Síndrome Obstrutiva das Vias Aéreas dos Braquicefálicos (Síndrome do Braquicefálico – SB) Revisão bibliográfica e considerações clínico cirúrgicas (2ª parte)

A seleção artificial dos cães para a determinação de fatores estéticos pode levar a alterações não desejadas. A braquicefalia ou encurtamento do esqueleto facial é mutação genética, presente em raças, como os bulldogs ingleses, bulldogs franceses e pugs, que tem sido reforçada na reprodução destas raças. Infelizmente, muitas características anatômicas que predispõem aos problemas observados na síndrome da obstrução de vias aéreas dos braquicefálicos, ou síndrome do braquicefálico (SB), foram mantidas, nas linhagens que são vendidas no país. As técnicas de excisão do palato mole prolongado, excisão de fragmentos da cartilagem nasal, bem como excisão de sacos aéreos invertidos e em alguns casos das tonsilas palatinas, e todas as suas variações, são descritas há diversos anos, mas os riscos inerentes à síndrome e quando deve ser feita a indicação da intervenção cirúrgica estão sendo abordados neste trabalho.

Síndrome Obstrutiva das Vias Aéreas dos Braquicefálicos (Síndrome do Braquicefálico SB) Revisão bibliográfica e considerações clínico cirúrgicas (2ª parte)

A seleção artificial dos cães para a determinação de fatores estéticos pode levar a alterações não desejadas. A braquicefalia ou encurtamento do esqueleto facial é mutação genética, presente em raças, como os bulldogs ingleses, bulldogs franceses e pugs, que tem sido reforçada na reprodução destas raças. Infelizmente, muitas características anatômicas que predispõem aos problemas observados na síndrome da obstrução de vias aéreas dos braquicefálicos, ou síndrome do braquicefálico (SB), foram mantidas, nas linhagens que são vendidas no país. As técnicas de excisão do palato mole prolongado, excisão de fragmentos da cartilagem nasal, bem como excisão de sacos aéreos invertidos e em alguns casos das tonsilas palatinas, e todas as suas variações, são descritas há diversos anos, mas os riscos inerentes à síndrome e quando deve ser feita a indicação da intervenção cirúrgica estão sendo abordados neste trabalho.(AU)

Frangos desafiados experimentalmente com Salmonella enterica sorovar enteritidis e Eimeria tenella e tratados com ácidos orgânicos / Chickens challenged against Salmonella enterica sorovar enteritidis and Eimeria tenella and treated with organic acids

Foi avaliado um composto comercial de ácidos orgânicos, adicionado à ração, no controle da Salmonella de frangos de corte desafiados com Salmonella Enteritidis e Salmonella Enteritidis associadas à Eimeria tenella. Foram utilizados 504 pintos de um dia, fêmeas, da linhagem Hubbard®, sendo o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x3, totalizando seis tratamentos com seis repetições e 14 aves a unidade experimental. Foi analisado o pH intestinal, o escore de lesão dos cecos, contagem de oocistos fecais e a presença de salmonela no baço e tonsilas cecais das aves. Aves desafiadas com S. Enteritidis que receberam ácidos apresentaram menor frequência de isolamento da bactéria nos órgãos linfoides analisados. Assim como apresentaram redução no número de oocistos de E. tenella nas excretas coletadas diretamente na bandeja e redução dos escores de lesão intestinal provocadas pela infecção por Eimeria tenella. Os ácidos orgânicos promoveram benefício à saúde intestinal dos frangos de corte com reflexos positivos no controle da Salmonella Enteritidis juntamente com a Eimeria tenella.

A commercial organic acids compound was assessed, added to feed, to control Salmonella Enteritidis. Broilers were challenged with Salmonella Enteritidis and Salmonella Enteritidis associated with Eimeria tenella. Five hundred and four day-old Hubbard® females chicks were used in a completely randomized design in a 2x3 factorial, a total of six treatments with six replications and being 14 birds the experimental unit. Intestinal pH, cecum lesion score, oocyst faecal counts and the presence of Salmonella in the cecal tonsils and spleen of broilers were investigated. Broilers that were challenged only with S. Enteritidis that received the compound in test showed lower frequency of bacteria isolation in lymphoid organs. Besides, decreased number of oocysts of E. tenella was observed and the intestinal lesion scores caused by infection was lower. Organic acids promoted a benefit on broilers intestinal health with positive effects on the control of Salmonella Enteritidis with Eimeria tenella.

Frangos desafiados experimentalmente com Salmonella enterica sorovar enteritidis e Eimeria tenella e tratados com ácidos orgânicos / Chickens challenged against Salmonella enterica sorovar enteritidis and Eimeria tenella and treated with organic acids

Foi avaliado um composto comercial de ácidos orgânicos, adicionado à ração, no controle da Salmonella de frangos de corte desafiados com Salmonella Enteritidis e Salmonella Enteritidis associadas à Eimeria tenella. Foram utilizados 504 pintos de um dia, fêmeas, da linhagem Hubbard®, sendo o delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 2x3, totalizando seis tratamentos com seis repetições e 14 aves a unidade experimental. Foi analisado o pH intestinal, o escore de lesão dos cecos, contagem de oocistos fecais e a presença de salmonela no baço e tonsilas cecais das aves. Aves desafiadas com S. Enteritidis que receberam ácidos apresentaram menor frequência de isolamento da bactéria nos órgãos linfoides analisados. Assim como apresentaram redução no número de oocistos de E. tenella nas excretas coletadas diretamente na bandeja e redução dos escores de lesão intestinal provocadas pela infecção por Eimeria tenella. Os ácidos orgânicos promoveram benefício à saúde intestinal dos frangos de corte com reflexos positivos no controle da Salmonella Enteritidis juntamente com a Eimeria tenella.(AU)

A commercial organic acids compound was assessed, added to feed, to control Salmonella Enteritidis. Broilers were challenged with Salmonella Enteritidis and Salmonella Enteritidis associated with Eimeria tenella. Five hundred and four day-old Hubbard® females chicks were used in a completely randomized design in a 2x3 factorial, a total of six treatments with six replications and being 14 birds the experimental unit. Intestinal pH, cecum lesion score, oocyst faecal counts and the presence of Salmonella in the cecal tonsils and spleen of broilers were investigated. Broilers that were challenged only with S. Enteritidis that received the compound in test showed lower frequency of bacteria isolation in lymphoid organs. Besides, decreased number of oocysts of E. tenella was observed and the intestinal lesion scores caused by infection was lower. Organic acids promoted a benefit on broilers intestinal health with positive effects on the control of Salmonella Enteritidis with Eimeria tenella.(AU)

Assessment of a segregated medicated early weaning protocol for elimination of Actinobacillus pleuropneumoniae / Avaliação de um protocolo de desmame precoce segregado medicado para a eliminação de Actinobacillus pleuropneumoniae

To assess the success of a segregated medicated early weaning protocol for elimination of Actinobacillus pleuropneumoniae, ten consecutive batches of 100 pigs per batch weaned at 7-9 days of age were monitored at 21-22 weeks of age looking for presence of productive cough, presence of antibodies against the agent and pleuropneumonia-compatible lung lesions at slaughter. Also, whole tonsils were processed for A. pleuropneumoniae identification by both bacteriological isolation and nested-PCR using a direct method. Positive serological test (1.4%) and PCR (3.5%) results, suggested that A. pleuropneumoniae could not be eradicated in all batches, even using segregated medicated early weaning protocol.(AU)

Para avaliar o sucesso de um protocolo de desmame precoce segregado medicado para a eliminação de Actinobacillus pleuropneumoniae, dez lotes consecutivos de 100 suínos por lote desmamados aos 7-9 dias de idade foram monitorados às 21-22 semanas de idade procurando a presença de tosse produtiva, presença de anticorpos contra o agente e lesões pulmonares compatíveis com pleuropneumonia no abate. Além disso, as tonsilas inteiras foram processadas para a identificação de A. pleuropneumoniae por isolamento bacteriológico e nested PCR usando um método direto. Os resultados serológicos (1,4%) e PCR (3,5%) positivos sugerem que não foi possível erradicar em todos os lotes, mesmo usando um protocolo de desmame precoce segregado medicado.(AU)

Defined and undefined commercial probiotics cultures in the prevention of Salmonella Enteritidis in broilers

ABSTRACT: This study aimed to evaluate the efficacy of probiotics from different formations, defined and undefined cultures, applied in the control of Salmonella Enteritidis in broilers, identifying the compositions and states for which the probiotics are more effective. For that, 390 broilers were inoculated orally with 1.00 ml of Salmonella Enteritidis at a concentration of 1.2x109 CFU (Colony Forming Units). The experimental design used was randomized blocks with 5 treatments and 6 replications, totaling 30 boxes with 13 birds/box (13 birds/m2). The treatments were provided via drinking water 1 hour after inoculation, keeping a daily treatment of 12 hours with probiotics, for 3 consecutive days (birds at 1, 2 and 3 days of age). In general, the five treatments conducted were: T1 - Control without probiotic, T2 - Probiotic A (defined culture - lyophilized form, strain 7), T3 - Probiotic B (defined culture - lyophilized form, strain 11), T4 - Probiotic C (undefined culture liquid form), T5 - Probiotic D (undefined culture - liquid form). After treatments, performance was evaluated through average body weight, feed conversion and mortality counting. Microbiological analysis and Salmonella isolation were performed using MPN (Most Probable Number) and selective enrichment technique methods, respectively. Samples of ileum and liver pool, cecal tonsils, cecum, heart and spleen pool were collected at 5 and 31 days of age. No differences were observed on growth performance and isolation of Salmonella Enteritidis (p0.05). All probiotics applied were effective on reducing Salmonella Enteritidis colonization in the ileum, cecal tonsils, and cecum at 5 days of life. Probiotics T2 and T5 has shown effectiveness in reducing colonization at 31 days, being considered the most efficient on Salmonella Enteritidis control, for the intestines segments evaluated. It was not possible to affirm which probiotics formation, defined or undefined, is more efficient for Salmonella Enteritidis control.

RESUMO: O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia dos probióticos de diferentes constituições: de culturas definidas e de culturas indefinidas no controle de Salmonella Enteritidis em frangos de corte, identificando qual a constituição e qual ou quais probióticos testados é mais eficaz. Foram inoculados 390 frangos de corte com 1ml de Salmonella Enteritidis, via oral, na concentração de 1,2 x 109 UFC (Unidades Formadoras de Colônia). O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados com 5 tratamentos e 6 repetições cada, totalizando 30 boxes com 13 aves/boxe (13 aves/m2). Os tratamentos foram fornecidos via água de bebida 1 hora após a inoculação, com 12 horas de tratamento com probióticos por dia, durante 3 dias consecutivos (1º, 2º e 3º dia de idade das aves). Os cinco tratamentos foram: T1 - Controle sem probiótico, T2 - Probiótico A (cultura definida - forma liofilizada, 7 cepas), T3 - Probiótico B (cultura definida - forma liofilizada, 11 cepas), T4 - Probiótico C (cultura indefinida - forma líquida), T5 - Probiótico D (cultura indefinida - forma liofilizada). O desempenho zootécnico foi avaliado usando o peso médio, a conversão alimentar e a mortalidade. Análises microbiológicas foram realizadas utilizando o método NMP (NMP/g)e isolamento de Salmonella através técnica de enriquecimento seletivo. Amostras de pool de íleo, tonsilas cecais e cecos e pool de fígado, coração e baço foram coletadas aos 5 dias e aos 31 dias de idade. Para desempenho zootécnico e isolamento de Salmonella Enteritidis não foram observadas diferenças (p0,05). Todos os probióticos utilizados foram eficazes na redução da colonização de Salmonella Enteritidis no íleo, tonsilas cecais e cecos aos 5 dias de idade e somente os probióticos do T2 (cultura definida) e T5 (cultura indefinida) reduziram a colonização aos 31 dias sendo considerados os mais eficazes no controle de Salmonella Enteritidis nestes segmentos intestinais avaliados. Não se pode afirmar quais das constituições de probióticos, culturas definidas ou indefinidas, são mais eficazes no controle de Salmonella Enteritidis.

Defined and undefined commercial probiotics cultures in the prevention of Salmonella Enteritidis in broilers / Probióticos comerciais de culturas definidas e indefinidas na prevenção de Salmonella Enteritidis em frangos de corte

This study aimed to evaluate the efficacy of probiotics from different formations, defined and undefined cultures, applied in the control of Salmonella Enteritidis in broilers, identifying the compositions and states for which the probiotics are more effective. For that, 390 broilers were inoculated orally with 1.00 ml of Salmonella Enteritidis at a concentration of 1.2x109 CFU (Colony Forming Units). The experimental design used was randomized blocks with 5 treatments and 6 replications, totaling 30 boxes with 13 birds/box (13 birds/m2). The treatments were provided via drinking water 1 hour after inoculation, keeping a daily treatment of 12 hours with probiotics, for 3 consecutive days (birds at 1, 2 and 3 days of age). In general, the five treatments conducted were: T1 - Control without probiotic, T2 - Probiotic A (defined culture - lyophilized form, strain 7), T3 - Probiotic B (defined culture - lyophilized form, strain 11), T4 - Probiotic C (undefined culture liquid form), T5 - Probiotic D (undefined culture - liquid form). After treatments, performance was evaluated through average body weight, feed conversion and mortality counting. Microbiological analysis and Salmonella isolation were performed using MPN (Most Probable Number) and selective enrichment technique methods, respectively. Samples of ileum and liver pool, cecal tonsils, cecum, heart and spleen pool were collected at 5 and 31 days of age. No differences were observed on growth performance and isolation of Salmonella Enteritidis (p≥0.05). All probiotics applied were effective on reducing Salmonella Enteritidis colonization in the ileum, cecal tonsils, and cecum at 5 days of life. Probiotics T2 and T5 has shown effectiveness in reducing colonization at 31 days, being considered the most efficient on... (AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia dos probióticos de diferentes constituições: de culturas definidas e de culturas indefinidas no controle de Salmonella Enteritidis em frangos de corte, identificando qual a constituição e qual ou quais probióticos testados é mais eficaz. Foram inoculados 390 frangos de corte com 1ml de Salmonella Enteritidis, via oral, na concentração de 1,2 x 109 UFC (Unidades Formadoras de Colônia). O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados com 5 tratamentos e 6 repetições cada, totalizando 30 boxes com 13 aves/boxe (13 aves/m2). Os tratamentos foram fornecidos via água de bebida 1 hora após a inoculação, com 12 horas de tratamento com probióticos por dia, durante 3 dias consecutivos (1º, 2º e 3º dia de idade das aves). Os cinco tratamentos foram: T1 - Controle sem probiótico, T2 - Probiótico A (cultura definida - forma liofilizada, 7 cepas), T3 - Probiótico B (cultura definida - forma liofilizada, 11 cepas), T4 - Probiótico C (cultura indefinida - forma líquida), T5 - Probiótico D (cultura indefinida - forma liofilizada). O desempenho zootécnico foi avaliado usando o peso médio, a conversão alimentar e a mortalidade. Análises microbiológicas foram realizadas utilizando o método NMP (NMP/g)e isolamento de Salmonella através técnica de enriquecimento seletivo. Amostras de pool de íleo, tonsilas cecais e cecos e pool de fígado, coração e baço foram coletadas aos 5 dias e aos 31 dias de idade. Para desempenho zootécnico e isolamento de Salmonella Enteritidis não foram observadas diferenças (p≥0,05). Todos os probióticos utilizados foram eficazes na redução da colonização de Salmonella Enteritidis no íleo, tonsilas cecais e cecos aos 5 dias de idade e somente os probióticos do T2 (cultura definida) e T5 (cultura indefinida) reduziram a colonização aos 31...(AU)

Defined and undefined commercial probiotics cultures in the prevention of Salmonella Enteritidis in broilers / Probióticos comerciais de culturas definidas e indefinidas na prevenção de Salmonella Enteritidis em frangos de corte

This study aimed to evaluate the efficacy of probiotics from different formations, defined and undefined cultures, applied in the control of Salmonella Enteritidis in broilers, identifying the compositions and states for which the probiotics are more effective. For that, 390 broilers were inoculated orally with 1.00 ml of Salmonella Enteritidis at a concentration of 1.2x109 CFU (Colony Forming Units). The experimental design used was randomized blocks with 5 treatments and 6 replications, totaling 30 boxes with 13 birds/box (13 birds/m2). The treatments were provided via drinking water 1 hour after inoculation, keeping a daily treatment of 12 hours with probiotics, for 3 consecutive days (birds at 1, 2 and 3 days of age). In general, the five treatments conducted were: T1 - Control without probiotic, T2 - Probiotic A (defined culture - lyophilized form, strain 7), T3 - Probiotic B (defined culture - lyophilized form, strain 11), T4 - Probiotic C (undefined culture liquid form), T5 - Probiotic D (undefined culture - liquid form). After treatments, performance was evaluated through average body weight, feed conversion and mortality counting. Microbiological analysis and Salmonella isolation were performed using MPN (Most Probable Number) and selective enrichment technique methods, respectively. Samples of ileum and liver pool, cecal tonsils, cecum, heart and spleen pool were collected at 5 and 31 days of age. No differences were observed on growth performance and isolation of Salmonella Enteritidis (p≥0.05). All probiotics applied were effective on reducing Salmonella Enteritidis colonization in the ileum, cecal tonsils, and cecum at 5 days of life. Probiotics T2 and T5 has shown effectiveness in reducing colonization at 31 days, being considered the most efficient on Salmonella Enteritidis control, for the intestines segments evaluated. It was not possible to affirm which probiotics formation, defined or undefined, is more efficient for Salmonella Enteritidis control.(AU)

O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficácia dos probióticos de diferentes constituições: de culturas definidas e de culturas indefinidas no controle de Salmonella Enteritidis em frangos de corte, identificando qual a constituição e qual ou quais probióticos testados é mais eficaz. Foram inoculados 390 frangos de corte com 1ml de Salmonella Enteritidis, via oral, na concentração de 1,2 x 109 UFC (Unidades Formadoras de Colônia). O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados com 5 tratamentos e 6 repetições cada, totalizando 30 boxes com 13 aves/boxe (13 aves/m2). Os tratamentos foram fornecidos via água de bebida 1 hora após a inoculação, com 12 horas de tratamento com probióticos por dia, durante 3 dias consecutivos (1º, 2º e 3º dia de idade das aves). Os cinco tratamentos foram: T1 - Controle sem probiótico, T2 - Probiótico A (cultura definida - forma liofilizada, 7 cepas), T3 - Probiótico B (cultura definida - forma liofilizada, 11 cepas), T4 - Probiótico C (cultura indefinida - forma líquida), T5 - Probiótico D (cultura indefinida - forma liofilizada). O desempenho zootécnico foi avaliado usando o peso médio, a conversão alimentar e a mortalidade. Análises microbiológicas foram realizadas utilizando o método NMP (NMP/g)e isolamento de Salmonella através técnica de enriquecimento seletivo. Amostras de pool de íleo, tonsilas cecais e cecos e pool de fígado, coração e baço foram coletadas aos 5 dias e aos 31 dias de idade. Para desempenho zootécnico e isolamento de Salmonella Enteritidis não foram observadas diferenças (p≥0,05). Todos os probióticos utilizados foram eficazes na redução da colonização de Salmonella Enteritidis no íleo, tonsilas cecais e cecos aos 5 dias de idade e somente os probióticos do T2 (cultura definida) e T5 (cultura indefinida) reduziram a colonização aos 31 dias sendo considerados os mais eficazes no controle de Salmonella Enteritidis nestes segmentos intestinais avaliados. Não se pode afirmar quais das constituições de probióticos, culturas definidas ou indefinidas, são mais eficazes no controle de Salmonella Enteritidis.(AU)

Clonalidade e perfis de resistência a antibióticos em Yersinia enterocolitica de suínos e humanos no Brasil

Yersinia enterocolitica é um patógeno associado usualmente a produtos derivados de suínos, seu principal reservatório. Esse patógeno é frequentemente isolado em tecidos linfáticos de suínos, em especial tonsilas palatinas e linfonodos mesentéricos. Por estar intimamente associada a cadeia produtiva de suínos, Y. enterocolitica está sujeita a todos os efeitos derivados dos procedimentos de manejo usualmente aplicados aos animais, como o desenvolvimento de resistência devido a aplicação preventiva ou terapêutica de antibióticos. Em um estudo prévio de nosso grupo, Y. enterocolitica foi identificada em uma cadeia produtiva de suínos e os isolados apresentaram alta similaridade de seus perfis de macro-restrição por XbaI. Assim, esse estudo teve como objetivo avaliar a persistência de Y. enterocolitica nessa cadeia produtiva de suínos, além de verificar a similaridade e potencial clonalidade dos isolados do bio-sorotipo 4/O:3 com isolados obtidos de casos de yersiniose humana, além de seus perfis de resistência a antibióticos. Amostras de tonsilas palatinas (n = 100), palatos (n = 30) e carne de cabeça (n = 17) foram obtidas durante o abate de suínos provenientes da mesma cadeia produtiva de suínos em que o estudo prévio de nosso grupo foi conduzido; as amostras foram submetidas a pesquisa de Y. enterocolitica, e os isolados obtidos submetidos a identificação de seus bio-sorotipos, pesquisa de genes de virulência (ail, ystB, virF, myfA, ystA, ystC, fepA, fepD, fes, tccC, ymoA, hreP e sat) e resistência múltipla a antibióticos (emrD, yfhD e marC). Parte desses isolados (n = 24) e isolados obtidos no estudo anterior de nosso grupo (n = 13) foram selecionados e caracterizados quanto aos seus perfis de macro-restrição com XbaI e NotI. Entre as amostras analisadas, 14 (9,5%) foram positivas para Y. enterocolitica, e os isolados obtidos (n = 24) foram identificados como pertencentes ao bio-sorotipo 4/O:3. Todos os isolados apresentaram resultados positivos para os genes de virulência e resistência múltipla a antibióticos pesquisados. Os isolados selecionados apresentaram alta similaridade após análise de seus perfis de macro-restrição, sendo agrupados em dois clusters com 33 (similaridade entre 82,4 e 100,0%) e 4 (similaridade entre 83,3 e 100,0%) isolados. Em seguida, parte desses isolados (n = 24) e isolados de Y. enterocolitica 4/O:3 obtidos de casos de yersiniose humana (n = 3) foram submetidos a sequenciamento completo de seus genomas e análises de similaridade, além de serem caracterizados quanto aos seus perfis de resistência a antibióticos pelo método de difusão em disco (14 antibióticos). Pela análise de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP), os isolados foram agrupados em dois grandes clados, sendo apenas um isolado (R31) no Clado A e os demais no Clado B, e um total de sete grupos clonais. As diferenças marcantes observadas no genoma do isolado R31 foram determinadas pela presença de vários genes associados a fagos, o que determinou a sua identificação como pertencente ao sorotipo O:5. Treze isolados apresentaram resistência a antibióticos de três ou mais classes, sendo caracterizados como multidroga resistentes. A análise dos genomas dos isolados permitiu a identificação de 17 genes associados a resistência a antibióticos. A maioria dos isolados apresentou resistência a cefalosporinas, porém sem a presença de genes correspondentes a esse grupo de antibiótico. O estudo permitiu identificar a persistência de Y. enterocolitica do bio-sorotipo 4/O:3 na cadeia produtiva de suínos analisada, além de uma alta similaridade genética entre isolados obtidos nessa cadeia produtiva com isolados obtidos de casos de yersiniose humana, confirmando a relevância de suínos na manutenção e transmissão desse patógeno.

Yersinia enterocolitica is a foodborne pathogen usually associated to pork products, once pigs are their main reservoirs. This pathogen is often isolated from swine lymphatic tissues, especially tonsils and mesenteric lymph-nodes. Once it is close related to swine production, Y. enterocolitica is subjected to all effects resulted from the usual handling of pigs, such as the developing of antibiotic resistance as a consequence of preventive or therapeutic use of antimicrobials. Y. enterocolitica was previously identified by our group in a swine production chain and the obtained isolates presented high matching of band profiles after macro-restriction with XbaI. Thus, this study we aimed to evaluate the persistence of Y. enterocolitica in this swine production chain, the genetic similarity and potential clonality of the bio-serotype 4/O:3 isolates from this production chain with human yersiniosis isolates and their antibiotic resistance profiles. Samples of palatine tonsils (n = 100), palates (n = 30) and head meat (n = 17) were obtained from slaughtered pigs from the same production chain included in our previous study; samples were subjected to isolation of Y. enterocolitica and the isolates subjected to identification of their bio-serotypes, research of virulence genes (ail, ystB, virF, myfA, ystA, ystC, fepA, fepD, fes, tccC, ymoA, hreP and sat) and multidrug resistance related genes (emrD, yfhD and marC). A subset of these isolates (n = 24) and isolates obtained in our previous study (n = 13) were selected and characterized based on their band profiles after macro-restriction with XbaI and NotI. Y. enterocolitica was isolated in 14 (9.5%) of the analyzed samples, and the obtained isolates (n = 24) were identified as bio-serotype 4/O:3. All isolates presented the researched virulence and multidrug resistance related genes. The selected isolates presented high band matching after macro-restriction analysis, being grouped in two clusters with 33 (82.4 to 100.0% of band matching) and 4 (83.3 to 100.0% band matching) isolates. Then, a subset of these isolates (n = 24) and Y. enterocolitica 4/O:3 isolates obtained from human yersiniosis (n = 3) were subjected to whole genome sequencing, checked for genetic similarity and antibiotic resistance through the disk diffusion assay (14 antibiotics). Based on Single Nucleotide Polymorphism (SNP) analysis, isolates were grouped in two major clades: a single isolate (R31) was included in Clade A and other in Clade B, with a total of seven clonal groups. R31 presented several phage related genes, explaining its genetic differences when compared to other isolates. Thirteen isolates were characterized as multidrug resistant, once they presented resistance to three or more antibiotic classes. Genome analysis revealed the presence of 17 antibiotic resistance related genes among Y. enterocolitica isolates, and most of the isolates presented resistance to cephalosporins, despite the absence of the related genes. We were able to demonstrate the persistence of Y. enterocolitica 4/O:3 in the studied swine production chain, despite a high genetic similarity among the obtained isolates and human yersiniosis isolates, confirming the relevance of the swine in the maintenance and transmission of this pathogen.

DISTRIBUIÇÃO DO PARVOVÍRUS CANINO NOS TECIDOS E CARACTERIZAÇÃO DO SUBTIPO CIRCULANTE EM MINAS GERAIS

O Parvovírus canino tipo 2 (CPV-2) é responsável por quadros de gastroenterite hemorrágica em cães e, mais raramente, de miocardite não supurativa em filhotes caninos. O diagnóstico em animais necropsiados é realizado principalmente pelas lesões intestinais, porém, quando há alterações pós-mortais ou lesões intestinais inespecíficas, a imuno-histoquímica (IHQ) tem sido utilizada para detectar o vírus em outros tecidos. Três variantes antigênicas do CPV-2; CPV-2a, CPV-2b e CPV- 2c foram identificadas em vários países por meio de testes moleculares, podendo estar associadas a diferentes quadros epidemiológicos e gravidade de lesões. Desta forma, o objetivo deste estudo é descrever a distribuição do Parvovírus canino nos tecidos por meio da marcação IHQ e caracterizar o(s) subtipo(s) circulante(s) em Minas Gerais por análises moleculares e sequenciamento. Dez cães com lesões macroscópicas sugestivas de parvovirose canina e cinco cães controles negativos foram necropsiados no Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal de Lavras no período de 2020-2021. Tecidos destes cães foram submetidos à análise histológica, imuno-histoquímica e molecular. Na necropsia as lesões mais frequentes foram serosa do intestino delgado hiperêmica e granular, mucosa avermelhada e enrugada, placas de Peyer evidentes, linfonodos mesentéricos e retrofaríngeos aumentados de tamanho e avermelhados. Microscopicamente as principais lesões foram necrose de criptas (9/10) e descamação das células epiteliais para a luz (8/10), atrofia e fusão das vilosidades intestinais (7/10), necrose e rarefação de celulas linfoides, sendo mais acentuadas em tonsilas palatinas (6/10) e linfonodos retrofarígeos (6/10). Os tecidos com maior positividade na IHQ para o CPV-2 foram língua (88,89%); tonsila, linfonodos retrofaríngeos (77,78), íleo (70%) e medula óssea (57,14%). Todos os dez cães foram positivos para CPV-2, na reação em cadeia pela polimerase (PCR). O sequenciamento revelou uma alta identidade de nucleotídeos na VP2 e uma mutação no aminoácido 426 (ácido aspártico), caracterizando a ocorrência do subtipo CPV-2b. Os controles negativos não tiveram marcação IHQ e foram negativos na PCR para CPV-2. Este estudo contribui para o melhor conhecimento da distribuição do Parvovírus canino nos tecidos, sendo língua, tonsila, linfonodo retrofaríngeo, íleo e medula óssea os tecidos que tiveram o maior número de imunomarcações, sendo, desta forma, indicados para o diagnóstico IHQ da parvovirose canina. Os resultados também demonstram que o subtipo CPV-2b circula na população canina de Minas Gerais.

The canine Parvovirus type 2 (CPV-2) is responsible for hemorrhagic gastroenteritis in dogs and, more rarely, non-suppurative myocarditis in puppies. The diagnosis in necropsied dogs is mainly made by intestinal lesions, but when there are intestinal post-mortem alterations or nonspecific lesions, immunohistochemistry (IHC) has been used to detect the virus in other tissues. Three antigenic variants of CPV-2; CPV-2a, CPV-2b and CPV-2c, have been identified in many countries by molecular testing and may be associated with different epidemiological pictures and severity of lesions. Thus, the aim of this study is to describe the distribution of canine parvovirus in tissues by IHC and to characterize the circulating strain(s) in Minas Gerais by molecular analysis and sequencing. Ten dogs with gross lesions suggestive of canine parvovirosis and five negative controls were necropsied at the Veterinary Pathology Sector of the Federal University of Lavras in the 2020-2021 period. Tissues from these dogs were submitted to histological, immunohistochemical, and molecular analysis. The most frequent gross lesions were hyperemic small intestinal serosa, reddish and rough mucosa, with evident Peyer's patches, increased and reddish retropharyngeal and mesenteric lymph nodes. Microscopically, atrophy and fusion of the intestinal villi (7/10), dilated crypts (5/10), necrosis (9/10), and desquamation of epithelial cells into the lumen (8/10) were visualized. Lymphoid necrosis and cellular rarefaction were more pronounced in tonsils (6/10) and retropharyngeal lymph nodes (6/10). The tissues more often positive on IHC for CPV-2 were tongue (88,89%); tonsil, retropharyngeal lymph nodes (77,78%); ileum (70%) and bone marrow (57,14%). All ten dogs were positive for CPV-2 in the polymerase chain reaction (PCR). Nucleotide sequencing reveaed a high nucleotide identity to VP2 and a consistent mutation at amino acid 426 (aspartic acid), characterizing the occurrence of the CPV-2b subtype. Negative controls were negative by IHC and PCR tests for CPV-2. This study contributed to a better knowledge of canine Parvovirus distribution in tissues, being tongue, tonsil, retropharyngeal lymph node, ileum and bone marrow the tissues with the highest frequency of immunolabeling, therefore for IHQ diagnosis of canine parvovirus infection. The results also demonstrate that the CPV-2b subtype circulates in the canine population of Minas Gerais.