Resumo

Plant disease administration is difficult due to the nature of phytopathogens. Biological control is a safe method to avoid the problems related to fungal diseases affecting crop productivity and some human pathogenic bacteria. For that, the antimicrobial activity of the seaweed Sargassum muticum methanol and water extracts were investigated against human bacterial pathogens and fungal plant pathogens. By using 70 percent methanol, the seaweed powder was extracted, feeding additives assay, ultrastructure (TEM). Results revealed significant inhibition of S. muticum methanol extract against Salmonella typhi (25.66 mm), Escherichia coli (24.33 mm), Staphylococcus aureus (22.33 mm) and Bacillus subtilis. (19.66 mm), some fungal phytopathogens significantly inhibited Fusarium moniliforme (30.33mm), Pythium ultimum (26.33 mm), Aspergillus flavus (24.36mm), and Macrophomina phaseolina (22.66mm). Phytochemical investigation of S. muticum extract showed the presence of phenolic and flavonoid compounds. Results suggested that there is an appreciable level of antioxidant potential in S. muticum (79.86%) DPPH scavenging activity. Ultrastructural studies of Fusarium moniliforme hypha grown on a medium containing S. muticum extract at concentration 300mg/ml showed a thickening cell wall, disintegration of cytoplasm, large lipid bodies and vacuoles. In conclusion, our study revealed The antibacterial activity of S. muticum extract significantly against some Gram positive, Gram negative bacteria and antifungal activity against some phytopathogenic and some mycotoxin producer fungi. Flavonoids, phenolic play an important role as antioxidants and antimicrobial properties. Such study revealed that S. muticum methanol extract could be used as ecofriendly biocontrol for phytopathogenic fungi and feeding additives to protect livestock products.

A administração de doenças de plantas é difícil devido à natureza dos fitopatógenos. O controle biológico é um método seguro para evitar problemas relacionados a doenças fúngicas que afetam a produtividade das culturas e algumas bactérias patogênicas ao homem. Para isso, a atividade antimicrobiana da alga marinha Sargassum muticum metanol e de extratos aquosos foi investigada contra patógenos bacterianos humanos e fitopatógenos fúngicos. Usando metanol a 70%, o pó de algas marinhas foi extraído do ensaio de aditivos alimentares, a ultraestrutura (TEM). Os resultados revelaram inibição significativa do extrato metanólico de S. muticum contra Salmonella typhi (25,66 mm), Escherichia coli (24,33 mm), Staphylococcus aureus (22,33 mm) e Bacillus subtilis (19,66 mm). Alguns fitopatógenos fúngicos inibiram significativamente Fusarium moniliforme (30,33 mm), Pythium ultimum (26,33 mm), Aspergillus flavus (24,36 mm) e Macrophomina phaseolina (22,66 mm). A investigação fitoquímica do extrato de S. muticum mostrou a presença de compostos fenólicos e flavonoides. Os resultados sugeriram que há um nível apreciável de potencial antioxidante na atividade de eliminação de DPPH de S. muticum (79,86%). Estudos ultraestruturais da hifa de Fusarium moniliforme cultivada em meio contendo extrato de S. muticum na concentração de 300 mg/ml mostraram espessamento da parede celular, desintegração do citoplasma, grandes corpos lipídicos e vacúolos. Em conclusão, nosso estudo revelou a atividade antibacteriana do extrato de S. muticum significativamente contra algumas bactérias Gram-positivas, Gram-negativas e atividade antifúngica contra alguns fungos fitopatogênicos e alguns produtores de micotoxinas. Flavonoides e fenólicos desempenham papel importante como antioxidantes e propriedades antimicrobianas. Tal estudo revelou que o extrato metanólico de S. muticum pode ser usado como biocontrole ecologicamente correto para fungos fitopatogênicos e aditivos alimentares para proteger os produtos pecuários.

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Three hundred hatching eggs from two layer breeder flocks (Hy-Line Brown and hy-Line W-36; 150 each) were obtained at three different periods of laying cycle (early, middle and late stages). The hatching eggs were randomly taken to assess the impact of chicken strain, age, and hatching time on some eggshell measurements and structures. Results indicate that egg weight, shell percentage and shell thickness were significantly affected by strain, breeder age, and incubation time. Increasing rate of calcium absorption and utilization by the embryos during the embryonic stage clearly reflects the decrease occurred in eggshell strength. The differences of eggshell breaking strength during incubation time periods were 0.41 and 0.55 kg/cm2, the differences due to the incubation time may be due to the higher demand for calcium utilization in the late incubation period (18 days), observed on the10th day of incubation. Brown eggs recorded significant higher calcium percentage in eggshell compared to the white ones. The brown breeder hens recorded significant higher total pores per egg compared to the white egg. Concerning eggshell ultrastructure, total thickness of the brown eggshell was significantly higher than those of the white eggshell by about 3.7%. All parameters, except for total thickness, were significantly affected by the interaction between strain and breeder age. Finally, we conclude that some traits including egg weight, shell percentage, shell thickness, calcium percentages in eggshell, and total pores per egg were significantly affected by strain, breeder age, and incubation time. Eggshell ultrastructure of brown egg was better compared to the white ones.(AU)

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As vesículas extracelulares (VEs) são nanoparticulas circundadas por uma bicamada lipídica, que transportam lipídios, proteínas, ácidos nucleicos e metabólitos, e podem ser secretadas por diferentes tipos celulares. Os adipócitos são capazes de sintetizar e secretar VEs pequenas, que, uma vez na circulação, podem alcançar diferentes sistemas orgânicos, permitindo a comunicação intercelular. O objetivo deste estudo foi avaliar o diâmetro e a concentração de VEs pequenas no soro de cães com sobrepeso e obesidade, antes e após a perda de peso. Para isso, foram recrutados 19 cães, sendo nove fêmeas e 10 machos castrados, em bom estado geral e com escore de condição corporal (ECC) ≥ 7. A avaliação inicial dos cães incluiu exame físico e testes laboratoriais. Após avaliação inicial, os cães foram alimentados com uma dieta hipocalórica comercial por quatro meses, e, após esse período, os testes laboratoriais foram reavaliados. As VEs pequenas foram isoladas a partir do sangue total, por meio de centrifugações e ultracentrifugações seriadas, e o equipamento NanoSight foi utilizado para a determinação do diâmetro e da concentração das VEs pequenas presentes no soro antes e após a dieta. Houve uma redução de 10% do peso corporal e de 16,5% do ECC dos cães, além da diminuição de 9% do diâmetro e de 31% da concentração das VEs pequenas, após os quatro meses de alimentação com a dieta hipocalórica. Não foram observadas diferenças em relação às análises bioquímicas e entre os resultados de fêmeas e machos, antes e após a perda de peso. Em conclusão, a redução do peso corporal e do acúmulo de gordura foi capaz de modificar as características (diâmetro e concentração) das VEs pequenas, que foram isoladas a partir do soro de cães com sobrepeso e obesidade.

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Cats are susceptible to feline panleukopenia virus (FPV) and canine parvovirus type 2 (CPV-2). Therefore, coinfection and superinfection with multiple parvovirus strains may occur, resulting in high heterogeneity and recombination. Considering the importance of cats as a potential source of genetic diversity for parvoviruses, we investigated the frequency of parvovirus infection in cats using their blood and fecal samples and performed molecular characterization of parvovirus strains circulating in cat populations. Accordingly, the fecal and blood samples of 60 cats with gastroenteritis symptoms were collected from Turkey's Burdur, Isparta, and Izmit provinces. Of these 15 fecal samples tested as parvovirus-positive by PCR, 14 were confirmed to have been infected with true FPV strains by sequencing analysis. Through the phylogeny analysis, those were located in the FPV cluster, closely related to CPV-2, and one was discriminated in the CPV-2b cluster. Additionally, sequence analysis of the VP2 gene of CPV and FPV revealed that the FPV strains detected in Turkey and the vaccine strains were highly related to each other, with a nucleotide identity of 97.7- 100%. Furthermore, 13 variable positions were detected in VP2 of the field and reference FPV strains. Three synonymous mutations were determined in the VP2 gene. Some amino acid mutations in the VP2 protein-affected sites were considered responsible for the virus's biological and antigenic properties. The partial sequence analysis of the VP2 gene revealed that four FPV strains detected in Turkey have a single nucleotide change from T to G at the amino acid position 384 between the nucleotides 3939-3941, which was reported for the first time. Therefore, these four isolates formed a different branch in the phylogenetic tree. The results suggest that both FPV and CPV-2b strains are circulating in domestic cats in Turkey and cats should be considered as potential sources of new parvovirus variants for cats, dogs and other animals.

Os gatos são suscetíveis ao vírus da panleucopenia felina (FPV) e ao parvovírus canino tipo 2 (CPV-2). Portanto, coinfecção e superinfecção com múltiplas cepas de parvovírus podem ocorrer, resultando em alta heterogeneidade e recombinação. Considerando a importância dos gatos como uma fonte potencial de diversidade genética para parvovírus, investigamos a frequência da infecção por parvovírus em gatos usando suas amostras de sangue e fezes e realizamos a caracterização molecular de cepas de parvovírus circulantes nas populações de gatos. Amostras fecais e de sangue de 60 gatos com sinais de gastroenterite foram coletadas nas províncias de Burdur, Isparta e Izmit, na Turquia. Destas, 15 amostras fecais testaram positivas para parvovírus por PCR e 14 foram confirmadas como infectadas com cepas verdadeiras de FPV por análise de sequenciamento. Através da análise filogenética, aqueles foram localizados no agrupamento FPV que está intimamente relacionado com o CPV-2, e um foi discriminado no agrupamento CPV-2b. Além disso, a análise da sequência do gene VP2 de CPV e FPV revelou que as cepas de FPV detectadas na Turquia e as cepas vacinais eram altamente relacionadas entre si, com uma identidade de nucleotídeos de 97,7-100%. Além disso, 13 posições variáveis foram detectadas em VP2 das cepas de campo e FPV de referência. Três mutações sinônimas foram determinadas no gene VP2. Algumas mutações de aminoácidos nos locais afetados pela proteína VP2 foram consideradas responsáveis pelas propriedades biológicas e antigênicas do vírus. A análise da sequência parcial do gene VP2 revelou que quatro cepas de FPV detectadas na Turquia têm uma única mudança de nucleotídeo de T para G na posição do aminoácido 384 entre os nucleotídeos 3939-3941, o que foi relatado pela primeira vez. Portanto, esses quatro isolados formaram um ramo diferente na árvore filogenética. Os resultados sugerem que ambas as cepas FPV e CPV-2b estão circulando em gatos domésticos na Turquia e os gatos devem ser considerados como fontes potenciais de novas variantes de parvovírus para gatos, cães e outros animais.

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Leptospirosis is an important zoonosis. The World Health Organization recommends the use of microscopic soroagglutination in the diagnosis of the disease. However, this is a time-consuming technique that offers a risk of contamination to the performer and requires a trained professional. The indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test presents less risk, is faster, and has lower cost benefit for high sampling. In view of the advantages of using the test, and the importance of the development of techniques that facilitate and make the diagnosis more efficient, the objective of this study was to standardize an indirect ELISA technique using an immunogenic protein of Leptospira spp. for the diagnosis of canine leptospirosis. The standardized test obtained a cut off of 0.314, 76% of sensitivity, 34% of specificity, 53.52% of positive predictive value, 58.62 of negative predictive value, and 55% of accuracy. The protein extraction technique was efficient for antigen production, and the standardized test can be used in the diagnosis of canine leptospirosis.

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The present work aims to evaluate anticancer performance of Cassia alata methanolic leaf extracts (CMLE) in ethyl carbamate-stimulated lung adenocarcinoma (LAD) in differentiation to the function of Cisplatin (CIPL). Rats were divided into four groups: (1) control (CONT), (2) lung-adenocarcinoma (LAD) injected intra-peritoneally with 1g/kg ethyl carbamate once weekly for a month, (3) LAD+CMLE administered 500 mg/kg CMLE orally for the last two months of the experiment, and (4) LAD+CIPL treated group, injected 2.5 mg/kg Cisplatin intraperitoneally once weekly for the last two months of the experiment. Light and electron microscopic examinations revealed adenocarcinoma development in terminal bronchiole besides some histopathological changes in the LAD group such as atypical, exaggerated collagen fibers, increment of mucinous content, and increasing of PCNA positive immunoreactivity whereas electron microscopy investigation exposed that papillary adenocarcinoma originated from Clara cells in the LAD group. The LAD+CMLE treated group showed no tumor masses and nearly all with normal lung histology. It also recovered the normal ultrastructure of bronchiolar Clara cells. CMLE treatment offers a new alternative cure with less toxicity than Cisplatin for lung cancer therapy. Hence, CMLE would be employed as a novel supply of anti-cancer compounds combating lung cancer.

O presente trabalho tem como objetivo avaliar o desempenho anticâncer dos extratos metanólicos das folhas de Cassia alata (CMLE) em adenocarcinoma pulmonar estimulado por carbamato de etila (LAD) em diferenciação com a função da cisplatina (CIPL). Os ratos foram divididos em quatro grupos: (1) controle (CONT), (2) adenocarcinoma de pulmão (LAD) injetado intraperitonealmente com 1g/kg de carbamato de etila uma vez por semana durante um mês, (3) LAD+CMLE administrado 500 mg/kg de CMLE por via oral nos últimos dois meses do experimento e (4) grupo tratado com LAD+CIPL, injetado 2,5 mg/kg de cisplatina intraperitonealmente uma vez por semana nos últimos dois meses do experimento. Os exames de microscopia de luz e eletrônica revelaram o desenvolvimento de adenocarcinoma no bronquíolo terminal, além de algumas alterações histopatológicas no grupo LAD, como fibras de colágeno atípicas exageradas, aumento do conteúdo mucinoso e aumento da imunorreatividade positiva para PCNA, enquanto a investigação de microscopia eletrônica revelou que o adenocarcinoma papilar se originou das células Clara no grupo LAD. O grupo tratado com LAD+CMLE não apresentou massas tumorais e quase apresentou histologia pulmonar normal. Ele também recuperou a ultraestrutura normal das células de Clara bronquiolares. O tratamento com CMLE oferece uma nova alternativa de cura com menos toxicidade do que a cisplatina para a terapia do câncer de pulmão. Portanto, o CMLE seria empregado como um novo suprimento de compostos anticancerígenos para combater o câncer de pulmão.

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A new species of Myxobolus parasitizing the arterial bulb and cardiac musculature of the freshwater fish Pimelodus ornatus Kner, 1858, from the Arari river in the municipality of Cachoeira do Arari, island of Marajó, Pará, Brazil, was described. In the present study, the observed prevalence of myxozoan parasites in the heart tissue of the hosts was 20% (6/30). The myxozoans observed had mature biconvex spores, slightly rounded, an anterior end with two pyriform polar capsules and a posterior end with very evident sporoplasm, measuring 8 ± 0.2 μmin length. The spore width was 5.8 ± 0.4 μm, with a thickness of 3.4 ± 0.2μm. The length of the polar capsules was 3.6 ± 0.3 μm and the width was 1.2 ± 0.2μm, with 6 to 7 turns of the polar filament. The divergences observed, regarding the morphometric and genetic structure of SSU rDNA, in relation to other Myxobolidae already described in the literature, confirm the description of the new species Myxobolus rangeli n. sp.(AU)

Descrição de uma nova espécie de Myxobolus que parasita o bulbo arterial e a musculatura cardíaca do peixe de água doce Pimelodus ornatus Kner, 1858, do rio Arari, no município de Cachoeira do Arari, ilha de Marajó, Pará, Brasil. No presente estudo, a prevalência observada de parasitas mixozoários no tecido cardíaco dos hospedeiros foi de 20% (6/30). Os mixozoários observados apresentavam esporos maduros biconvexos, levemente arredondados, extremidade anterior com duas cápsulas polares piriformes e extremidade posterior com esporoplasma bem evidente, medindo 8 ± 0,2 μm de comprimento. A largura do esporo foi de 5,8 ± 0,4 μm, com espessura de 3,4 ± 0,2 μm. O comprimento das cápsulas polares foi de 3,6 ± 0,3 μm e a largura foi de 1,2 ± 0,2 μm, com 6 a 7 voltas do filamento polar. As divergências observadas, quanto à estrutura morfométrica e genética de SSU rDNA, em relação a outros Myxobolidae já descritos na literatura, confirmam a descrição da nova espécie Myxobolus rangeli n. sp.(AU)

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In a vegetation experiment with soybean plants of the Svapa and Mageva varieties and in a field experiment with bean plants of the Geliada and Shokoladnitsa varieties, we studied the effect of pre-sowing treatment of the seeds of these plants with Rizotorfin and Epin-extra on the nitrogenase activity of the nodules of these plants and their ultrastructure. Analysis of the ultrastructure of the nodule tissue of beans and soybeans was carried out in the flowering phase. It was found that the highest indices of the mass and number of nodules and the activity of nitrogenase in them were found in bean plants of the Heliada cultivar when the seeds were treated with Epin-extra against the background of inoculation with Rizotorfin, where the largest area of symbiosomes, volutin and their number was noted in the nodules. Beans of the Shokoladnitsa variety showed the protective effect of Rizotorfin. In the nodules of soybean plants of the Svapa variety, the seeds of which were treated with Epin-extra against the background of inoculation with Rizotorfin, the presence of a large number of symbiosomes, bacteroids, volutin inclusions with a larger area and a minimum number of inclusions of poly-ß-hydroxybutyric acid (PHB) was noted, and the highest indicators of symbiotic activity. Soybean plants of the Mageva variety showed the protective effect of Rizotorfin. The efficiency of the symbiotic system was determined by the number and weight of nodules and the activity of the nitrogenase enzyme.

Em um experimento de vegetação com plantas de soja das variedades Svapa e Mageva e em um experimento de campo com plantas de feijão das variedades Geliada e Shokoladnitsa, o efeito do tratamento pré-semeadura das sementes dessas plantas com Rizotorfin e Epin-extra sobre a atividade nitrogenase dos nódulos dessas plantas e sua ultraestrutura foi examinado. A análise da ultraestrutura do tecido do nódulo de feijão e soja foi realizada na fase de floração. Dessa forma, constatou-se que os maiores índices de massa, número de nódulos e a atividade da nitrogenase foram encontrados em plantas de feijão da cultivar Heliada quando as sementes foram tratadas com Epin-extra no contexto da inoculação com Rizotorfina, em que o maior área de simbiossomas, volutina e seu número foi anotado nos nódulos. O feijão da variedade Shokoladnitsa mostrou o efeito protetor do Rizotorfin. Nos nódulos de plantas de soja da variedade Svapa, cujas sementes foram tratadas com Epin-extra no contexto da inoculação com Rizotorfin, a presença de um grande número de simbiossomas, bacteróides, inclusões de volutina com uma área maior e um número mínimo de inclusões de ácido poli-ß-hidroxibutírico (PHB) foi notado, bem como os indicadores mais altos de atividade simbiótica. As plantas de soja da variedade Mageva apresentaram o efeito protetor do Rizotorfin. A eficiência do sistema simbiótico foi determinada pelo número e peso dos nódulos e pela atividade da enzima nitrogenase.

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Morphology, growth and aging of the heart, not only of Sotalia guianensis, but also of all cetaceans, are relatively unknown. The aim of the present study was to evaluate the morphology and growth of the heart and myocardium, using macro and micro-morphology, of samples collected from hearts of stranded Guiana dolphins found in the coast of Espírito Santo, Brazil. The ventricles were examined with light and electron microscopy, the hearts were measured and the volume density of cardiomyocytes, connective tissue, and blood vessels of the ventricles were determined. Statistical differences, regressions, correlations, and growth curves were applied between total length and age of animals and morphological variables. No significant difference was found between males and females. The histology and ultrastructure of the Guiana dolphin's ventricles are similar to those found in other mammals. Type-I and -III collagen fibers were predominant in the myocardium. Total length and age correlated with select external morphometric variables such as the circumference at the coronary sulcus and the circumference at the distal third. Only the volume density of cardiomyocytes (r = 0.516) and connective tissue (r = -0.503) of the right ventricle correlated with age. The growth of height and circumference of the heart of S. guianensis occurs until approximately ten years of age, exceeding the physical maturity age reported for the species.

A morfologia, o crescimento e o envelhecimento do coração, não só de Sotalia guianensis (boto-cinza), como também de todos os cetáceos é pouco conhecida. O objetivo do presente estudo foi avaliar a morfologia e o crescimento, utilizando macro e micromorfologia de amostras coletadas de corações de botos-cinza encontrados encalhados no litoral do Espírito Santo, Brasil. Os ventrículos foram avaliados na microscopia de luz e eletrônica, os corações foram mensurados e a densidade de volume de cardiomiócitos, tecido conjuntivo e vasos sanguíneos dos ventrículos foram determinadas. Diferenças estatísticas, regressões, correlações e curvas de crescimento foram aplicadas entre comprimento total, idade e variáveis morfológicas dos corações dos animais. A histologia e ultraestrutura dos ventrículos do boto-cinza são similares àquelas encontradas em outros mamíferos. Fibras colágenas dos tipos I e III foram predominantes no miocárdio, indicando tecido fibroso. O comprimento total e a idade correlacionaram-se com variáveis morfométricas externas, como a circunferência na região do sulco coronário e do terço distal do coração. Apenas a densidade de volume de cardiomiocitos (r=0,516) e do tecido conjuntivo (r=-0,503) do ventrículo direito apresentaram correlação com a idade. O crescimento em altura e circunferência do coração de S. guianensis ocorreu até aproximadamente dez anos de idade, excedendo a idade de maturidade fisica antes registrada para a espécie.

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Background: Acute myeloid leukemia (AML) is a group of non-lymphoid hematological tumors characterized by aberrant proliferation and/or decreased apoptosis of a clone of non-mature cells, resulting in the accumulation of immature blast cells in the bone marrow and peripheral blood. It is considered rare, as it represents 10% of neoplasms of hematopoietic origin. However, it is known that felines seroreactive for FIV and FeLV are more predisposed and reports of this type of leukemia in cats in the literature are scarce. Thus, the objective of this study was to evaluate the blood and bone marrow of a cat seroreactive for FeLV that presented with myelodysplastic syndrome that progressed to acute myeloid leukemia. Case: A 6-year-old male mixed-breed cat, neutered, seroreactive for FeLV, showed apathy, weight loss, and pale mucous membranes. Initial peripheral blood smear evaluation revealed hypochromic normocytic anemia, leukopenia, neutropenia, lymphopenia, and thrombocytosis with many macropackets and giant platelets. Based on this blood picture, a long-spectrum antimicrobial therapy with amoxicillin and clavulanate [Clavulin® BD - 25 mg/kg, every 12 h] was started. Granulocyte colony stimulating factor used filgrastim (rHu G-CSF) [Fiprina® - 5 µg/kg, SC, every 48 h] and appetite stimulant mirtazapine [Mirtz® - 2 mg/cat, orally, every 48 h] were used to correct leukopenia and nutritional status, respectively. Follow-up blood smear evaluation on the 30th day showed persistence of the hematological changes noticed earlier. A bone marrow puncture was performed, and immunosuppressive therapy with prednisolone [Predsim® - 4 mg/kg, orally, every 24 h] was initiated. The aspirated material showed increased cellularity for age, decreased myeloid:erythroid ratio, and 39.8% of blasts of myeloid origin. An average of 17.7 megakaryocytes were observed per field (10x magnification). Bone marrow cytological evaluation suggested acute myeloid leukemia with dysmegakaryocytopoiesis. After the diagnosis, the examinations were repeated monthly, and there was still intense leukopenia. However, in view of the stable clinical status and leukopenia with neutropenia, treatment for leukemia was not instituted and only supportive treatment was administered when necessary. Eight months after the diagnosis, clinical status had worsened, and unlike the earlier hemograms, global leukocyte count had increased with predominant lymphocytosis (95% of the total leukocytes) with atypical lymphocytes. The cat died a few days later. Discussion: Bone marrow evaluation is indicated when peripheral blood cell abnormalities are present and cannot be explained in the context of the clinical history. In the present report, the bone marrow aspirate was hypercellular (cellularity above 75%); however, intense leukopenia was observed in the peripheral blood. In myelodysplastic syndromes, it is common for the bone marrow to be normal to hypercellular, which occurs when there is a greater production of myeloid or erythroid cell lines in response to the loss, destruction, or consumption of cells. Despite this, cytopenias may be present in the peripheral blood, since the defective cells undergo apoptosis and die before being released into the circulation, characterizing inefficient hematopoiesis. The diagnosis of acute leukemia comprises a variety of hematopoietic neoplasms that are complex and unique. Each acute leukemia subtype has defining characteristics that affect the prognosis and treatment of each animal.

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Aluminum (Al) is widely used for water purification, cooking pots, cosmetic and pharmaceutical preparations, toothpaste tubes, and food processing industries. Although the transport in the digestive tract is very poor but if the load is high, it can be absorbed and accumulated. About 50-70% of Al accumulates in the bones and can have an impact on human health. Resveratrol (RES), isolated from tempeh as an Indonesian food ingredient, can increase cell viability and has promising cytoprotective effects. RES has the capacity to interact with oxidative stress, so it has the potential as a therapy in bone repair. Therefore, this study aimed to evaluate the effect of RES on the number of osteocytes and bone marrow cells in Al-induced mice. Swiss Webster mice were divided into four groups: (1) untreated groups, (2) AlCl3 -treated groups, (3) Al+Res5 treated groups, and (4) Al+Res10 treated groups. Al dose 200 mg/kg body weight was administered intraperitoneally. RES was given one hour after administration of Al, with doses of 5 and 10 mg/kg Body Weight. Al and RES administration is carried out for one month. All mice were sacrificed, and mouse bones were isolated for histological preparations and a half for genotoxic assays. Bone marrow cells were collected and stained with My Grunwald. The number of micronuclei polychromatic erythrocytes (MNPCE) was examined in 1,000 PCEs per animal. The number of PCEs is counted by at least 200 erythrocytes (PCE + NCE) per animal. The results showed that the administration of Al significantly increased the number of micronuclei (MN) but after administration of RES at doses of 5 and 10 mg/kg Body Weight significantly reduced the number of MN in bone marrow cells. A dose of RES 10 mg/kg BW stimulates proliferation and increases the number of osteocytes in bone significantly. It can be concluded that Al can cause genotoxicity in bone marrow cells and RES is anti-genotoxic and can stimulate osteocyte proliferation.

O alumínio (Al) é amplamente utilizado para purificação de água, panelas, preparações cosméticas e farmacêuticas, tubos de pasta de dente e indústrias de processamento de alimentos. Embora o transporte no trato digestivo seja escasso, se a carga for alta, pode ser, todavia, absorvida e acumulada. Cerca de 50-70% do Al se acumula nos ossos e pode ter impacto na saúde humana. O resveratrol (RES), isolado do tempê indonésio como ingrediente alimentar, pode aumentar a viabilidade celular e tem efeitos citoprotetores promissores. O RES possui a capacidade de interagir com o estresse oxidativo, e por essa razão pode ser utilizado como terapia no reparo ósseo. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito do RES no número de osteócitos e células da medula óssea em camundongos induzidos por Al. Camundongos Swiss Webster (SW) foram divididos em quatro grupos: (1) grupos não tratados, (2) grupos tratados com AlCl3 , (3) grupos tratados com Al+Res5 e (4) grupos tratados com Al+Res10. Uma dose de 200 mg/kg de peso corporal foi administrada por via intraperitoneal. O RES foi administrado uma hora após a administração do Al, nas doses de 5 e 10 mg/kg de peso corporal. A administração de Al e RES foi realizada por um mês. Todos os camundongos foram sacrificados, e os ossos dos camundongos foram isolados para preparações histológicas e meio para ensaios genotóxicos. As células da medula óssea foram coletadas e coradas com My Grunwald. O número de eritrócitos policromáticos micronúcleos (MNPCE) foi examinado em 1.000 PCEs por animal. O número de PCEs foi contado por pelo menos 200 eritrócitos (PCE + NCE) por animal. Os resultados mostraram que a administração de Al aumentou significativamente o número de micronúcleos (MN), mas após a administração de RES nas doses de 5 e 10 mg/kg de peso corporal reduziu significativamente o número de MN nas células da medula óssea. Uma dose de RES de 10 mg/kg BW estimula a proliferação e aumenta significativamente o número de osteócitos no osso. Dessa forma, pôde-se concluir que o Al pode causar genotoxicidade em células da medula óssea e o RES é antigenotóxico e pode estimular a proliferação de osteócitos.

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A Amplitude de Distribuição dos Eritrócitos na automação é medida como RDW-CV (como Coeficiente de Variação) e RDW-SD (como Desvio Padrão), avaliando a variação do volume dos eritrócitos. Embora o RDW-CV seja amplamente utilizado na medicina veterinária como auxílio no diagnóstico da anisocitose, o RDW-SD é raramente utilizado. O estabelecimento dos valores de referência dos três parâmetros poderá auxiliar na diferenciação de algumas anemias e facilitar o diagnóstico das doenças. Foram coletados os dados de 425 cães (240 fêmeas e 185 machos) e 96 gatos (62 fêmeas e 34 machos) saudáveis atendidos no Hospital Veterinário da ULBRA (Canoas/RS), e posteriormente os animais foram divididos em três grupos etários: grupo 1 (3 a 12meses), grupo 2(1 a 8 anos) e grupo 3 (acima de 8 anos). Objetivou-se o estabelecimento de valores de referências para as espécies, assim como a análise de diferença estatística de fêmeas e machos e dos grupos etários para as variáveis estudadas. O programa IBM SPSS® Statistics foi utilizado para as análises estatísticas.

The red blood cell distribution width in automation is measured as RDW-CV (as Coefficient of Variation) and RDW-SD (as Standard Deviation) to assess the variation in erythrocyte volume. Although RDW-CV is widely used in veterinary medicine for the diagnosis of anisocytosis, RDW-SD is rarely used. The establishment of reference values for the parameters may help to differentiate some anemias and facilitate the diagnosis of diseases. Data were collected from 425 healthy dogs (240 females and 185 males) and 96 healthy cats (62 females and 34 males) attended at the ULBRA's Veterinary Hospital (Canoas/RS), and later the animals were divided into three age groups: group 1 (3 to 12 months), group 2 (1 to 8 years) and group 3 (over 8 years). The objective was to establish reference values for the species, as well as to analyze the statistical difference of females and males and of the age groups for the studied variables. The IBM SPSS® Statistics program was used for statistical analysis.

La amplitude de distribución de eritrócitos em automatización se mide como RDW-CV (como coeficiente de variación) y RDW-SD (como desviación estándar), evaluando la variación en el volumen de los eritrocitos. Aunque RDW-CV se usa ampliamente en medicina veterinaria como ayuda en el diagnóstico de anisocitosis, RDW-SD rara vez se usa. El establecimiento de valores de referencia para los tres parámetros puede ayudar a diferenciar alguna anemia y facilitar el diagnóstico de enfermedades. Se recogieron datos de 425 perros sanos (240 hembras y 185 machos) y 96 gatos (62 hembras y 34 machos) tratados en el Hospital Veterinario ULBRA (Canoas/RS), y posteriormente los animales se dividieron en tres grupos de edad: grupo 1 (3 a 12 meses), grupo 2 (1 a 8 años) y grupo 3 (mayores de 8 años). El objetivo fue establecer valores de referencia para la especie, así como el análisis de diferencia estadística entre hembras y machos y grupos de edad para las variables estudiadas. Para los análisis estadísticos se utilizó el programa IBM SPSS® Statistics.

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Background: The tumor microenvironment is an important target of studies in different types of neoplasms. Understanding the role of general components such as immune, vascular and fibroblastic cells has the objective of contributing to prognosis and treatment. The aim of this study was to evaluate the relationship between mast cells and angiogenesis in benign and malignant mammary neoplasms by investigating the role of degranulation and microlocation of mast cells and neoformed vessels in canine mammary neoplasms. Materials, Methods & Results: Mammary glands (n = 122) from 50 female dogs submitted to mastectomy without chemotherapy were evaluated and categorized into 3 groups: control group (n = 46); malignant group (n = 57) and benign group (n = 19). Lymph nodes without changes (n = 59) and with metastases (n = 6) were also evaluated. To evaluate the MCD (mast cell density) and angiogenesis, Toluidine Blue (0.1%) and Gomori’s Trichrome techniques were performed and adapted from previous studies. Photomicrographs of 10 hotspot areas on a 40x objective lens of the mammary glands and lymph nodes were captured to assess MCD and angiogenesis. In the absence of these areas, random fields were captured. For the mammary glands of the malignant and benign groups, 20 fields were analyzed, as the analysis considered the microlocation (peritumoral and intratumoral). Counting was performed manually using ImageJ software version 1.42q by 2 observers. The statistical analysis were performed using SPSS software version 19.0. The most frequent histological type in the malignant group was carcinoma in mixed tumor (68.42%; 39/57) and in the benign group was benign mixed tumor (57.89%; 11/19). Female dogs without breed pattern were more frequently affected represented 70% of the animals and the mean age was 9 years and 8 months ± 3 years and 1 month...

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The flavonoid kaempferol has attracted research attention as a potential adjuvant during chemotherapy. This study aimed to evaluate the protective effects of kaempferol against ovarian damage in cisplatin-treated mice. Two groups of mice received saline solution (intraperitoneal injection [i.p.]; control) or a single dose of cisplatin (5 mg/kg body weight, i.p.). Moreover, two other mice groups were pretreated with kaempferol (1 or 10 mg/kg body weight, i.p.) 30 min before of the cisplatin administration. Thereafter, their ovaries were harvested and subjected to histological (follicular morphology and activation) and fluorescence (reactive oxygen species [ROS] production, glutathione [GSH] concentration, and mitochondrial activity) analyses. Compared with cisplatin treatment alone, pretreatment with 1 mg/kg kaempferol maintained normal follicular morphology, reduced ROS production and mitochondrial damage, and enhanced GSH concentration. However, pretreatment with 10 mg/kg kaempferol did not prevent cisplatin-induced damage. The rate of primordial follicle activation was greater in mice pretreated with 1 mg/kg kaempferol than in the other treatment groups. In conclusion, pretreatment with 1 mg/kg kaempferol prevents cisplatin-induced ovarian damage and stimulates primordial follicle activation in mice.

O flavonoide kaempferol tem atraído a atenção como um potencial adjuvante durante a quimioterapia. O presente estudo objetivou avaliar os efeitos do kaempferol contra os danos ovarianos em camundongos tratados com cisplatina. Fêmeas de camundongos receberam solução salina (injeção intraperitoneal [ip]; controle) ou uma dose única de cisplatina (5 mg/kg, ip) ou foram pré-tratadas com kaempferol (1 ou 10 mg/kg, ip) 30 min antes da administração de cisplatina. Os ovários foram recuperados e destinados para as análises histológicas (morfologia e ativação folicular) e de fluorescência (produção de espécies reativas de oxigênio [ERO], concentração de glutationa [GSH] e atividade mitocondrial). Em comparação ao tratamento apenas com cisplatina, o pré-tratamento com 1 mg/kg de kaempferol manteve a morfologia folicular normal, reduziu a produção de ERO, bem como os danos mitocondriais, e aumentou a concentração de GSH. Entretanto, o pré-tratamento com 10 mg/kg de kaempferol não preveniu os danos induzidos pela cisplatina. A taxa de ativação do folículo primordial foi maior em camundongos pré-tratados com 1 mg/kg de kaempferol do que nos outros grupos experimentais. Em conclusão, o pré-tratamento com 1 mg/kg de kaempferol previne o dano ovariano induzido pela cisplatina e estimula a ativação do folículo primordial em camundongos.

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Abstract During a survey Myxozoa, four specimens of the sheepshead (18 ± 1.5 cm and 59 ± 2.5 g) (Archosargus probatocephalus) were collected in the Ipioquinha river (Maceió/AL). Transmission electron microscopy observations revealed erythrocyte agglutinations in gill capillaries located near spherical cysts containing myxospores of the genus Henneguya. This hemagglutination partially or totally obstructed the gill capillaries. Erythrocytes occurred in close adherence to each other, with a closed intercellular space. A few lysed erythrocytes were observed among agglutinated cells. The reduced lumen of the capillaries was partially filled with amorphous dense homogenous material adhering to the erythrocytes. In addition, heterogeneous masses of irregular lower electron density were observed in the reduced channel of the capillary. The agglutinated erythrocytes appeared dense and homogenous, lacking cytoplasmic organelles. The nuclei had the appearance of normal condensed chromatin masses, generally without visible nucleoli. This occurrence of hemagglutination only in the capillaries located in close proximity to the developing myxozoan cysts suggests that parasite development may be a factor triggering erythrocyte agglutination. This is supported by previous experimental studies that showed a probable correlation between parasitic infections and hemagglutination. Nonetheless, further studies are necessary in order to better understand the physicochemical processes involved in this phenomenon.

Resumo Durante pesquisa de mixozoários foram coletados quatro espécimes do peixes sargo-de-dente (18 ± 1.5 cm e 59 ± 2.5 g) (Archosargus probatocephalus), no rio Ipioquinha (Maceió/AL). Observações por microscopia eletrônica de transmissão revelaram aglutinação de eritrócitos em capilares branquiais localizados próximos a cistos esféricos, contendo mixosporos do gênero Henneguya. Essa hemaglutinação obstruiu parcial ou totalmente os capilares branquiais. Os eritrócitos apareceram em forte aderência entre si, com espaço intercelular fechado. Foram observados poucos eritrócitos lisados entre as células aglutinadas. O lúmen reduzido dos capilares foi parcialmente preenchido com material homogêneo denso amorfo aderido aos eritrócitos, além de massas livres heterogêneas de densidade eletrônica baixa e irregular observadas no canal reduzido dos capilares. Os eritrócitos aglutinados pareciam densos e homogêneos, sem organelas citoplasmáticas. Os núcleos apareceram como massas normais de cromatina condensada, geralmente sem nucléolos visíveis. A ocorrência de hemaglutinação apenas nos capilares, localizados nas proximidades dos cistos mixozoários, sugere que o desenvolvimento parasitário pode ser um fator desencadeante da aglutinação eritrocitária. Isso é corroborado por estudos experimentais anteriores que mostraram uma provável correlação entre infecções parasitárias e hemaglutinação. No entanto, novos estudos são necessários para melhor compreender os processos físico-químicos envolvidos neste fenômeno.

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Boa constrictor es una especie que se encuentra a menudo en criaderos y zoológicos, además de ser utilizada como animal de compañía. Estos animales son nativos del nuevo mundo y se encuentran desde México hasta el norte de Argentina. El objetivo del presente trabajo es generar valores morfométricos de las células que componen el tejido sanguíneo de individuos de la especie Boa constrictor, identificando sus tamaños promedios, que son importantes para determinar el estado de estas células, siendo principalmente útiles para clasificar las anemias. Los frotis sanguíneos se realizaron con muestras recolectadas de cuatro ejemplares atendidos en el Núcleo de Estudos e Pesquisas em Animais Selvagens (NEPAS), siendo dos machos y dos hembras. Las láminas se tiñeron utilizando la técnica de tinción panótica rápida y se observaron bajo un microscopio óptico (100X, inmersión). Para la morfometría, la captura de imágenes se realizó con la ayuda de una cámara digital Canon acoplada al microscopio, y la medición de las células se realizó con el software Zeiss® AxioVision Sample Images. Se midieron un total de 2007 células de sangre, siendo 590 eritrocitos, 365 heterofilos, 140 linfocitos, 454 azurofilos, 17 monocitos y 441 trombocitos. Se encontró que los eritrocitos y trombocitos mostraron mayores diferencias entre sus diámetros mayores y menores, dando a estas células una forma elíptica...

Boa constrictor is a species often found in breeding grounds and zoos, in addition to being used as a pet animal. These animals are native to the new world, being found from Mexico to northern Argentina. The aim of the present work is to generate morphometric values of the cells that make up the blood tissue of individuals of the Boa constrictor species, identifying their average sizes, which are important in determining the state of these cells, being mainly useful for classifying anemias. Blood strains were performed with samples collected from four specimens attended at the Núcleo de Estudos e Pesquisas em Animais Selvagens (NEPAS), being two males and two females. The slides were stained using the fast panotic staining technique and observed under an optical microscope (100X, immersion). For morphometry, image capture was performed with the aid of a Canon digital camera attached to the microscope, and the measurement of the cells was done with the Zeiss® AxioVision Sample Images software. A total of 2007 blood cells were measured, being 590 erythrocytes, 365 heterophiles, 140 lymphocytes, 454 azurophils, 17 monocytes and 441 thrombocytes. It was found that erythrocytes and thrombocytes showed greater differences between their larger and smaller diameters, giving these cells an elliptical shape. The other cells evaluated showed similar proportions between the diameters...

Boa constrictor é uma espécie frequentemente encontrada em criadouros e zoológicos, além de ser utilizada como animal de companhia. Esses animais são nativos do novo mundo, sendo encontrados do México ao norte da Argentina. O trabalho realizado possui como objetivo gerar valores morfométricos das células que compõem o tecido sanguíneo de indivíduos da espécie Boa constrictor, identificando seus tamanhos médios, que são importantes na determinação do estado destas células, sendo úteis principalmente para classificar anemias. Foram realizadas distensões sanguíneas com as amostras coletadas de quatro exemplares atendidos no Núcleo de Estudos e Pesquisas em Animais Selvagens (NEPAS), sendo dois machos e duas fêmeas. As lâminas foram coradas utilizando a técnica de coloração panóptico rápido e observadas ao microscópio óptico (100X, imersão). Para morfometria foi realizada a captura de imagens com o auxílio de uma câmera digital Canon, modelo Powershot A640® acoplada ao microscópio, e foi utilizado o software Zeiss® AxioVision Sample Images. Foram mensuradas 2007 células sanguíneas, sendo 590 eritrócitos, 365 heterófilos, 140 linfócitos, 454 azurófilos, 17 monócitos e 441 trombócitos. Verificou-se que os eritrócitos e trombócitos apresentaram maiores diferenças entre seus diâmetros maiores e menores, conferindo o formato elíptico a estas células. As demais células avaliadas...

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A análise dos padrões morfológicos e morfométricos das microestruturas capilares é uma técnica não invasiva que pode ser utilizada para identificar espécies de mamíferos. Esta técnica pode ser aplicada em diversas áreas da ciência animal, tais como controle de qualidade de alimentos e análises forenses. Dada a dificuldade de obter seções transversais de pelos de guarda para expor o córtex, a maioria dos estudos analisou apenas os componentes medulares e cuticulares do pelo. A inclusão do córtex capilar de guarda em uma análise tricológica pode proporcionar uma descrição mais precisa das raças ou espécies de mamíferos. O presente estudo propõe um novo método para a execução de cortes transversais que expõem o córtex do pelo guarda de mamíferos utilizando um criostato.(AU)

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The objective of this study was to describe and compare the head morphometry of normal and pathological sperm from Saimiri macrodon. In the morphological analysis, 39% of the sperm had normal morphology, and 61% had major or minor defects, with pathology in the tails being the most frequent with 47% (38% curled tail, 7% folded tail and 2% strongly folded tail). Among the evaluated head morphometry parameters, area (A), width (L) and ellipticity (E) showed statistical difference (p>0.05) between normal and pathological sperm. The average head area and width was lower in normal sperm (p=0,01 e p=0,04, respectively), and the mean ellipticity was higher (p=0,038), when compared to pathological sperm. This definition of the sperm morphometric parameters of S. macrodon is important for the samples selection destined to reproduction biotechnologies and for the clarification of taxonomic and evolutionary issues in the genus Saimiri.

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The intestinal trematode, Haplorchis taichui (Nishigori, 1924), is an important in public health that causes infection in humans and animals especially in Asia and in parts of Africa and the Americas. Haplorchis taitui metacercariae were found in the gills of Cyprinion macrostomus (Heckel) and Capoeta barroisi persica (Karaman) collected from the Shapour River. Morphological excysted metacercariae were identified as wet mounts under a stereomicroscope. Then, the samples were subjected to molecular analysis. The result showed that 69% of examined fish (n=30) were diagnosed infected with encysted metacercariae in gills. The mean intensity was 8.3±16.9 parasites per fish. The morphometrical values agree with the findings of other studies with the small differences and polymerase chain reaction product length and nucleotide sequence analysis of 18S ribosomal deoxyribonucleic acid gene showed a similarity of over 99% between the specimens and the Haplorchis taichui (Nishigori, 1924) recorded in GenBank.

O trematódeo intestinal, Haplorchis taichui (Nishigori, 1924), é importante na saúde pública que causa infecção em humanos e animais, especialmente na Ásia e em partes da África e das Américas. Haplorchis taitui metacercariae foram encontradas nas brânquias de Cyprinion macrostomus (Heckel) e Capoeta barroisi pérsica (Karaman) coletadas no rio Shapour. Metacercárias foram identificadas microscopicamente sob um estereomicroscópio. Em seguida, as amostras foram submetidas à análise molecular. O resultado mostrou que 69% dos peixes examinados (n=30) foram diagnosticados infectados com metacercárias encistadas em brânquias. A intensidade média foi de 8,3±16,9 parasitas por peixe. Os valores morfométricos concordam com os achados de outros estudos com as pequenas diferenças e o comprimento do produto da reação em cadeia da polimerase e a análise da sequência nucleotídica do gene do ácido desoxirribonucleico ribossômico 18S mostraram uma similaridade de mais de 99% entre as amostras e o Haplorchis taichui (Nishigori, 1924) registrado no GenBank.

El trematodo intestinal, Haplorchis taichui (Nishigori, 1924), es importante en la salud pública que causa infección en humanos y animales, especialmente em Asia y em partes de África y América. Se encontraron Haplorchis taitui metacercariae en las branquias de Cyprinion macrostomus (Heckel) y Capoeta barroisi persica (Karaman) colectadas del río Shapour. Las metacercarias se identificaron bajo un microscopio estereoscópico. Luego, las muestras fueron sometidas a análisis molecular. El resultado mostró que el 69% de los peces examinados (n=30) fueron diagnosticados infectados con metacercarias enquistadas en las branquias. La intensidad media fue de 8.3±16.9 parásitos por pece. Los valores morfométricos concuerdan con los hallazgos de otros estudios con las pequeñas diferencias y la longitud del producto de reacción en cadena de la polimerasa y el análisis de la secuencia de nucleótidos del gen del ácido desoxirribonucleico ribosómico 18S mostró una similitud de más del 99% entre las muestras y el Haplorchis taichui (Nishigori, 1924) registrado en GenBank.

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This study aimed to evaluate the ultrastructural morphometry of bovine embryos produced in vitro grown at different concentrations of antioxidants. After in vitro maturation and fertilization, the presumptive zygotes were assigned into five treatments. T1) without the addition of any antioxidants (negative control); T2) addition of 50µM/mL cysteamine; and T3, T4 and T5) adding 2.5µg/mL, 5.0µg/mL or 10.0µg/mL of the antioxidants derived from the oily extract from Lippia origanoides, respectively. On D7 of culture, the embryos in the blastocyst stage were fixed and prepared for electron transmission microscopy. These were evaluated for the proportion of cytoplasm-to-nucleus, cytoplasm-to-mitochondria, cytoplasm-to-vacuoles, cytoplasm-to-autophagic vacuoles and cytoplasm-to-lipid droplets. Blastocysts cultured in media containing oily extract of Lippia origanoides presented morphological characteristics such as high cell:mitochondria ratio and low cell:vacuoles and cell:autophagic vacuole ratio, possibly been morphological indicators of embryonic quality. Inner cell mass (ICM) from blastocysts cultured in media without any antioxidants had the highest cell:vacuole ratio. Similar results were found in the trophectoderm (TE) cells of blastocysts from treatment 2. Embryo culture media supplemented with antioxidants derived from Lippia origanoides oil produced embryos with a higher cytoplasmic proportion of organelles, such as mitochondria. Also, treatments without any antioxidants or with the addition of cysteamine presented cytoplasmic vacuolization, a characteristic related to production of poor-quality embryos.(AU)

Este estudo teve como objetivo avaliar a morfometria ultraestrutural de embriões bovinos produzidos in vitro e cultivados em diferentes concentrações de antioxidantes. Após a maturação e a fertilização in vitro, os possíveis zigotos foram divididos em cinco tratamentos: T1) sem adição de antioxidantes (controle negativo); T2) adição de 50µM/mL de cisteamina; e T3, T4 e T5) adição de 2,5µg/mL, 5,0µg/mL ou 10,0µg/mL dos antioxidantes derivados do extrato oleoso de Lippia origanoides, respectivamente. No D7 de cultivo, os embriões em estágio de blastocisto foram fixados e preparados para microscopia eletrônica de transmissão. Estes foram avaliados para a proporção entre citoplasma e núcleo, citoplasma e mitocôndria, citoplasma e vacúolos, citoplasma e vacúolos autofágicos e citoplasma e gotículas lipídicas. Blastocistos cultivados em meio contendo extrato oleoso de Lippia origanoides apresentaram características morfológicas como alta relação célula:mitocôndria e baixa relação célula:vacúolos e célula:vacúolo autofágico, possíveis indicadores morfológicos de qualidade embrionária. A massa celular interna (MCI) de blastocistos cultivados em meio sem quaisquer antioxidantes teve a maior razão célula:vacúolo. Resultados semelhantes foram encontrados nas células do trofectoderma (TE) de blastocistos do tratamento 2. Portanto, o meio de cultivo embrionário suplementado com antioxidantes derivados do óleo de Lippia origanoides produziu embriões com maior proporção citoplasmática de organelas, como mitocôndrias. Além disso, tratamentos sem antioxidantes ou com adição de cisteamina apresentaram vacuolização citoplasmática, característica relacionada à produção de embriões de baixa qualidade.(AU)