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Plastic pollution represents a threat to marine ecosystems and has therefore been gaining space in the realm of public interest. In this study, we investigated the ingestion of food and non-food items (i.e., plastic particles) by fish and crabs. These animals are commonly collected by trawling with a double-ring net along the coast of Cananéia, state of São Paulo, Brazil; some of them are consumed as food by the local population. Fish and crab stomachs were removed and dissected, and their contents were examined under a stereoscopic microscope with an image-capturing system. The presence or absence of plastic was also registered. We examined 139 specimens of 16 fish species and 143 specimens of four crab species. The most frequent food items found in fish were unidentified food, followed by crustaceans, molluscs, polychaetes, and other fish; in crabs, the items were unidentified food, followed by crustaceans, molluscs and fish. Plastic particles were found in all fish species, representing 47.5% of the individuals analysed. In crabs, the incidence of plastic was lower, occurring in only two species (5% in Callinectes danae and 3% in C. ornatus). Only four fish species analysed had previous records of plastic ingestion in the scientific literature. The high incidence of microplastics in our study is worrying because they negatively affect the animals' lives and can be transferred through the tropic web to top predators, including humans, through the ingestion of contaminated animals.(AU)

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he resistance against antimalarial drugs represents a global challenge in the fight and control of malaria. The Brazilian biodiversity can be an important tool for research and development of new medicinal products. In this context, toxinology is a multidisciplinary approach on the development of new drugs, including the isolation, purification, and evaluation of the pharmacological activities of natural toxins. The present study aimed to evaluate the cytotoxicity, as well as the antimalarial activity in silico and in vitro of four compounds isolated from Rhinella marina venom as potential oral drug prototypes. Methods: Four compounds were challenged against 35 target proteins from P. falciparum and screened to evaluate their physicochemical properties using docking assay in Brazilian Malaria Molecular Targets (BraMMT) software and in silico assay in OCTOPUS® software. The in vitro antimalarial activity of the compounds against the 3D7 Plasmodium falciparum clones were assessed using the SYBR Green I based assay (IC50). For the cytotoxic tests, the LD50 was determined in human pulmonary fibroblast cell line using the [3(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] (MTT) assay. Results: All compounds presented a ligand-receptor interaction with ten Plasmodium falciparum-related protein targets, as well as antimalarial activity against chloroquine resistant strain (IC50 = 3.44 µM to 19.11 µM). Three of them (dehydrobufotenine, marinobufagin, and bufalin) showed adequate conditions for oral drug prototypes, with satisfactory prediction of absorption, permeability, and absence of toxicity. In the cell viability assay, only dehydrobufotenin was selective for the parasite. Conclusions: Dehydrobufotenin revealed to be a potential oral drug prototype presenting adequate antimalarial activity and absence of cytotoxicity, therefore should be subjected to further studies.(AU)

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The rocky shores of Praia Grande, in Ubatuba (São Paulo, Brazil), are formed by rock and Sabellaridae polychaete sandy reefs. These microenvironments offer shelters and foraging areas for several marine organisms and attracts many tourists. The crab Eriphia gonagra (Fabricius, 1781) inhabits these structures and can be used as a bioindicator, since they may be affected by anthropogenic actions. This study evaluated the stomach contents and characterized the feeding habits of an E. gonagra population, inhabiting the rocky shores from Praia Grande, taking into account the sex, size, and microhabitat. Monthly samplings were performed in 1996 and 1997 and the crabs were manually captured on the rocky surface or into of the sand reefs. So, the specimens sampled were characterized according to their capture site (microhabitat) as rocky (RO) or sand reef (SR). The most abundant food items were Mollusca, algae, Polychaeta, and Crustacea, being observed the importance of these groups as a nutritive resource in the studied environment. Mollusks were more abundant in the stomachs of crabs sampled on the rocks, while the other items increased in the sand reefs crabs. In the specimens sampled in the SR, polychaetes were the item food more common, indicating that this biotope is also used as a rich source of protein. The proportion of items differed also between size classes. Knowledge of such habits is essential for nutritional requirements studies, monitoring relationships among organisms, as well as assessing future environmental impacts in consolidated coastal regions.

O costão rochoso de Praia Grande (Ubatuba, SP) é formado por matacões rochosos e recifes de areia formados por poliquetas sabelarídeos. Essas estruturas oferecem abrigo e área de forrageamento para diversos organismos marinhos, e atraem muitos turistas. O caranguejo Eriphia gonagra (Fabricius, 1781) habita essas estruturas, podendo ser utilizado como bioindicador, uma vez que estas podem ser afetadas por ações antrópicas. Por meio deste estudo avaliou-se o conteúdo estomacal e caracterizou-se os hábitos alimentares de uma população de E. gonagra, levando em consideração o sexo, tamanho e microhabitat. Amostragens mensais foram realizadas em 1996 e 1997 e os caranguejos foram capturados manualmente na Praia Grande. Assim, os espécimes amostrados foram caracterizados de acordo com o local de captura (microhabitat) como recife rochoso (RO) ou de areia (SR). Os itens mais abundantes foram moluscos, algas, poliquetos e crustáceos, sendo observada a importância destes grupos como recurso alimentar no ambiente estudado. Os moluscos foram mais abundantes nos estômagos dos caranguejos amostrados no RO, enquanto os demais item aumentavam nos caranguejos dos recifes de areia. Dentre os espécimes amostrados no SR, poliquetos foi o alimento foi mais comum, indicando que esse biótopo também é utilizado como fonte rica em proteínas. A proporção de itens diferiu também entre classes de tamanho. Conhecer tais hábitos é essencial para estudos de requisitos nutricionais, monitoramento de relações entre organismos, bem como para avaliação de impactos ecossistêmicos em costões rochosos.

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Sustainable production of adequate quantities of food to support a growing human population is a worldwide goal. Under current feeding conditions in the United States, dairy cattle convert dietary nitrogen to milk nitrogen with 25% efficiency. The remaining 75% is excreted, which contributes to air and water quality problems and reduces economic performance of the industry. Efficiency could be improved to 29% if protein was given to just meet current NRC requirements. Additional improvements may be achievable, but only with improved knowledge of amino acid (AA) requirements. The current metabolizable protein requirement model overestimates true requirements due to lack of knowledge of AA supply and requirements and to intrinsic limitations in system data and assumptions. Existing protein supply models based on passage and degradation rates are biased, which undermines predictions of AA supply. The use of an equation driven solely by protein solubility of each ingredient in the diet with no consideration of the effects of passage rate yielded unbiased predictions with significant improvements in precision. However, this still leaves a problem in predicting the AA composition of the ruminally undegraded protein (RUP). Current models generally assume that RUP AA composition equals the parent ingredient composition, but assessments of RUP AA composition indicate that this is false. Thus, bias is being introduced into predictions of the absorbed AA supply, which hampers derivation of estimates of AA digestion and absorption from the small intestine. Emerging isotope-based methods hold promise in allowing assessment of AA availability from individual ingredients in vivo, which will allow construction of a database of true ingredient AA bioavailabilities. These efforts will eventually allow development of more robust predictions of AA supply. On the AA requirement side, numerous data indicate that the efficiency of metabolizable protein use for lactation is variable and maximally 45%, whereas most models assume an efficiency of 65% or greater. The efficiencies of individual AA are centered on the protein efficiency value with those lower in efficiency, likely being provided in large excess. A better representation of the use efficiency of individual AA would allow improvements in overall animal N efficiency. Variable efficiency is driven by regulatory mechanisms that control protein synthesis in response to the supply of energy and individual AA and circulating concentrations of hormones and these drivers act independently and additively. Under this theory, protein synthesis can respond to nutrients other than the one identified as most limiting. Reflecting this regulation in our requirement models will allow better prediction of AA efficiency and enable construction of diets that minimize excess of individual AA by optimizing the energy and hormonal signals to improve N efficiency. Models of such an interacting system have been developed and shown to be superior in performance to models based on current paradigms.(AU)

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The objective of the study was to determine the digestible calcium from different sources by direct and indirect methods. Thirty castrated male pigs were used, distributed in randomized blocks, in six treatments: 1- Calcitic limestone; 2-Dicalcium phosphate powder 18%; 3- Dicalcium phosphate powder 20%; 4- Dicalcium microgranulated phosphate 18%; 5- Monodicalcium microgranulated phosphate 20%; 6- Monodicalcium microgranulated phosphate 21%, with six replicates and one animal per experimental unit. A basal diet was formulated to meet the nutritional requirements of the animals, except for calcium (0.06%) and the evaluated sources replaced the basal diet in order to provide 0.45% of total Ca. At the same time, two stool collection methods were evaluated: total collection and fecal indicator. The animals were housed in metabolism cages for 12 days to collect feces and urine to determine the calcium values used to estimate digestibility coefficients and digestible calcium. The total collection method and the faecal indicator method did not affect the true digestibility coefficient of calcium. The calcium digestibility of the microgranulated dicalcium phosphate 21% (MM21) was superior in comparison with the other calcium sources evaluated by the indirect method in the present study. The average values of true digestibility of the calcium sources, in percentage, were: calcitic limestone: 82.47; dicalcium phosphate powder 18%: 80.87; dicalcium phosphate powder 20%: 85.65; dicalcium microgranulated phosphate 18%: 81.65; monodicalcium microgranulated phosphate 20%: 84.15; and monodicalcium microgranulated phosphate 21%: 88.35. The two methodologies can be used to determine the digestibility of calcium.

Objetivou-se determinar o cálcio digestível de diferentes fontes pelos métodos direto e indireto. Foram utilizados 36 suínos machos castrados, distribuídos em blocos casualizados em seis tratamentos, sendo: 1- calcário calcítico, 2- fosfato bicálcico pó 18%, 3- fosfato bicálcico pó 20 %, 4- fosfato bicálcico microgranulado 18%, 5- fosfato monobicálcico microgranulado 20% e 6- fosfato monobicálcico microgranulado 21 %, com seis repetições e um animal por unidade experimental. Uma ração basal foi formulada para atender as exigências nutricionais dos animais, exceto para cálcio (0,06%) e as fontes avaliadas substituíram a ração basal de modo a fornecer 0,45% de Ca total. Foram avaliados ao mesmo tempo dois métodos de coleta de fezes: coleta total e indicador fecal. Os animais foram alojados em gaiolas de metabolismo por 12 dias para coleta de fezes e urina para determinação dos valores de cálcio, utilizados para estimar os coeficientes de digestibilidade e o cálcio digestível. Os métodos de coleta total e do indicador fecal não afetaram o coeficiente de digestibilidade verdadeiro do cálcio. A digestibilidade do cálcio no fosfato bicálcico microgranulado 21% (MM21) foi superior em comparação com as fontes de cálcio avaliadas pelo método indireto no presente estudo. Os valores médios da digestibilidade verdadeira das fontes de cálcio, em porcentagem, foram: calcário calcítico: 82,47; fosfato bicálcico em pó 18%: 80,87; fosfato bicálcico em pó 20%: 85,65; fosfato bicálcico microgranulado 18%: 81,65; fosfato monobicálcico microgranulado 20%: 84,15; e fosfato monobicálcico microgranulado 21%: 88,35. As duas metodologias podem ser empregadas para determinar a digestibilidade do cálcio.

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classificada como sobreexplorada pela legislação brasileira, sustenta as duas maiores cadeias de processamento industrial de pescados nacional: os enlatados de sardinha e de atum. Estudos recentes buscaram desenvolver a criação da sardinha em cativeiro (maturação e desova, criação de larvas e engorda). Entretanto, ainda existem lacunas, como é o caso do desenvolvimento do trato digestório durante a fase larval, que é uma ferramenta importante para o conhecimento sobre os períodos de alimentação endógena, exógena e mista. O presente estudo descreveu o desenvolvimento do trato digestório da sardinha desde a eclosão até o final da fase larval. Para tal, foram analisadas amostras de larvas coletadas durante o período de 1 a 25 dias de idade, provenientes de tanques de larvicultura, processadas e analisadas morfologicamente. A análise dos cortes histológicos foi realizada em microscopia de luz, seguida de registros fotográficos. Foram descritos os seguintes estádios: I) absorção do vitelo, II) abertura da boca e ânus e III) diferenciação do trato digestório. Na larva recém-eclodida, o trato digestório é um tubo reto, simples e indiferenciado. Aos 2 dias de idade acontece a abertura de boca e ânus. Observou-se a cavidade buco-faríngea com suas primeiras transformações no 5º dia de idade das larvas, o esôfago e o intestino se modificando a partir do 7º dia de idade, e inclusive a evidência de órgãos acessórios, como o fígado, presentes desde as primeiras transformações no 5º dia de idade. Desta forma, o estômago e os cecos pilóricos foram as últimas estruturas a se diferenciarem no 23º dia idade das larvas, estando o trato digestório completamente desenvolvido. Considerando a importância do conhecimento sobre o desenvolvimento do trato digestório para o manejo na larvicultura, este trabalho contribui para o seu desenvolvimento, já que pesquisas relacionadas ao tema são escassas. O presente estudo é uma referência no que diz respeito à morfologia e desenvolvimento inicial da sardinha-verdadeira.

The true sardine; Sardinella brasiliensis; species from the Southeast and South coast of Brazil; classified as two Brazilian species that are overexploited by legislation, support the largest industrial processing chains of national fish, canned tuna and sardines. Recent studies seek to develop the creation of sardines in captivity (maturation and spawning, larval rearing and fattening). However, there are still gaps, such as the development of the digestive tract, especially in the larval stage, which is an important tool for understanding the periods of endogenous, exogenous and mixed feeding of fish. The development presents a detailed study of the development of the digestive tract of the species, during the larva. For this, the process of origin of the larvae were collected, their hatching during the period from 1 to 25 days of age, from larviculture tanks, collected and morphologically. The analysis of histological sections was performed using light microscopy, followed by photographic records. The following stages have been described: I) absorption of the yolk, II) opening of the mouth and anus and III) of the digestive tract. In the newly hatched larva, the digestive tract is a straight, simple, undifferentiated tube. At 2 days of age, mouth and anus are opened. The date of birth of the first transformations was observed on the 5th day of age of the larvae, esophagus and intestine changing from the 7th day of age, including the original of accessory organs (liver) presented since the first transformations on the 5th day of age. . Thus, the stomach and pyloric caeca were the last structures to differentiate on the 23rd day of larval age, presenting a fully developed digestive tract. Considering the importance of knowledge about the development of the digestive tract and management in larviculture, this work contributes to their development, since research related to a theme is scarce, considering the present study as a reference with regard to the morphology and development of sardines true.

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Objetivou-se avaliar os efeitos da utilização da ureia com absorção pósruminal, na suplementação de bovinos Nelore em crescimento recriados à pasto durante o período de transição águas-secas. Para o estudo, foram desenvolvidos dois experimentos, no experimento 1, foi avaliado os parâmetros ruminais e sanguíneos, sendo utilizados 8 bovinos Nelore canulados no rúmen com peso corporal (PC) inicial de 763 ± 44 kg, distribuídos em um duplo quadrado latino 4×4. No experimento 2, foram utilizados 120 bovinos Nelore com PC inicial de 380 ± 35 kg para avaliação do desempenho, distribuídos em um delineamento em blocos casualizados (fator de blocagem o PC inicial). Foram avaliados os mesmos quatro tratamentos em ambos os experimentos: 1: (PV-U) (controle) = suplemento com 24% de proteína bruta (PB) contendo ureia como fonte de nitrogênio não proteico (NNP; 3%) e farelo de soja; Tratamento 2: (PV-PRU) = suplemento com 24% de PB contendo ureia de absorção pós-ruminal (PRU; 3,6%) e farelo de soja; 3: (NNP-U-PRU) = suplemento com 24% de PB contendo ureia + ureia de absorção pós-ruminal (U = 3% e PRU = 3,9%), sem farelo de soja; 4: (NNP-PRU) = suplemento com 24% de PB contendo ureia pósruminal (7,5%), sem farelo de soja. O suplemento foi ofertado em 3 g/kg PC por animal, diariamente, uma vez ao dia (10 hrs). Todos os animais foram mantidos em pastagem de Urochloa brizantha cv. Marandu. As análises estatísticas foram realizadas utilizando o PROC MIXED do SAS, sendo os dados avaliados pelos seguintes contrastes: C1 = PV-U/PV-PRU vs NNP-U-PRU/NNP-PRU (Substituição do farelo de soja por NNP); C2 = NNP-U-PRU vs NNP-PRU (nível baixo e alto de ureia pós-ruminal-PRU); C3= PV-U vs PV-PRU (Ureia convencional vs ureia pós-rimunal). Para os parâmetros ruminais, o pH diferiu entre os tratamentos onde o farelo de soja foi substituído por NNP (P=0,003), apresentando média de pH de 6,75, já os suplementados com NNP, apresentaram média de 6,85. A concentração de nitrogênio amoniacal foi diferente entre os tratamentos com baixo e alto nível de ureia pósruminal (P=0,04), com médias de 6,37 e 7,85 mg/dL, e também entre os tratamentos iv que compararam a ureia convencional versus a ureia pós-ruminal (P=0,03) com médias de 6,24 e 7,59 (mg/dL), respectivamente. A concentração total de ácidos graxos de cadeia curta, foi diferente entre os tratamentos no qual o farelo de soja foi substituído por NNP, com médias de 68,65 e 58,55 Mm (P=0,00), sendo diferente também entre os tratamentos que compararam baixo e alto nível de inclusão da ureia pós-ruminal, com médias de 59,5 e 57,6 Mm. A concentração de Isobutirato (P=0,003), valerato (P=0,001) e isovalerato (P=0,001), foram diferentes entre os tratamentos do contraste que avaliou a substituição do farelo de soja por NNP. Nos parâmetros sanguíneos, a ureia também foi diferente entre esses tratamentos que substituiu os farelo de soja por NNP, (P=0,006), apresentando média de 34,95 (mg/dL) para os tratamentos PV-U/PV-PRU e 31,41 (mg/dL) para NNP-U-PRU/NNP-PRU. O desempenho (PC final, ganho de peso e ganho por área), dos animais, foi diferente, sendo maior (P=0,04) em animais suplementados com farelo de soja, comparados ao NNP. O comportamento de consumo do suplemento também diferiu entre esses mesmos tratamentos (P<0,01), de forma que os suplementos PV-U e PV-PRU eram consumidos em um menor tempo quando comparado com os tratamentos NNP-UPRU e NNP-PRU. A retirada do farelo de soja do suplemento e sua substituição seja pela junção da ureia convencional mais ureia pós-ruminal, ou somente pela ureia pósruminal compromete o desempenho dos animais. A utilização da ureia convencional ou pós-ruminal apresentam efeitos similares no desempenho e metabolismo animal, assim como os níveis de inclusão da ureia pós-ruminal.

The objective was to evaluate the effects of the use of urea with postruminal absorption, in the supplementation of growing Nellore cattle reared on pasture during the dry-water transition period. For the study, two experiments were developed, in experiment 1, the rumen and blood parameters were evaluated, using 8 rumencannulated Nellore cattle with initial body weight (BW) of 763 ± 44 kg, distributed in a double Latin square 4× 4. In experiment 2, 120 Nellore cattle with initial BW of 380 ± 35 kg were used for performance evaluation, distributed in a randomized block design (blocking factor or initial BW). The same four treatments were evaluated in both experiments: 1: (PV-U) (control) = supplement with 24% crude protein (CP) containing urea as a source of non-protein nitrogen (NNP; 3%) and soybean meal ; Treatment 2: (PV-PRU) = 24% CP supplement containing post-ruminal absorption urea (PRU; 3.6%) and soybean meal; 3: (NNP-U-PRU) = 24% CP supplement containing urea + postruminal absorption urea (U = 3% and PRU = 3.9%), without soybean meal; 4: (NNPPRU) = supplement with 24% CP containing post-ruminal urea (7.5%), without soybean meal. The supplement was offered at 3 g/kg BW per animal, daily, once a day (10 hrs). All animals were kept on Urochloa brizantha cv. Marandu. Statistical analyzes were performed using the SAS PROC MIXED, and the data were evaluated by the following contrasts: C1 = PV-U/PV-PRU vs NNP-U-PRU/NNP-PRU (Soybean meal replacement by NNP); C2 = NNP-U-PRU vs NNP-PRU (low and high post-ruminal urea-PRU level); C3= PV-U vs PV-PRU (conventional urea vs post-immune urea). For ruminal parameters, the pH differed between treatments where soybean meal was replaced by NNP (P=0.003), with an average pH of 6.75, whereas those supplemented with NNP had an average of 6.85. The concentration of ammonia nitrogen was different between treatments with low and high levels of post-ruminal urea (P=0.04), with means of 6.37 and 7.85 mg/dL, and also between treatments that compared the conventional urea versus post-ruminal urea (P=0.03) with means of 6.24 and 7.59 (mg/dL), respectively. The total concentration of short-chain fatty acids was different between treatments in which soybean meal was replaced by NNP, with averages of 68.65 and vi v 58.55 Mm (P=0.00), also being different between the treatments. Treatments that compared low and high post-ruminal urea inclusion levels, with means of 59.5 and 57.6 Mm. The concentration of Isobutyrate (P=0.003), valerate (P=0.001) and isovalerate (P=0.001) were different between the contrast treatments that evaluated the replacement of soybean meal by NNP. In blood parameters, urea was also different between those treatments that replaced soybean meal with NNP, (P=0.006), with an average of 34.95 (mg/dL) for the treatments PV-U/PV-PRU and 31 .41 (mg/dL) for NNP-U-PRU/NNP-PRU. The performance (final BW, weight gain and gain per area) of the animals was different, being higher (P=0.04) in animals supplemented with soybean meal, compared to NNP. Supplement consumption behavior also differed between these same treatments (P<0.01), so that PV-U and PV-PRU supplements were consumed in a shorter time when compared to NNP-U-PRU and NNP treatments. -PRU. The removal of soybean meal from the supplement and its replacement either by the addition of conventional urea plus post-ruminal urea, or only by post-ruminal urea, compromises the performance of the animals. The use of conventional or postruminal urea has similar effects on animal performance and metabolism, as well as post-ruminal urea inclusion levels.

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A temperatura deve ser mantida dentro de uma faixa ótima para a espécie durante a incubação e larvicultura, pois altera o tempo dos eventos ontogenéticos. O objetivo deste trabalho foi determinar a melhor temperatura para a incubação de ovos, sobrevivência e desenvolvimento inicial das larvas de tainha Mugil liza e sardinha-verdadeira Sardinella brasiliensis. A desova da tainha foi realizada após indução hormonal e os ovos na fase de fechamento do blastóporo (~24 h após a desova a 23 °C) foram incubados em 17, 20, 23, 26 e 29 °C. A desova da sardinha-verdadeira foi natural, os ovos foram incubados, após o fechamento do blastóporo (~12 h após a desova a 27 °C), nas temperaturas 17, 20, 23, 26, 29 e 32 °C. A transferência para os béqueres de 2 L foi realizada com aclimatação por banho termostático. Foi avaliado o desenvolvimento larval (200 ovos L-1), as taxas de eclosão e sobrevivência de larvas (100 ovos L-1), após 24 h da eclosão, e razão RNA:DNA. Para a tainha, foi encontrado que a temperatura 23,2 °C é a ideal para a taxa de eclosão e 23,9 °C a melhor taxa de sobrevivência e a temperatura 16,5 °C causa 70% de mortalidade. A razão RNA:DNA teve uma tendência a ser maior na temperatura mais baixa, indicando variação no metabolismo de acordo com a temperatura. O tempo para abertura de boca variou com a temperatura, entre 48 e 72h. Também foi alterado o tempo para a pigmentação do olho (36 a 64 h) e absorção do saco vitelino (42 a 48 h). Para a sardinha, foi encontrado que a melhor temperatura para a eclosão dos ovos é 28 °C e para a sobrevivência é 24,7 °C. A razão RNA:DNA foi mais alta nas temperaturas mais baixas, sendo modulada pela temperatura. Os tempos para o desenvolvimento larval foram alterados conforme a temperatura. A abertura da boca variou de 24 a 51 h e a pigmentação do olho de 21 a 45 h. O comprimento inicial e final da larva não foi afetado pela temperatura. O intervalo ideal de temperatura para a incubação dos ovos e larvicultura até a abertura da boca que foi verificado para as duas espécies estudadas está dentro verificado nas áreas de desovas em ambiente natural.

The temperature must be kept within an optimum range for a species during incubation and larviculture, as it changes the time of ontogenetic events. The objective of this work was to determine the best temperature for egg incubation, survival and initial development of lebranche mullet Mugil liza and Brazilian sardine Sardinella brasiliensis larvae. The mullet spawning was performed after hormonal induction and the eggs in the blastospore closure phase (~ 24 h after spawning at 23 ° C) were incubated at 17, 20, 23, 26 and 29 ° C. The spawning of the true sardine was natural, the eggs were incubated, after the blastospore closure (~ 12 h after spawning at 27 ° C), at temperatures 17, 20, 23, 26, 29 and 32 ° C. The transfer was performed with 2 L becker and acclimatization by thermostatic bath. Larval development (200 L-1 eggs) was evaluated, as hatching and larval survival rates (100 L-1 eggs), after 24 h of hatching, and RNA: DNA ratio. For mullet, it was found that the temperature 23.2 ° C is ideal for hatching rate and 23.9 ° C, the best survival rate and temperature 16.5 ° C, causing 70% mortality. RNA:DNA ratio had a tendency to be higher at the lowest temperature, showing variation in metabolism according to temperature. The mouth opening time varies with temperature, between 48 and 72h. The time for eye pigmentation (36 to 64 h) and absorption of the yolk sac (42 to 48 h) was also changed. For sardines, the best temperature was found for the hatching of eggs at 28 ° C and for survival is 24.7 ° C. The RNA: DNA ratio was higher at lower temperatures, being modulated by temperature. The times for larval development were changed according to the temperature. The opening of the mouth varies from 24 to 51 h and pigmentation of the eye from 21 to 45 h. The initial and final length of the larva was not affected by temperature. The ideal temperature range for incubation of eggs and larviculture until the opening of the mouth and was recorded for two species studied is within the natural environment.

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Antecedentes: A suplementação enzimática beneficia a digestão e a absorção dos ingredientes, e sua adição em farinhas de origem animal pode melhorar a qualidade nutricional das rações e, consequentemente, o desempenho dos frangos. Objetivo: avaliar o efeito da adição de protease sobre a digestibilidade de nutrientes e metabolização da energia de farinhas de origem animal (FOA) em frangos de corte. Métodos: Foram conduzidos dois ensaios utilizando 480 pintos da linhagem Cobb500. Os animais foram distribuídos em delineamento inteiramente casualizado em esquema fatorial 4 x 2 (três farinhas de origem animal (FOA): farinha de vísceras de aves (FVA), farinha de vísceras suínas (FVS) e farinha de carne e ossos bovina (FCOB) e uma dieta referência, com e sem adição de protease, com 6 repetições, com 10 animais por unidade experimental. Ensaio1: feito com aves dos 13 a 20 dias de idade, utilizando o método da coleta total de excretas com substituição da ração referência por 25% das FOA. Ensaio 2: feito com aves dos 21 a 25 dias de idade, para determinação do coeficiente de digestibilidade verdadeira de aminoácidos, utilizando uma DIP, dieta isenta de proteína, e três dietas teste, com adição de 25% dos alimentos testados em substituição ao amido. Em todos os tratamentos, os dados foram submetidos à análise de variância e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de significância. Resultados: A adição da protease incrementou em 15,99% a EMAn da FVS. A inclusão de protease apresentou efeito positivo sobre o CMAMS da FCOB. A inclusão da protease nas FOA proporcionou aumento de 5,7% no CMAEB das FOA testadas. Houve aumento de 5,67% no CDIv para aminoácidos essenciais com a adição da enzima proteolítica nas FOA, exceto para histidina e fenilalanina. Conclusão: Conclui-se que a adição da protease foi eficiente em melhorar a EMAn na FVS, o CMAEB de todas as FOA, o CMAMS da FCOB e na CDIv da maioria dos aminoácidos essenciais e não essenciais.

Background: Enzyme supplementation promote benefits to ingredients digestion and absorption, and its addition in animal origin flour can improve the nutritional quality of the animal food and consequently the chickens performance. Objective: This paper aims to evaluate the effect of protease addition on nutrient digestibility and energy metabolism of animal origin flour (AOF) in broiler chickens. Methods: Two trials were carried out using 480 chicks belonging to Cobb500 lineage. The animals were distributed in a completely randomized design in 4 x 2 factorial scheme, composed by three animal origin flour (AOF): (1) poultry viscera flour (PVF); (2) swine viscera flour (SVF); and (3) bovine meat and bone flour (BMBF), and a reference diet with and without protease addition, with six replicates and ten animals per experimental unit. Experiment 1: It was carried out with chickens from 13 to 20 days old, using the total excreta collection method with substitution of the reference diet by 25% of the AOF. Experiment 2: It was carried out with chickens from 21 to 25 days old to determine the true digestibility coefficient of amino acids, using a protein-free diet (PFD) and three test diets, adding 25% of the tested food as starch substitute. In all treatments, data were submitted to analysis of variance and the means were compared by the Tukey test at 5% significance. Results: Protease addition increased the apparent metabolizable energy corrected for nitrogen (AMEn) of SVF by 15.99%. The protease inclusion showed a positive effect on coefficient of apparent metabolism of dry matter (CAMDM) of BMBF. The protease inclusion in AOF provided an increase of 5.7% in the coefficient of apparent metabolism of gross energy (CAMGE) of the tested AOF. There was an increase of 5.67% in coefficient of true ileal digestibility (CTID) for essential amino acids with the addition of the proteolytic enzyme in AOF, except for histidine and phenylalanine. Conclusion: It was concluded that protease addition was efficient in improving AMEn in SVF, CAMGE of all AOF, CAMDM of BMBF, and in CTID of most essential and non-essential amino acids.

Resumo

Para esta tese foram preparados quatro artigos científicos baseados em estudos de liberação de minerais de alimentos para ruminantes, absorção, metabolismo e equilíbrio de minerais para bovinos de corte, e ingestão de água de bovinos de corte. No primeiro artigo, o objetivo foi quantificar a digestibilidade da matéria seca (MS) e a disponibilidade de cinzas totais (CT) e liberação dos minerais de 12 alimentos concentrados e 12 volumosos comumente adotados em dietas para ruminantes, utilizando métodos in situ e in vitro. Os alimentos foram incubados no rúmen de machos não castrados por 8 deferentes tempos. Foram realizados dois ensaios, um para concentrados e outro para volumosos, com tempo máximo de incubação de 72 e 120 h, respectivamente. O resíduo das amostras incubadas durante 24 h foi tratado com pepsina e ácido clorídrico para simular a digestão no abomaso. As amostras iniciais e residuais após incubação in situ e in vitro foram avaliadas quanto aos teores de MS, CT e minerais. Um modelo assintótico foi adotado para estimar a liberação dos minerais, e as taxas de degradação da MS e CT. Foram avaliadas as correlações entre os teores nos alimentos e a liberação de cada mineral. Clusteres foram formados para agrupar os alimentos, em relação à liberação de CT. Observou-se grande variabilidade entre os alimentos concentrados e volumosos para todos os constituintes analisados. Grande variabilidade foi observada para a degradação ruminal efetiva da CT e para a liberação de cada mineral. Quando os alimentos foram agrupados de acordo com as estimativas , e kd da liberação ruminal de CT, foram identificados 4 grupos. Do grupo "1" para o grupo "4", observou-se um crescimento na fração solúvel e uma redução na fração de liberação lenta e na taxa de liberação. O conteúdo de fibra de detergente neutro apresentou uma correlação negativa com a liberação de mineral no rúmen, enquanto o conteúdo de minerais apresentou correlação positiva. Esses resultados demonstram que a solubilização mineral no trato digestivo não é o fator limitante para a absorção mineral dos alimentos testados. Os objetivos do segundo e terceiro artigos foram medir os efeitos da suplementação mineral sobre ingestão de nutrientes e digestibilidade, desempenho, balanço e exigência de minerais, e concentrações de minerais no corpo de bovinos de corte Nelore alimentados com ou sem cálcio (Ca), fósforo (P ) e fontes suplementares de microminerais (MM) durante as fases de crescimento e terminação. Os animais (n = 51, Nelore, peso corporal inicial = 270,4 ± 36,6 kg, idade = 8 meses) foram atribuídos a um dos três grupos: referência (n = 5), mantença (n = 4) e desempenho (n = 42) . O grupo referência foi abatido no início do experimento para estimar a composição corporal dos demais animais. O grupo mantença foi utilizado para coletar valores de animais com baixos ganho corporal e ingestão de minerais. Os animais do grupo de desempenho foram designados para um dos seis tratamentos: cana-de-açúcar como volumoso e concentrado a base de farelo de soja e casca de soja com (SH100) e sem (SH0) suplementação de Ca, P e MM; Cana-de-açúcar como volumoso e concentrado a base de farelo de soja e milho moído com (SC100) e sem (SC0) suplementação de Ca, P e MM; e silagem de milho como volumoso e concentrado a base de farelo de soja e milho moído com (CS100) e sem (CS0) suplementação de Ca, P e MM. O experimento foi conduzido como um delineamento inteiramente casualizado com um arranjo fatorial 3 × 2, sendo 3 tipos de dietas e presença ou ausência de suplementação inorgânica de minerais. O consumo e digestibilidade de nutrientes, os parâmetros ósseos e séricos relacionados ao metabolismo de Ca e P e as concentrações hepáticas de minerais foram mensurados. Para avaliar a ingestão de cada mineral, a excreção fecal e urinária e a retenção aparente entre os tratamentos, contrastes ortogonais foram adotados. As exigências de mantença e os coeficientes de retenção verdadeiros foram calculados com o auxílio da regressão linear entre o consumo e a retenção de cada mineral. A composição mineral do corpo e as exigências para ganho de peso foram avaliados, utilizando modelos não lineares entre o conteúdo corporal e o consumo de cada mineral. Os consumos, digestibilidade e desempenho de nutrientes não foram afetados pelo fator mineral (P > 0,10). Os consumos de Ca, P, S, Cu, Zn, Mn, Co e Fe foram reduzidas na ausência de suplementação de Ca, P e MM (P < 0,05). A excreção fecal de Ca, Cu, Zn, Mn e Co também foi reduzida em tratamentos sem suplementação (P < 0,01). Em geral, os coeficientes de absorção e retenção aparentes foram reduzidos quando os minerais não foram fornecidos (P < 0,05). A resistência à ruptura dos ossos da costela e a densitometria óssea foram reduzidas (P < 0,04) na ausência de suplementação. Os parâmetros do metatarso não foram afetados (P > 0,10). O conteúdo de Cu no fígado foi reduzido (P < 0,01) em dietas sem suplementação. As exigências totais dos minerais foram menores para P, Cu e Zn e maiores para o Fe quando comparados às recomendações previamente publicadas. Portanto, a ausência de suplementação mineral não influencia o consumo e o desempenho de bovinos Nelore não castrados em confinamento. No entanto, esta ausência pode influenciar parâmetros séricos, hepáticos e ósseos de acordo com o tipo de dieta. Este estudo forneceu informações úteis sobre as exigências minerais e estratégias de fornecimento adequado de minerais para bovinos Nelore em condições tropicais. No quarto artigo, o objetivo foi validar seis equações já publicadas para predição da ingestão de água (IA) para bovinos de corte usando dados coletados em quatro experimentos realizados no Norte do Colorado (n = 1 experimento, novilhos de raça Angus) ou no Sudeste do Brasil (n = 3 experimentos, bovinos de corte Nelore). Características relacionadas ao desempenho animal, à composição da dieta e aos dados ambientais foram coletados em todos os experimentos. A predição de IA usando as equações publicadas atualmente foi testada através da regressão entre os valores previstos e mensurados. Todas as equações testadas diferiram dos dados observados. Vários fatores podem ajudar a explicar o porquê das equações publicadas não predizerem acuradamente a IA. Um dos fatores é que as equações testadas foram desenvolvidas em ambientes de clima temperado usando predominantemente animais Bos taurus taurus. A partir dos dados coletados no presente estudo, foram geradas novas equações baseadas no peso corporal metabólico, consumo de MS, umidade relativa e índice de temperatura e umidade para bovinos Nelore confinados no Sudeste brasileiro e baseadas no peso corporal metabólico, consumo de MS, temperatura máxima diária e nível de inclusão de concentrado na dieta para bovinos mestiços Angus no Norte do Colorado.

For the thesis composition were prepared four scientific manuscripts based on studies with mineral release, absorption, metabolism and balance, and water intake of beef cattle. In the first manuscript the objective was to quantify the dry matter (DM) digestibility and total ash (TA) and mineral release from 12 concentrate and 12 forage feedstuffs commonly fed to cattle using in situ and in vitro methods. The concentrate and forage feedstuffs were incubated in the rumen of ruminally cannulated beef bulls at 8 different time points. Two different trials were conducted for concentrates and forages, with maximum incubation time of 72 and 120 h, respectively. The residue from samples incubated for 24 h were treated with pepsin and HCl to simulate abomasum digestion. The initial and residual samples after in situ and in vitro incubations were measured. An asymptotic model was adopted for estimating solubility of minerals, degradation rate of DM, and TA. Correlations between feedstuff contents and mineral release were evaluated. Cluster analysis was performed to group feedstuffs, in relation to TA release. Large variability was observed between concentrate and forage feedstuffs for all analyzed constituents. Large variability was observed for the effective ruminal degradation of TA, and individual mineral release. When feedstuffs were clustered according with the , and kd estimates of TA ruminal release, 4 groups were identified. From group 1 to group 4, was observed an increase in the soluble fraction, and a reduction in both moderate releasable fraction and release rate. Neutral detergent fiber content has a negative correlation with mineral release in the rumen, while mineral content has positive correlation. These results demonstrate that mineral solubilization in digestive tract is not the limiting factor to mineral absorption from the feedstuffs tested. The objectives of the second and third manuscripts were to measure the effects of mineral supplementation on nutrient intake and digestibility, performance, mineral balance and requirements and mineral concentrations in the body of Nellore beef cattle fed with and without calcium (Ca), phosphorus (P) and micromineral (MM) supplemental sources during the growing and finishing phases. Nellore cattle (n = 51, initial body weight = 270.4 ± 36.6 kg, age = 8 months) were assigned to one of three groups: reference (n = 5), maintenance (n = 4), and performance (n = 42). Reference group was slaughtered at the beginning of the experiment to measure initial mineral status. The maintenance group was used to collect values of animals at low gain and reduced mineral intake. Animals of performance group were assigned to one of six treatments: sugarcane as a roughage source and a soybean meal and soybean hull-based concentrate with (SH100) and without (SH0) Ca, P and MM supplementation; sugarcane as the roughage source and a soybean meal and ground corn-based concentrate with (SC100) and without (SC0) Ca, P and MM supplementation; and corn silage as the roughage source with a soybean meal and corn-based concentrate with (CS100) and without (CS0) Ca, P and MM supplementation. The experiment was conducted as a completely randomized design with a 3 × 2 factorial arrangement of treatments. Nutrient intake and digestibility, bone and serum parameters related to Ca and P metabolism, and liver mineral concentrations were measured. Orthogonal contrasts were adopted to compare mineral intake, fecal and urinary excretion and apparent retention among treatments. Maintenance requirements and true retention coefficients were generated with the aid of linear regression between mineral intake and mineral retention. Mineral composition of the body and gain requirements were assessed using non-linear regression between body mineral content and mineral intake. Nutrient intake, digestibility and performance were not affected by mineral factor (P > 0.10). Intakes of Ca, P, S, Cu, Zn, Mn, Co, and Fe were reduced in the absence of Ca, P, and MM supplementation (P < 0.05). Fecal excretion of Ca, Cu, Zn, Mn, and Co were also reduced in treatments without supplementation (P < 0.01). Overall, excretion and apparent absorption and retention coefficients were reduced when minerals were not supplied (P < 0.05). Rib bone breaking strength and densitometry were reduced (P < 0.04) in absence of supplementation. Metatarsus parameters were not affected (P > 0.10). Liver Cu content was reduced (P < 0.01) in diets without supplementation. Dietary mineral requirements were lower for P, Cu, and Zn and greater for Fe when compared to previously published recommendations.Therefore, absence of mineral supplementation does not influence intake and performance of Nellore beef cattle. However, this absence may influence serum, liver and bone parameters according to dietary type. This study provides useful information about mineral requirements and mineral supplementation to obtain adequate dietary mineral supply of Nellore cattle in tropical conditions. In the fourth manuscript, the objective was to validate six current water intake (WI) equations for beef cattle using water intake data from four experiments conducted in North America (n = 1 experiment; crossbred Angus beef steers) and Brazil (n = 3 experiments; Nellore beef cattle). Animal performance, diet composition, and environmental data were collected for all experiments. The prediction of WI using the current published WI equations was tested though the regression between predicted and measured WI values. All tested equations differed from the measured WI data from the four experiments. Several factors can help explain why the published equations did not predict the WI obtained from the three experiments, including that the tested equations were developed in temperate climates using predominantly Bos taurus taurus. From the current data, was generated new WI equations based on metabolic BW, DMI, humidity and temperature-humidity index for Nellore cattle in Brazil and metabolic BW, DMI, maximum daily temperature, and dietary concentrate level for Angus crossbred cattle in North America.

Resumo

O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito dos grupos genéticos e níveis dietéticos de proteína bruta (PB) sobre o consumo, os locais de digestão dos constituintes da dieta, a excreção dos compostos nitrogenados e a absorção de aminoácidos no intestino delgado de bovinos de corte. Objetivou-se também, quantificar a síntese de PB microbiana utilizando 15N e BP e avaliar a digestibilidade intestinal verdadeira PB total e da PB microbiana em bovinos de corte alimentados com três níveis dietéticos de PB. Oito bovinos, sendo quatro Nelore (com peso corporal (PC) médio inicial de 241,3±43Kg e 14 meses de idade) e quatro cruzados Angus x Nelore (com PC médio inicial 263,4±47 Kg e 14 meses de idade), canulados no rúmen e no íleo, foram distribuídos em dois quadrados latinos 4 x 4 sendo um para cada grupo genético. O experimento foi conduzido em quatro períodos de 17 dias, sendo 10 dias de adaptação e sete dias de amostragens. As quatro dietas foram constituídas de níveis crescentes de PB: 10; 12 ou 14% oferecidas à vontade, e dieta de consumo restrito com 12% PB. As dietas foram constituídas de 50% de silagem de milho e 50% de concentrado com base na MS. Uma coleta total de fezes e urina de cada animal foi realizada durante três dias consecutivos. Posteriormente, oito coletas de digesta omasal e ileal foram realizadas em intervalos de nove horas durante três dias. Para calcular os fluxos da digesta omasal e ileal, utilizou-se o sistema de indicador duplo (Co-EDTA e FDNi) e único (FDNi), respectivamente. Para quantificar a síntese microbiana, foi realizada uma infusão contínua de 7,03 g de sulfato de amônio enriquecido com 10% de átomos de 15N no rúmen de cada animal, em todos os períodos experimentais. As quantidades de aminoácidos (AA) absorvidas foram calculadas pela diferença do fluxo dos AA presentes no omaso e no íleo. O consumo de MS (g/Kg de PC) não foi afetado (P > 0,05) pelos grupos genéticos e níveis dietéticos de PB. De maneira geral, as digestibilidades aparentes parciais e totais dos nutrientes não diferiram (P > 0,05) entre grupos genéticos. As digestibilidades aparentes ruminais (%) da MS, MO, EE e CNF não foram afetadas (P > 0,05) pelos níveis dietéticos de PB. Os consumos e as digestibilidade totais da PB aumentaram linearmente (P < 0,05) com os níveis dietéticos de PB. As equações obtidas entre as excreções de N total (ENT), urinário (ENU) e fecal (ENF) com o N ingerido (NI) e o consumo de NDT foram: ENU = 23,213 + 0,716 NI 16,390 NDT, r2 = 0,75; ENF = 0,438 + 0,092 NI + 4,631 NDT, r2 = 0,84 e ENT = 23,653 + 0,809 NI 11,756 NDT, r2 = 0,90. Houve efeito linear positivo (P < 0,05) sobre as quantidades dos AA absorvidos no intestino delgado em resposta aos níveis crescentes de PB. As digestibilidades verdadeiras estimadas dos AA essenciais, não essenciais e totais foram 77; 74,4 e 75,5%, respectivamente. As relações 15N:14N nas bactérias associadas à fase líquida (BAL) e à fase sólida (BAP) isoladas no omaso foram similares (P > 0,05). Houve efeito linear negativo (P < 0,05) dos níveis dietéticos de PB sobre a relação 15N:14N das bactérias isoladas no omaso. A síntese de PB microbiana foi maior (P < 0,05) para animais cruzados em relação ao Nelore. Houve efeito linear positivo (P < 0,05) para a síntese de PB microbiana em resposta aos níveis crescentes de PB. Não houve diferença (P > 0,05) entre 15N e bases purinas (BP) para a eficiência microbiana. A digestibilidade da PB microbiana estimada com BP e 15N foi próxima ao valor de 80% reportado pelo NRC e BR Corte. A digestibilidade verdadeira da PB total estimada foi de 75,4%. Os resultados indicam que os aumentos dos níveis dietéticos de PB podem potencialmente aumentar as excreções de N pelos bovinos de corte e que as digestibilidades verdadeiras dos aminoácidos são condizentes com o valor adotado pelo NRC e BR Corte. Conclui-se também que, as BP podem ser utilizadas como indicador microbiano alternativo ao 15N e que a digestibilidade intestinal da PB microbiana no intestino delgado é de aproximadamente 80% em zebuínos.

The objective of this study was to evaluate the effect of genetic groups and dietary crude levels (CP) on intake, the site of dietary constituents digestion, nitrogen excretion and absorption of amino acids from the small intestine of beef cattle. Additionally, the objective was to quantify the microbial protein synthesis using 15N and purine bases (BP) and to evaluate the true intestinal digestibility of total protein and microbial protein of beef cattle fed three dietary CP levels. Eight animals, being four Nellore (241 ± 43 kg of initial BW; 14 months) and four crossed Angus x Nellore (263 ± 47 kg of initial BW; 14 months), with ruminal and ileum cannulas were distributed into two 4 x 4 Latin squares, one for each genetic group. Four experimental periods lasting 17 d each were completed with 10 d for adaptation and 7 d for sampling. The diets had increasing levels of CP: 10, 12, or 14%, offered ad libitum, and a 12% CP fed at maintenance level. The diets contained 50% corn silage and 40% concentrate (on a dry matter (DM) basis). Total fecal and urine collection of each animal was performed for three consecutive days. A total of eight digesta samples were collected from the omasum and ileum at 9h intervals over a 3 d period. The double (Co-EDTA and NDFi) and single marker systems (NDFi) were used to calculate the digesta flow of the omasum and ileum, respectively. Continuous infusion of 7.03 g of ammonium sulfate enriched with 10 atom% 15N was included in the rumen for each animal in all experimental periods. The quantities of absorbed amino acids (AA) were calculated by AA flow difference in the omasum and ileum. The DM intake (g.kg-1) was not affected (P > 0.05) by genetic groups or dietary CP levels. In general, the partial and total apparent digestibility of nutrients did not differ (P > 0.05) between genetic groups. The apparent ruminal digestibility (%) of DM, OM, EE, and NFC were not affected (P > 0.05) by dietary CP levels. The intake and total digestibility of CP increased linearly (P < 0.05) with dietary CP levels. The equations between the N urinary excretion (NUE), N fecal excretion (NFE) and total N excretion (TNE) with N intake (NI) and the intake of TDN were: NUE = 23.213 + 0.716 NI - 16.390 NDT; NFE = 0.438 + 0.092 + 4.631 NI NDT and TNE = 23.653 + 0.809 NI - 11,756 NDT. There was a positive linear effect (P < 0.05) on quantities of absorbed AA from small intestine in response to increasing CP level. The true digestibility of essential AA, nonessential AA and total AA were 77, 74.4 and 75.5%; respectively. The 15N:14N ratio was similar (P > 0.05) between liquid - (LAB) and solid-associated (SAB) bacteria isolated in the omasum. There was a negative linear effect (P < 0.05) of dietary CP levels on the 15N: 14N ratio in isolated bacteria in the omasum. The crossbred animals had a greater microbial protein synthesis (P < 0.05) than Nellore. There was a positive linear effect (P < 0.05) of microbial protein synthesis in response to increasing CP levels. There was no difference (P > 0.05) between 15N and purine bases (BP) for microbial efficiency. The digestibility of microbial CP estimated by BP and 15N was close to the value of 80% reported by the NRC and BR Corte. The total true digestibility of CP estimated was 75.4%. The results indicate that increasing dietary CP levels may potentially increase N excretion by beef cattle and that the true amino acid digestibility values are consistent with the values adopted by the NRC and BR Corte. Additionally, we conclude that BP can be used as an alternative microbial indicator to 15N and intestinal digestibility of microbial protein from small intestine is about 80% in Zebu cattle.

Resumo

Ten crossbred barrows weighting 20kg were allocated in five groups fed and on diets consisted of different total phosphorus (P) levels: 0.30 percent, 0.40 percent, 0.51 percent, 0.65 percent, and 0.73 percent. The animals were intravenously injected 7.4MBq of radioactive P (32P) and after seven days they were slaughtered for further analysis. The evaluated parameters were intake, excretion, specific activities, and flow of P in compartments (1-gut, 2-blood, 3-bone, and 4-soft tissue). Besides fecal losses, the kidneys played an import role in P regulation. The flows of P from tissue and gut to the blood were affected by P intake.

Foram usados 10 leitões machos castrados com média de peso vivo de 20kg, alojados em gaiolas metabólicas. O delineamento experimental foi inteiramente ao acaso e os tratamentos consistiram em níveis de fósforo (P) nas dietas: 0,30; 0,40; 0,51; 0,65 e 0,73 por cento. Os animais receberam injeção de 7,4 MBq de radiofósforo (32P) e após sete dias foram abatidos para posteriores análises. As variáveis avaliadas foram: ingestão, excreção, atividades específicas e fluxo de P nos compartimentos (1-trato digestivo, 2-corrente sanguínea, 3-tecidos moles e 4-ossos). Além das excreções fecais, os rins também representaram uma rota importante para a excreção do P. O fluxo de P dos tecidos e trato digestivo para o sangue não foi afetado pelo consumo de P. O modelo proposto foi eficiente para avaliar o fluxo de P.

Resumo

Esta dissertação foi preparada com base em dois experimentos. No primeiro experimento objetivou-se avaliar a acurácia de dois métodos utilizados na quantificação da concentração de nitrogênio amoniacal (N-NH3) em fluido ruminal: reação colorimétrica catalizada por indofenol (RCI) e destilação de Kjeldahl (DK). Cinco soluções-padrão contendo ácidos graxos voláteis, proteína verdadeira e concentrações conhecidas de amônia (0, 3, 6, 12, e 24 mg/dL de N-NH3) foram utilizadas para simular o fluido ruminal. Diferentes razões (10:1; 7,5: 1; 5:1; 2,5:1; 1:1; 1:2,5; 1:5; 1:7,5 e 1:10) entre a solução de hidróxido de potássio (KOH, 2 mol/L) e as soluções-padrão foram avaliadas pela DK. A acurácia de cada método foi avaliada através do ajustamento de modelo de regressão linear simples das concentrações estimadas de N-NH3 sobre as concentrações de N-NH3 nas soluções-padrão. Observou-se no método de DK que houve liberação de N-NH3 em função da deaminação de proteína verdadeira do meio (P<0,05), além de incompleta recuperação de N-NH3 (P<0,05), exceto para as razões de 7,5:1 e 5:1 de solução de KOH e soluções-padrão (P>0,05). As estimativas da concentração de N-NH3 obtidas pelo método de RCI foram acuradas (P>0.05). Após a avaliação da acurácia, noventa e três amostras de fluido ruminal foram avaliadas pelos métodos de RCI e DK (utilizando-se a razão 5:1 de solução de KOH e amostra de fluido ruminal), assumindo-se que as estimativas obtidas pelo método de RCI seriam acuradas. Observou-se que as concentrações de N-NH3 obtidas pelos dois métodos foram diferentes (P<0,05), mas fortemente correlacionadas (r = 0,9701). Assim, concluiu-se que as estimativas obtidas pela destilação de Kjeldahl utilizando-se a razão de 5:1 de solução de KOH e amostra de fluido ruminal podem ser ajustadas para que os vieses sejam evitados. Modelo para ajustar as concentrações de N-NH3 foi sugerido neste trabalho. No segundo experimento objetivou-se avaliar combinações entre técnicas de digestão ácida e quantificação espectrofotométrica para estimar a concentração de cromo em amostras de fezes bovinas. Foram avaliadas técnicas de digestão baseadas na utilização de ácidos nítrico e perclórico, ácidos sulfúrico e perclórico e ácido fosfórico. A quantificação da concentração de cromo nas soluções foi realizada por colorimetria e por espectrofotometria de absorção atômica (EAA). Na quantificação por EAA, foi avaliada a adição de cloreto de cálcio como agente de liberação. Amostras padrões contendo quantidades conhecidas de cromo foram produzidas (0, 2, 4, 6, 8 e 10 g de cromo por kg de fezes) utilizando-se fezes bovinas obtidas de três animais diferentes, para avaliar a acurácia das diferentes técnicas. A acurácia foi avaliada pelo ajustamento de modelo de regressão linear simples dos valores estimados sobre os valores reais de cromo nas amostras-padrão. Independentemente da técnica de digestão ácida, as estimativas da concentração de cromo nas amostras-padrão obtidas por colorimetria não foram acuradas (P<0,05). Considerando a quantificação de cromo por EAA, as técnicas de digestões baseadas nos ácidos nítrico e perclórico e ácidos sulfurico e perclórico promoveram completa recuperação de cromo (P>0,05). A utilização da técnica de digestão em ácido fosfórico promoveu recuperação incompleta do cromo fecal (P<0,05). Posteriormente, as técnicas de digestão em ácidos nitrico e perclórico e em ácidos sulfúrico e perclórico, ambas avaliadas por EAA, foram comparadas utilizando-se 84 amostras de fezes bovinas. Os resultados indicam que aquelas combinações de técnicas promovem resultados similares (P>0,05) da concentração fecal de cromo

This dissertation was based on two different experiments. The first one was conducted to evaluate the accuracy of two different methods in measuring the ammonia nitrogen (N-NH3) concentration in rumen fluid: a catalyzed indophenol colorimetric reaction (CICR) and the Kjeldahl distillation (KD). Five buffered standard solutions containing volatile fatty acids, true protein, and known ammonia concentrations (0, 3, 6, 12, and 24 N-NH3 mg/dL) were used to simulate rumen fluid. Different ratios (10:1, 7.5:1, 5:1, 2.5:1, 1:1, 1:2.5, 1:5, 1:7.5, and 1:10) of a potassium hydroxide solution (KOH, 2 mol/L) to standard solutions were evaluated by the KD method. The accuracy of each method was evaluated by adjusting a simple linear regression model of the estimated N-NH3 concentrations on the N-NH3 concentrations in the standard solutions. When the KD method was used, N-NH3 was observed to be released from the deamination of true protein (P<0.05), and an incomplete recovery of N-NH3 was observed (P<0.05), except for 7.5:1 and 5:1 ratios of KOH solution to standard solutions (P>0.05). The estimates of the N-NH3 concentration obtained by the CICR method were found to be accurate (P>0.05). After the accuracy evaluation, ninety-three samples of rumen fluid were evaluated by the CICR and KD methods (using the 5:1 ratio of KOH solution to rumen fluid sample), assuming that the CICR estimates would be accurate. The N-NH3 concentrations obtained by the two methods were different (P<0.05) but strongly correlated (r = 0.9701). Thus, it was conclude that the estimates obtained by the Kjeldahl distillation using a 5:1 ratio of KOH solution to rumen fluid sample can be adjusted to avoid biases. Furthermore, a model to adjust the N-NH3 concentrations is suggested. In the second experiment, the objective was to evaluate combinations between acid digestion techniques and spectrophotometric quantification to measure chromium concentration in cattle feces. It was evaluated digestion techniques based on the use of nitric and perchloric acids, sulfuric and perchloric acids, and phosphoric acid. The chromium quantification in the solutions was performed by colorimetry and by atomic absorption spectrophotometry (AAS). When AAS was used, it was also evaluated the addition of calcium chloride to the solutions as releasing agent. Several standard samples containing known chromium contents were produced (0, 2, 4, 6, 8 and 10 g of chromium per kg of feces) using cattle feces obtained from three different animals to evaluate the accuracy of the different combinations of techniques. The accuracy was evaluated by adjusting a simple linear regression model of the estimated values on the actual values of chromium in the standard samples. Independently on digestion technique, the estimates of chromium contents in the standards samples obtained by colorimetry were not accurate (P<0.05). Considering the AAS quantification, the digestion techniques based on nitric and perchloric acids and based on sulfuric and perchloric acids provided complete chromium recovery (P>0.05). The use of digestion technique in phosphoric acid provided incomplete recovery of the fecal chromium (P<0.05). Subsequently, the digestion techniques in nitric and perchloric acids and digestion in sulfuric and perchloric acids, both evaluated by AAS, were compared using 84 cattle feces samples. The results indicate that these techniques provide similar contents (P>0.05) of fecal chromium

Resumo

Determinaram-se as perdas endógenas mínimas, a exigência de fósforo e a absorçäo real do fósforo do fosfato bicálcico em suínos no final da fase de crescimento, pela técnica da diluiçäo isotópica. Foram utilizados 20 leitöes híbridos comerciais, com peso de 48kg, distribuídos em delineamento experimental de blocos ao acaso com cinco tratamentos, constituídos de dietas com diferentes níveis de P total (0,33, 0,36, 0,47, 0,54 e 0,61 por cento), com quatro repetiçöes. A excreçäo fecal e urinária, a absorçäo e retençäo de P foram influenciadas pelos níveis de consumo desse mineral. As perdas endógenas fecais näo foram influenciadas pelos níveis de P consumido, indicando que os níveis ingeridos foram insuficientes para atender às exigências de P dos leitöes. A biodisponibilidade do fósforo bicálcico foi de 74,7 por cento e a exigência de mantença de 10,02mgP/kg p.v./dia