) foram tratados com choque térmico quente (39±0,2ºC) durante 3 min seguido de choque térmico frio (1,0±0,1ºC) durante 30 min. Um grupo controle foi utilizado. As taxas de fertilização e de eclosão foram medidas 12 hpf (horas pós-fertilização) e 30 hpf, respectivamente. Decorridas 60 hpf, 25 larvas de cada unidade experimental foram fixadas para verificação da ploidia, por citometria de fluxo. A taxas de fertilização foram de 87,83% para o controle e de 23,4%; 28,5%; 30,4%; 20,0%; 30,3% e 36,7%, para os grupos tratados com choque térmico aos 10, 15, 20, 25, 30, 35 mpf, respectivamente. Encontraram-se tetraploides apenas nos grupos de ovos tratados aos 15 mpf e 20 mpf. Este é o primeiro trabalho de indução de tetraploidia em jundiá por choques térmicos quente e frio, o qual possibilitou o aperfeiçoamento dessa técnica.(AU)

The efficiency of double thermal shock to induce tetraploidy in Rhamdia quelen (jundiá) at different post-fertilization periods was assessed. Each test was performed with 20 mL of eggs (10, 15, 20, 25, 30 and 35 mpf minutes post-fertilization) exposed to hot thermal shock (39±0.2ºC) for 3 min, followed by cold thermal shock (1.0±0.1ºC) for 30 min. A control group was also employed. Fertilization and hatching rates were evaluated 12 and 30 hours post-fertilization (hpf), respectively. After 60 hpf, twenty-five larvae from each experimental unit were fixed to verify the ploidy by flow cytometry. Control fertilization rate was 87.83% and reached 23.4%, 28.5%, 30.4%, 20.0%, 30.3%, 36.7% respectively for 10, 15, 20, 25, 30, 35 mpf. Tetraploids were detected only at 15 mpf and 20 mpf. This is the first research of tetraploidy in jundiá obtained by hot and cold shocks, making possible the improvement of this technique.(AU)

Tetraploidia em Rhamdia quelen (Quoy e Gaimard, 1824) por choque térmico duplo (quente e frio) / Tetraploidy in Rhamdia quelen (Quoy & Gaimard 1824) by a dual thermal shock (heat and cold)

Avaliou-se a eficiência do choque térmico duplo para induzir tetraploidia em jundiá Rhamdia quelen em diferentes tempos pós-fertilização. Vinte mililitros de ovos (10, 15, 20, 25, 30 e 35 mpf – minutos pós-fertilização) foram tratados com choque térmico quente (39±0,2ºC) durante 3 min seguido de choque térmico frio (1,0±0,1ºC) durante 30 min. Um grupo controle foi utilizado. As taxas de fertilização e de eclosão foram medidas 12 hpf (horas pós-fertilização) e 30 hpf, respectivamente. Decorridas 60 hpf, 25 larvas de cada unidade experimental foram fixadas para verificação da ploidia, por citometria de fluxo. A taxas de fertilização foram de 87,83% para o controle e de 23,4%; 28,5%; 30,4%; 20,0%; 30,3% e 36,7%, para os grupos tratados com choque térmico aos 10, 15, 20, 25, 30, 35 mpf, respectivamente. Encontraram-se tetraploides apenas nos grupos de ovos tratados aos 15 mpf e 20 mpf. Este é o primeiro trabalho de indução de tetraploidia em jundiá por choques térmicos quente e frio, o qual possibilitou o aperfeiçoamento dessa técnica.

The efficiency of double thermal shock to induce tetraploidy in Rhamdia quelen (jundiá) at different post-fertilization periods was assessed. Each test was performed with 20 mL of eggs (10, 15, 20, 25, 30 and 35 mpf – minutes post-fertilization) exposed to hot thermal shock (39±0.2ºC) for 3 min, followed by cold thermal shock (1.0±0.1ºC) for 30 min. A control group was also employed. Fertilization and hatching rates were evaluated 12 and 30 hours post-fertilization (hpf), respectively. After 60 hpf, twenty-five larvae from each experimental unit were fixed to verify the ploidy by flow cytometry. Control fertilization rate was 87.83% and reached 23.4%, 28.5%, 30.4%, 20.0%, 30.3%, 36.7% respectively for 10, 15, 20, 25, 30, 35 mpf. Tetraploids were detected only at 15 mpf and 20 mpf. This is the first research of tetraploidy in jundiá obtained by hot and cold shocks, making possible the improvement of this technique.

BIOTECNOLOGIAS APLICADAS A REPRODUÇÃO DE PEIXES: PRODUÇÃO DE GINOGENÉTICO MITÓTICO E POLIPLOIDES EM Astyanax altiparanae

Biotecnologias aplicadas à reprodução são importantes ferramentas para o incremento de sistemas produtivos e estudos de conservação e manutenção de espécies ameaçadas de extinção. Os pacotes tecnológicos são constituídos por diversas técnicas, e entre elas, destaca-se a ginogênese, processo de reprodução uniparental de herança genética exclusivamente materna. Através da ginogênese, é possível obter lotes monossexuais de 100% fêmeas em espécies com sistema de determinação sexual XY, linhagens clonais e aplicação em estudos que elucidam os mecanismos de determinação sexual em peixes. Diante disso, o presente trabalho foi conduzido com o objetivo de estabelecer um protocolo de ginogênese mitótica em Astyanax altiparanae. Para isso, foram estabelecidos quatro tratamentos: Oócitos fertilizados com sêmen normal (controle diploide), oócitos fertilizados com sêmen irradiado em câmara UV para inativação do material genético paterno sem aplicação de choque térmico (ginogenético haploide), oócitos fertilizados com sêmen irradiado e com aplicação de choque 24 minutos pós fertilização (mpf) (ginogenético diploide) e oócitos fertilizados com sêmen normal com aplicação de choque térmico aos 24 mpf (tetraploide). As taxas de fertilização e sobrevivência foram verificadas nos principais estágios do desenvolvimento embrionário (clivagem, blástula, gástrula, segmentação e eclosão), assim como a porcentagem de larvas normais e anormais. As larvas recém eclodidas de cada tratamento por repetição tiveram a ploidia confirmada por citometria de fluxo e cariótipo. A irradiação e o choque térmico reduziram significativamente a sobrevivência dos embriões do tratamento ginogenético no estágio de eclosão (26,50 ±2,50%), taxa de larvas normais (36,62 ± 3,42%), aumento na taxa de larvas anormais (63,38 ± 3,42%) e 98,64% do total eclodido se confirmaram larvas ginogenéticas. No entanto, estão sendo realizadas análises de sequenciamento genético para elucidar o nível de homozigose desses indivíduos. No tratamento para indução a tetraploidia, foi observada uma taxa de eclosão de 17,8 ± 4,11% com 50,08 ± 4,27% de larvas normais e 49,92± 2,52% de larvas anormais, e 37,25% do total de larvas eclodidas tetraploides.

Biotechnologies applied to reproduction are important tools to increase aquacultural production and support studies of conservation and maintenance of threatened species. Ginogenesis, is a uniparental reproductive process of exclusively maternal genetic inheritance, that may be induced in order to provide monosex population with increased performance, clonal lineages and may be used to elucidate the mechanisms of sex determination. Therefore, the objective of this study was to establish mitotic gynogenesis in Astyanax altiparanae, an important aquaculture and laboratory species. Four egg batches were used, each of them were divided into four treatments as follows: oocytes fertilized with normal semen (diploid control), oocytes fertilized with UV-inactivated semen without the application of thermal shock (haploid gynogenetic), oocytes fertilized with UV-inactivated semen succeeded by heat-shock (40°C, 24 minutes after fertilization -mpf) (diploid gynogenetic) and oocytes fertilized with normal semen with shock application 24 mpf (tetraploid). Fertilization and survival rates were checked in the main stages of early development (cleavage, blastula, gastrula, somite stage and hatching), as well as the percentage of normal and abnormal larvae. The newly hatched larvae (maximum of 20 samples repetition) from all treatments had ploidy status confirmed by flow cytometry and chromosome preparations. The results show that irradiation and thermal shock significantly reduced survival in the hatching stage (26.50 ± 2.50%), normal larvae rate (36.62 ± 3.42%) and provided increased rate of abnormal larvae (63.38 ± 3.42%), increase in the rate of abnormal larvae (63.38 ± 3.42%) and 98.64% of the total hatch were confirmed as gynogenetic larvae. However, genetic sequencing analyzes are being carried out to elucidate the level of homozygosity it has. In the treatment for induction of tetraploidy, an hatching rate of 17.8 ± 4.11% was observed with 50.08 ± 4.27% of normal larvae and 49.92 ± 2.52% of abnormal larvae, and 37, 25% of the total tetraploid hatched larvae.

Colchicine and oryzalin effects on tetraploid induction and leaf anatomy of Solanum commersonii ssp / Colchicina e orizalina na indução de tetraploides e na anatomia foliar de Solanum commersonii ssp

The aim of the present study was to evaluate the effect of the colchicine and oryzalin anti-mitotic substances on the induction of tetraploid plants and foliar anatomy of two diploids clones of Solanum commersonii ssp. Nodal segments of Solanum commersonii subsp. commersonii Dun. and Solanum commersonii subsp. malmeanum Bitt. were treated with colchicine (3.5, 5.0, and 6.5mM; 72h) or oryzalin (10, 30, and 50µM; 24h). After the treatment with anti-mitotic substances, nodal segments were inoculated in the MS culture medium and cultivated in vitro (60 days). After in vitro cultivation, the plants were transferred to vases with the substrate Plantmax® and kept in the greenhouse (45 days). Plant ploidy level was assessed by flow cytometry and leaf anatomy was assessed by anatomic cuts. An increase was observed in the polar and equatorial diameter of stomata ("gigas effect") of the Solanum commersonii subsp. commersonii (SCC) and Solanum commersonii subsp. malmeanum (SCM) clones, which was due to the use of the anti-mitotic substances. Treatments with colchicine (6.5mM; 72h) and oryzalin (50µM; 24h) caused death of the SCC plants cultured in vitro. In the others treatments of the SCC clone, the use of oryzalin and colchicine caused production of chimeric plants. The treatment of nodal segments of SCM with oryzalin (10-50µM; 24h) was effective on induction of tetraploid plants, which can be employed in genetic breeding programs in crossbreeding with cultured potato.(AU)

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito das substâncias antimitóticas colchicina e orizalina na indução de plantas tetraploides e na anatomia foliar de dois clones diploides de Solanum commersonii ssp. Segmentos nodais de Solanum commersonii subsp. commersonii Dun. e Solanum commersonii subsp. malmeanum Bitt. foram tratados com colchicina (3,5, 5,0 e 6,5mM; 72h) ou orizalina (10, 30 e 50µM; 24h). Após o tratamento com as substâncias antimitóticas, os segmentos nodais foram inoculados em meio de cultura MS e cultivados in vitro (60 dias). Após o cultivo in vitro, as plantas foram transferidas para vasos contendo o substrato Plantmax® e mantidas em casa de vegetação (45 dias). O nível de ploidia das plantas foi avaliado por citometria de fluxo e a anatomia foliar foi avaliada através de cortes anatômicos. Foi observado um aumento no diâmetro equatorial e polar dos estômatos ("efeito gigas") dos clones de Solanum commersonii subsp. commersonii (SCC) e Solanum commersonii subsp. malmeanum (SCM), que foi produzido pelo uso de substâncias antimitóticas. O tratamento com colchicina (6,5mM; 72h) e orizalina (50µM; 24h) causou morte nas plantas de SCC cultivadas in vitro. Nos demais tratamentos do clone de SCC, o uso de orizalina ou colchicina causou a produção de plantas quiméricas. O emprego de orizalina (10-50µM; 24h), nos segmentos nodais de SCM, resultou na obtenção de plantas tetraploides consistentes, as quais podem ser usadas nos programas para melhoramento genético em cruzamentos com a batata cultivada.(AU)

Eficiência e controle da reprodução de peixes de interesse comercial / Efficiency and control reproductive in fish farming

O controle da reprodução é essencial para peixes de interesse comercial e pode ser utilizado tanto para estimular quanto para inibir a atividade reprodutiva. O objetivo do presente trabalho foi revisar os mecanismos de controle reprodutivo e como são aplicados na produção comercial de peixes. A manipulação de fatores bióticos e abióticos, a aplicação de tratamentos hormonais, o uso de técnicas de fertilização in vitro e de criopreservação de sêmen consistem em estratégias para promover ou aumentar a reprodução de peixes em cativeiro. Para ilustrar a utilização dessas técnicas na piscicultura, foram apresentados diversos exemplos de manejo e tecnologias reprodutivas no cultivo de tilápia nilótica, tambaqui e salmão, peixes de grande interesse nacional e/ou internacional. Na produção comercial de peixes também se pode buscar a inibição da reprodução. Isso geralmente ocorre quando o interesse do piscicultor é promover o crescimento corporal. Nesses casos, as técnicas mais utilizadas envolvem a inversão sexual e a manipulação cromossômica para induzir androgênese, ginogênese, triploidia e tetraploidia. Embora cada uma dessas técnicas em si seja um considerável avanço, maiores impactos na cadeia produtiva poderão ser alcançados pela integração daquelas que apresentarem uma boa relação custo-benefício à sistemas de produção.(AU)

In fish farming, the control of reproduction is essential and used both to stimulate and to inhibit the reproductive activity. In this paper, we review the mechanisms of reproductive control and their application on commercial production of fish. The manipulation of biotic and abiotic factors, application of hormonal treatments, protocols of in vitro fertilization and semen cryopreservation are the mainly strategies used to promote or increase the fish reproduction in captivity. Important fish species of national and international aquaculture (Nile tilapia, salmon and tambaqui) illustrate the mainly reproductive managements. When the interest of producers is to optimize the fish growth, they generally use strategies for reproductive inhibition. In such cases, the techniques used are the sexual inversion and chromosomal manipulations for androgenesis, gynogenesis, triploidy and tetraploidy induction. Although each of these techniques in itself is a considerable step forward, it is necessary to evaluate the cost-effective of each one and to integrate them to the total production system for achieving greater impacts in aquaculture.(AU)

Eficiência e controle da reprodução de peixes de interesse comercial / Efficiency and control reproductive in fish farming

O controle da reprodução é essencial para peixes de interesse comercial e pode ser utilizado tanto para estimular quanto para inibir a atividade reprodutiva. O objetivo do presente trabalho foi revisar os mecanismos de controle reprodutivo e como são aplicados na produção comercial de peixes. A manipulação de fatores bióticos e abióticos, a aplicação de tratamentos hormonais, o uso de técnicas de fertilização in vitro e de criopreservação de sêmen consistem em estratégias para promover ou aumentar a reprodução de peixes em cativeiro. Para ilustrar a utilização dessas técnicas na piscicultura, foram apresentados diversos exemplos de manejo e tecnologias reprodutivas no cultivo de tilápia nilótica, tambaqui e salmão, peixes de grande interesse nacional e/ou internacional. Na produção comercial de peixes também se pode buscar a inibição da reprodução. Isso geralmente ocorre quando o interesse do piscicultor é promover o crescimento corporal. Nesses casos, as técnicas mais utilizadas envolvem a inversão sexual e a manipulação cromossômica para induzir androgênese, ginogênese, triploidia e tetraploidia. Embora cada uma dessas técnicas em si seja um considerável avanço, maiores impactos na cadeia produtiva poderão ser alcançados pela integração daquelas que apresentarem uma boa relação custo-benefício à sistemas de produção.

In fish farming, the control of reproduction is essential and used both to stimulate and to inhibit the reproductive activity. In this paper, we review the mechanisms of reproductive control and their application on commercial production of fish. The manipulation of biotic and abiotic factors, application of hormonal treatments, protocols of in vitro fertilization and semen cryopreservation are the mainly strategies used to promote or increase the fish reproduction in captivity. Important fish species of national and international aquaculture (Nile tilapia, salmon and tambaqui) illustrate the mainly reproductive managements. When the interest of producers is to optimize the fish growth, they generally use strategies for reproductive inhibition. In such cases, the techniques used are the sexual inversion and chromosomal manipulations for androgenesis, gynogenesis, triploidy and tetraploidy induction. Although each of these techniques in itself is a considerable step forward, it is necessary to evaluate the cost-effective of each one and to integrate them to the total production system for achieving greater impacts in aquaculture.

EFEITOS DA SERICINA DO BICHO DA SEDA (Bombyx mori) SOBRE OS FENÓTIPOS NUCLEARES E NA REPARACAO DA LESAO ULCERATIVA EM CÉLULAS DO EPITÉLIO CORNEAL DE RATOS DIABÉTICOS

A córnea de pacientes diabéticos pode desenvolver defeitos epiteliais que comprometem a visão e causam dor. Os efeitos do diabetes sobre algumas características das células epiteliais corneais, notadamente os fenótipos nucleares, são ainda desconhecidos. A sericina é um polímero extraído do casulo do bicho-da-seda, que, aparentemente, promove reparação corneal em ratos. Com esta pesquisa estudou-se a produção lacrimal, o limiar de sensibilidade corneal (Cochet-Bonnet) e a pressão dos olhos de ratos com três semanas de diabetes induzido por aloxana (glicemia sérica 400 mg/dL). Os efeitos da instilação diária (a cada 6 horas, por quatro dias) de sericina 10% sobre a cinética de reepitelização de córneas cauterizadas (com álcali), em ratos diabéticos, foram estudados e comparados aos efeitos de placebo (solução salina balanceada) e de soro equino (uma opção terapêutica vigente). A pesquisa traz, também, informações sobre o tamanho dos núcleos (área e perímetro), o estado de compactação e a textura da cromatina, o conteúdo de DNA (ploidia) e a distribuição das regiões organizadoras de nucléolos impregnadas por íons prata (AgNORs) em células epiteliais corneais de ratos diabéticos (hiperglicêmicos) e de não diabéticos (normoglicêmicos). Os núcleos das células que reepitelizaram as córneas cauterizadas, após tratamento com sericina 10%, solução salina balanceada ou soro, foram avaliados. Os resultados mostraram que os olhos dos ratos diabéticos diferiram dos de não diabéticos quanto ao limiar de sensibilidade corneal ao toque (2,07 ± 0,52 cm nas córneas de diabéticos vs. 4,00 ± 0,56 cm nas de não diabéticos; p = 0,01). Relativamente à cinética de reepitelização, os tempos de fechamento das úlceras foram de 30 horas para as córneas tratadas com sericina 10% ou com soro e de 36 horas para as que receberam solução salina balanceada. Os núcleos das células epiteliais das córneas dos diabéticos, exceto em amostras que receberam sericina 10%, apresentaram cromatina compactada, em comparação aos núcleos das células do epitélio corneal dos ratos não diabéticos. Núcleos com tendência à tetraploidia só não foram observados no epitélio corneal dos ratos não diabéticos. Todos os epitélios apresentaram frequências reduzidas de núcleos sub-diploides. As córneas dos ratos diabéticos apresentaram núcleos com frações reduzidas de áreas AgNOR positivas. Em conclusão, o diabetes alterou a supra-organização cromatínica e a ploidia em células epiteliais corneais em ratos diabéticos aloxênicos com três semanas de hiperglicemia. A sericina 10%, aparentemente, reduz ou inibe estímulos que alteram a funcionalidade da cromatina das células epiteliais corneais em ratos diabéticos. Ademais, mostrou-se tão efetiva quanto o soro na promoção da reepitelização corneal

The cornea of diabetic patients can develop epithelial defects that promote vision deficit and pain. The effects of diabetes/hyperglycemia on some characteristics of corneal epithelial cells, notably the nuclear phenotypes are still unknown. The sericin is a polymer extracted from the cocoons of the silkworm, which seems to promote reepithelization of burned cornea in rats. In this study, tear production, corneal touch threshold (Cochet-Bonnet) and intraocular pressure of alloxan-induced diabetes rats with three weeks of hyperglycemia (serum glucose 400 mg/dL) were studied. In addition, the effects of daily instillation (every 6 hours for 4 days) of 10% sericin over re-epithelization kinetics of burned corneas from diabetic were also studied and compared to the effects of placebo (balanced salt solution) and horse serum (an actual therapeutic option). The research also brings information about the size of the nuclei (area and perimeter), the state of compactation and the texture of chromatin, the DNA content (ploidy) and the distribution of silver-stained nucleolar organizing regions (AgNORs) of epithelial cells in corneas of diabetic (hyperglycemic) and non-diabetic rats (normoglycemic). Nuclear phenotypes of cells that participated of the re-epithelization of the burned corneas after treatment with 10%sericin, balanced salt solution or serum were studied. Results showed that the eyes of diabetic rats did not differ from the ones from non-diabetic ones, just like the tear production and intraocular pressure, but differences regarding the corneal touch threshold (2.07 ± 0.52 cm in the corneas of diabetic vs. 4.00 ± 0.56 cm in non-diabetics; p = 0.01) were found. Regarding re-epithelization kinetics, the healing time of the burns were 30 hours for corneas treated with 10% sericin or serum and 36 hours in those receiving 0balanced salt solution. The nuclei of epithelial cells in the corneas of diabetic patients, except in samples that received 10% sericin, showed more condensed chromatin than the cell nuclei from the corneal epithelium of non-diabetic rats. Nuclei with trend to the tetraploidy were not observed only in the corneal epithelium of non-diabetic rats. All epithelia showed reduced frequency of sub-diploid nuclei. The corneas of the diabetic rats showed nuclei with reduced fractions of positive AgNOR areas. As conclusion, diabetes altered chromatin supra-organization and ploidy levels in corneal epithelial cells of rats with 3 weeks of hyperglycemia. Instillation of 10% sericin seems reduce or block stimulus that affect DNA/chromatin during diabetes, while it promotes re-epithelization

Indução à tetraplodia e desempenho zootécnico de ostras Crassostrea gigas (Thunberg 1793) triploides em Santa Catarina

O estudo teve como objetivos a produção de ostras do Pacífico (Crassostrea gigas) tetraploides, utilizando choques de indução com 6-dimetilamino-purina (6-DMAP) e térmico (25-36º C), em substituição à citocalasina-B (CB), em embriões diploides, no momento da saída do primeiro corpúsculo polar. Além disso, o estudo buscou um melhor entendimento sobre o desempenho zootécnico obtido com o cultivo de ostras triploides em diferentes locais nas Baías Norte e Sul da ilha de Santa Catarina, avaliando parâmetros como peso fresco total, altura e sobrevivência (experimentos I, II e III) e ainda aspectos reprodutivos, como índice de condição e histologia desses organismos quando expostos às condições de cultivo no sul do Brasil. Os resultados obtidos com a indução a tetraploidia em ostras do Pacífico foram promissores, obtendo-se larvas tetraploides em todos os tratamentos testados, sendo indicada a substituição da CB pelos outros tratamentos (6-DMAP e temperatura). Na análise de desempenho zootécnico de ostras triploides, em ambos os experimentos as ostras triploides mostraram melhores resultados que às ostras diploides em peso fresco total e altura no período de verão. Quanto a sobrevivência, as ostras triploides foram superiores às ostras diploides apenas no experimento I, não havendo diferença estatística ao final dos experimentos II e III. Já as análises dos índices de condição de ostras triploides apresentaram um padrão semelhante ao encontrado para ostras diploides, apresentando os maiores valores durante o mês de agosto de 2015 e os menores em fevereiro de 2016 para ostras 2N e 3N em ambos locais de cultivo. Já na histologia, as ostras 3N apresentaram um padrão semelhante às ostras 2N quanto ao ciclo reprodutivo, indicando que as potenciais melhorias encontradas para ostras 3N no Brasil não estão ligadas apenas à diminuição da atividade reprodutiva desses organismos e sim a outros fatores que precisam ser avaliados em posteriores estudos.

The study aimed to the production of Pacific oysters (Crassostrea gigas) tetraploid, using induction shocks with 6-dimethylamino-purine (6-DMAP) and heat (25-36º C), replacing cytochalasin-B (CB) in diploid embryos, the output of the first polar body. In addition, the study sought a better understanding of the growth performance achieved by growing triploid oysters at different locations in the bays north and south of the island of Santa Catarina, evaluating parameters such as the total fresh weight, height and survival (experiment I, II and III), and even reproductive aspects, as a condition index and histology of these organisms when exposed to growing conditions in southern Brazil. The results obtained with the induction tetraploidy in Pacific oysters were promising, yielding tetraploid larvae in all treatments, with the substitution indicated by CB other treatments (6-DMAP and temperature). In the production performance analysis of triploid oysters, in both experiments triploid oysters were higher than diploid oysters in the total fresh weight and height in the summer period. As for survival, the triploid oysters were higher than diploid oysters only in experiment I, with no statistical difference at the end of the experiments II and III. As for the analysis of the index condition of triploid oysters showed a pattern similar to that for diploid oysters, with higher rates during the month of August 2015 and the lowest in February 2016 for 2N and 3N oysters in both cultivation sites. As for histology, the 3N oysters showed a pattern similar to 2N oysters on the reproductive cycle, indicating that potential improvements found for 3N oysters in Brazil are not linked just to decreased reproduction of these organisms but the other factors that need to be evaluated in later studies

Tetraploidía en Ceratophrys (Anura, Leptodactylidae), análisis del registro fósil

It has been confirmed the existence of the tetraploid counterpart of the genus Ceratophrys Wied, 1824 (extint at the present time) in Argentina and Brazil since the Pliocene, and the apparition of the octaploidy in the Upper Pleistocene - Holocene. Fossil material of the diploid form, distinctive of the Chacoan District, has been reported from the horizons of the Montehermosense Formation in south-east of the province of Buenos Aires, Argentina. The coexistence of diploid-tetraploid and tetraploid-octaploid forms in the same province was documented.

Tetraploidía en Ceratophrys (Anura, Leptodactylidae), análisis del registro fósil

It has been confirmed the existence of the tetraploid counterpart of the genus Ceratophrys Wied, 1824 (extint at the present time) in Argentina and Brazil since the Pliocene, and the apparition of the octaploidy in the Upper Pleistocene - Holocene. Fossil material of the diploid form, distinctive of the Chacoan District, has been reported from the horizons of the Montehermosense Formation in south-east of the province of Buenos Aires, Argentina. The coexistence of diploid-tetraploid and tetraploid-octaploid forms in the same province was documented.