LOPH and D-MHC in the treatment of FeLV associated acute leukemia in a cat

Background: Bone marrow primary malignancies are denominated leukemias, classified as myeloid or lymphoid, according to the cell lineage, and acute or chronic, according to the cell´s state of maturation. In cats, acute lymphoid leukemiais the most common form, especially in regions endemic for feline leukemia virus and / or feline immunodeficiency virus.A new treatment protocol for lymphomas, called LOPH, was described for animals with FeLV persistent viremia. Thisstudy aimed to report a case of a cat presenting with FeLV associated acute leukemia and treated with the LOPH protocol,and, in the rescue phase, a modification of the D-MAC protocol, denominated D-MHC.Case: A 4-year-old mixed breed intact queen was attended due to lethargy and inappetence. The patient did not present anyrelevant abnormalities in the clinical exam and complementary exams were performed including complete blood count,biochemical profile, SNAP Feline Triple Test, chest radiographs and abdominal ultrasound. Imaging tests and biochemicalvalues were unremarkable, but the patient presented a reagent result for FeLV and severe leukocytosis due to lymphocytosis. The morphological evaluation of the blood smear revealed the presence of blasts, in a concentration greater than 20%of the nucleated cells, which allowed the characterization of a leukemic state, probably lymphoid. First-line treatmentwas based on the LOPH protocol, including Lomustine, Vincristine, Prednisolone and Doxorubicin, in four-week cycles.Nevertheless, during the third cycle, 66 days after the institution of this protocol, the patient presented a febrile conditionalong with marked leukocytosis due to lymphocytosis, confirming leukemia recurrence. A rescue attempt was performedwith a modification of the D-MAC protocol, originally consisting of the combination of dexamethasone, melphalan, actinomycin-D and cytarabine, but with replacement of actinomycin-D by doxorubicin, and therefore denominated D-MHC....

LOPH and D-MHC in the treatment of FeLV associated acute leukemia in a cat

Background: Bone marrow primary malignancies are denominated leukemias, classified as myeloid or lymphoid, according to the cell lineage, and acute or chronic, according to the cell´s state of maturation. In cats, acute lymphoid leukemiais the most common form, especially in regions endemic for feline leukemia virus and / or feline immunodeficiency virus.A new treatment protocol for lymphomas, called LOPH, was described for animals with FeLV persistent viremia. Thisstudy aimed to report a case of a cat presenting with FeLV associated acute leukemia and treated with the LOPH protocol,and, in the rescue phase, a modification of the D-MAC protocol, denominated D-MHC.Case: A 4-year-old mixed breed intact queen was attended due to lethargy and inappetence. The patient did not present anyrelevant abnormalities in the clinical exam and complementary exams were performed including complete blood count,biochemical profile, SNAP Feline Triple Test, chest radiographs and abdominal ultrasound. Imaging tests and biochemicalvalues were unremarkable, but the patient presented a reagent result for FeLV and severe leukocytosis due to lymphocytosis. The morphological evaluation of the blood smear revealed the presence of blasts, in a concentration greater than 20%of the nucleated cells, which allowed the characterization of a leukemic state, probably lymphoid. First-line treatmentwas based on the LOPH protocol, including Lomustine, Vincristine, Prednisolone and Doxorubicin, in four-week cycles.Nevertheless, during the third cycle, 66 days after the institution of this protocol, the patient presented a febrile conditionalong with marked leukocytosis due to lymphocytosis, confirming leukemia recurrence. A rescue attempt was performedwith a modification of the D-MAC protocol, originally consisting of the combination of dexamethasone, melphalan, actinomycin-D and cytarabine, but with replacement of actinomycin-D by doxorubicin, and therefore denominated D-MHC....(AU)

Pathogenesis of Bovine alphaherpesvirus 2 in calves following different routes of inoculation / Patogênese do alfaherpesvírus bovino 2 em bezerros inoculados por diferentes vias

Bovine alphaherpesvirus 2 (BoHV-2) is the agent of herpetic mammilitis (BHM), a cutaneous and self-limiting disease affecting the udder and teats of cows. The pathogenesis of BoHV-2 is pourly understood, hampering the development of therapeutic drugs, vaccines and other control measures. This study investigated the pathogenesis of BoHV-2 in calves after inoculation through different routes. Three- to four-months seronegative calves were inoculated with BoHV-2 (107TCID50.mL-1) intramuscular (IM, n=4), intravenous (IV, n=4) or transdermal (TD) after mild scarification (n=4) and submitted to virological, clinical and serological monitoring. Calves inoculated by the IV route presented as light increase in body temperature between days 6 to 9 post-inoculation (pi). Virus inoculation by the TD route resulted in mild inflammatory lesions at the sites of inoculation, characterized by hyperemia, small vesicles, mild exudation and scab formation, between days 2 and 8pi. Virus or viral DNA was detected by PCR in the crusts/swabs collected from lesions of 3 out of 4 animals inoculated TD from day 2 to 8pi. Viremia was detected in 3/4 animals of the IM group (from day 4 to 8pi); in 2/4 animals of the IV group (days 6 and 8pi) but not in the TD group. Calves from all inoculated groups seroconverted to BoHV-2 in titers from 4 to 64, as indicated by virus-neutralizing (VN) assays performed in sera collected at day 15pi. Administration of dexamethasone (Dex) to the inoculated calves at day 48pi, did not result in virus reactivation as indicated by lack of virus detection in the blood and/or in inoculation sites and no increase in VN antibody titers. These results demonstrated that BoHV-2 was able to replicate efficiently in calves following different routes of exposure, produced viremia after IM and IV inoculation and was not reactivated by Dex treatment.(AU)

O alfaherpesvírus bovino 2 (BoHV-2) é um agente etiológico da mamilite herpética (BHM), uma doença cutânea e autolimitante do úbere e tetos de vacas. Pouco se sabe sobre a patogênese do BoHV-2, dificultando o desenvolvimento de medicamentos terapêuticos e vacinas. Este estudo investigou a patogênese do BoHV-2 em bezerros após a inoculação por diferentes vias. Bezerros soronegativos de três a quatro meses foram inoculados com BoHV-2 (107TCID50.mL-1) por via intramuscular (IM, n=4), por via intravenosa (IV, n=4) ou transdérmica (TD, n=4) após escarificação leve e submetidos a monitoramento virológico, clínico e sorológico. Os bezerros inoculados pela via IV apresentaram aumento leve da temperatura corporal entre os dias 6 a 9 pós-inoculação (pi). A inoculação do vírus pela via TD resultou em lesões inflamatórias leves nos locais de inoculação, caracterizadas por hiperemia, pequenas vesículas, exsudação leve e formação de crostas, entre os dias 2 e 8pi. O vírus ou DNA viral foi detectado por PCR nas crostas/swabs coletados de lesões de 3 de 4 animais inoculados TD do dia 2 ao 8pi. Viremia foi detectada em 3/4 dos animais do grupo IM (do dia 4 ao 8pi); em 2/4 animais do grupo IV (dias 6 e 8pi), mas não no grupo TD. Bezerros de todos os grupos inoculados soroconverteram o BoHV-2 em títulos de 4 a 64, conforme indicado por ensaios de vírus-neutralização (VN) realizados em soro coletado no dia 15pi. Administração de dexametasona (Dex) nos bezerros inoculados no dia 48pi, não resultou em reativação do vírus, como indicado pela falta de detecção de vírus no sangue e/ou nos locais de inoculação e pela ausência de aumento nos títulos de anticorpos. Estes resultados demonstraram que o BoHV-2 foi capaz de replicar eficientemente em bezerros seguindo diferentes vias de inoculação, produziu viremia após a inoculação IM e IV e não foi reativado pelo tratamento com Dex.(AU)

Pathogenesis of Bovine alphaherpesvirus 2 in calves following different routes of inoculation / Patogênese do alfaherpesvírus bovino 2 em bezerros inoculados por diferentes vias

Bovine alphaherpesvirus 2 (BoHV-2) is the agent of herpetic mammilitis (BHM), a cutaneous and self-limiting disease affecting the udder and teats of cows. The pathogenesis of BoHV-2 is pourly understood, hampering the development of therapeutic drugs, vaccines and other control measures. This study investigated the pathogenesis of BoHV-2 in calves after inoculation through different routes. Three- to four-months seronegative calves were inoculated with BoHV-2 (107TCID50.mL-1) intramuscular (IM, n=4), intravenous (IV, n=4) or transdermal (TD) after mild scarification (n=4) and submitted to virological, clinical and serological monitoring. Calves inoculated by the IV route presented as light increase in body temperature between days 6 to 9 post-inoculation (pi). Virus inoculation by the TD route resulted in mild inflammatory lesions at the sites of inoculation, characterized by hyperemia, small vesicles, mild exudation and scab formation, between days 2 and 8pi. Virus or viral DNA was detected by PCR in the crusts/swabs collected from lesions of 3 out of 4 animals inoculated TD from day 2 to 8pi. Viremia was detected in 3/4 animals of the IM group (from day 4 to 8pi); in 2/4 animals of the IV group (days 6 and 8pi) but not in the TD group. Calves from all inoculated groups seroconverted to BoHV-2 in titers from 4 to 64, as indicated by virus-neutralizing (VN) assays performed in sera collected at day 15pi. Administration of dexamethasone (Dex) to the inoculated calves at day 48pi, did not result in virus reactivation as indicated by lack of virus detection in the blood and/or in inoculation sites and no increase in VN antibody titers. These results demonstrated that BoHV-2 was able to replicate efficiently in calves following different routes of exposure, produced viremia after IM and IV inoculation and was not reactivated by Dex treatment.(AU)

O alfaherpesvírus bovino 2 (BoHV-2) é um agente etiológico da mamilite herpética (BHM), uma doença cutânea e autolimitante do úbere e tetos de vacas. Pouco se sabe sobre a patogênese do BoHV-2, dificultando o desenvolvimento de medicamentos terapêuticos e vacinas. Este estudo investigou a patogênese do BoHV-2 em bezerros após a inoculação por diferentes vias. Bezerros soronegativos de três a quatro meses foram inoculados com BoHV-2 (107TCID50.mL-1) por via intramuscular (IM, n=4), por via intravenosa (IV, n=4) ou transdérmica (TD, n=4) após escarificação leve e submetidos a monitoramento virológico, clínico e sorológico. Os bezerros inoculados pela via IV apresentaram aumento leve da temperatura corporal entre os dias 6 a 9 pós-inoculação (pi). A inoculação do vírus pela via TD resultou em lesões inflamatórias leves nos locais de inoculação, caracterizadas por hiperemia, pequenas vesículas, exsudação leve e formação de crostas, entre os dias 2 e 8pi. O vírus ou DNA viral foi detectado por PCR nas crostas/swabs coletados de lesões de 3 de 4 animais inoculados TD do dia 2 ao 8pi. Viremia foi detectada em 3/4 dos animais do grupo IM (do dia 4 ao 8pi); em 2/4 animais do grupo IV (dias 6 e 8pi), mas não no grupo TD. Bezerros de todos os grupos inoculados soroconverteram o BoHV-2 em títulos de 4 a 64, conforme indicado por ensaios de vírus-neutralização (VN) realizados em soro coletado no dia 15pi. Administração de dexametasona (Dex) nos bezerros inoculados no dia 48pi, não resultou em reativação do vírus, como indicado pela falta de detecção de vírus no sangue e/ou nos locais de inoculação e pela ausência de aumento nos títulos de anticorpos. Estes resultados demonstraram que o BoHV-2 foi capaz de replicar eficientemente em bezerros seguindo diferentes vias de inoculação, produziu viremia após a inoculação IM e IV e não foi reativado pelo tratamento com Dex.(AU)

Ganciclovir attenuates the respiratory disease induced by Equid alphaherpesvirus 1 in rabbits

ABSTRACT: Equid alphaherpesvirus 1 (EHV-1) is an important pathogen of horses, associated with respiratory, neurological disease and abortions. As vaccination is not always effective, anti-herpetic therapy may represent an alternative to prevent the losses caused by the infection. We herein investigated the activity of ganciclovir (GCV), an anti-herpetic human drug, in rabbits experimentally infected with EHV-1. Thirty-days-old New Zealand rabbits were allocated in three groups (6 animals each) and submitted to different treatments: G1 (non-infected controls), G2 (inoculated with EHV-1) - 107 TCID50 intranasally - IN) and G3 (inoculated IN with EHV-1 and treated with GCV - 5mg/kg/day for 7 days) and monitored thereafter. All animals of G2 developed systemic signs (moderate to severe apathy, anorexia), ocular discharge and respiratory signs (serous to mucopurulent nasal discharge), including mild to severe respiratory distress. Viremia was detected in all rabbits of G2 for up to 11 days (mean duration = 6.5 days). One animal died after severe respiratory distress and neurological signs (bruxism, opistotonus). In addition, these animals gained less weight than the control (G1) and GCV-treated rabbits (G3) from days 4 to 14pi (p 0.05). The clinical score of rabbits of G2 was statistically higher than the other groups from days 3 to 6pi (p 0.05), demonstrating a more severe disease. In contrast, G3 rabbits did not present systemic signs, presented only a mild and transient nasal secretion and gained more weight than G2 animals (p 0.05). In addition, viremia was detected in only 3 rabbits and was transient (average of 2.3 days). Thus, administration of GCV to rabbits inoculated IN with EHV-1 resulted in an important attenuation of the clinical disease as demonstrated by full prevention of systemic signs, maintenance of weight gain and by drastic reduction in viremia and in the magnitude of respiratory signs. These results are promising towards further testing of GCV as a potential drug for anti-herpetic therapy in horses.

RESUMO: O alfaherpesvírus equino 1 (EHV-1) é um importante patógeno de equinos, associado com doença respiratória, neurológica e abortos. Como a vacinação nem sempre é eficaz, a terapia anti-herpética pode representar uma alternativa para prevenir as perdas causadas pela infecção. Para tal, investigou-se a atividade do ganciclovir (GCV), uma droga anti-herpética de uso humano, em coelhos infectados experimentalmente com o EHV-1. Coelhos da raça Nova Zelândia com 30 dias de idade foram alocados em três grupos (6 animais cada) e submetidos a diferentes tratamentos: G1 (controles não infectados), G2 (inoculados com o EHV-1) - 107 TCID50 intranasal - IN) e G3 (inoculados IN com o EHV-1 e tratados com GCV - 5mg/kg/dia por 7 dias), e monitorados posteriormente. Todos os animais do G2 desenvolveram sinais sistêmicos (apatia moderada a grave, anorexia), secreção ocular e sinais respiratórios (secreção nasal serosa a mucopurulenta), incluindo dificuldade respiratória leve a grave. Viremia foi detectada em todos os coelhos do G2 por até 11 dias (duração média = 6,5 dias). Um animal morreu após dificuldade respiratória grave e sinais neurológicos (bruxismo, opistótono). Além disso, esses animais ganharam menos peso que os coelhos controle (G1) e tratados com GCV (G3) entre os dias 4 e 14pi (p 0,05). O escore clínico de coelhos do G2 foi estatisticamente maior que os demais grupos dos dias 3 a 6pi (p 0,05), demonstrando uma doença mais grave. Em contraste, os coelhos do G3 não apresentaram sinais sistêmicos, apresentaram apenas secreção nasal leve e transiente e ganharam mais peso que os animais do G2 (p 0,05). Além disso, a viremia foi detectada em apenas 3 coelhos e foi transitória (média de 2,3 dias). Assim, a administração de GCV a coelhos inoculados com EHV-1 resultou em uma importante atenuação da doença clínica, como demonstrado pela prevenção completa de sinais sistêmicos, manutenção do ganho de peso e pela redução drástica da viremia e da magnitude dos sinais respiratórios. Estes resultados são promissores para testes adicionais com o GCV para potencial terapêutico anti-herpética em equinos.

Ganciclovir attenuates the respiratory disease induced by Equid alphaherpesvirus 1 in rabbits / O ganciclovir atenua a doença respiratória produzida pelo alfaherpesvírus equino 1 em coelhos

Equid alphaherpesvirus 1 (EHV-1) is an important pathogen of horses, associated with respiratory, neurological disease and abortions. As vaccination is not always effective, anti-herpetic therapy may represent an alternative to prevent the losses caused by the infection. We herein investigated the activity of ganciclovir (GCV), an anti-herpetic human drug, in rabbits experimentally infected with EHV-1. Thirty-days-old New Zealand rabbits were allocated in three groups (6 animals each) and submitted to different treatments: G1 (non-infected controls), G2 (inoculated with EHV-1) - 107 TCID50 intranasally - IN) and G3 (inoculated IN with EHV-1 and treated with GCV - 5mg/kg/day for 7 days) and monitored thereafter. All animals of G2 developed systemic signs (moderate to severe apathy, anorexia), ocular discharge and respiratory signs (serous to mucopurulent nasal discharge), including mild to severe respiratory distress. Viremia was detected in all rabbits of G2 for up to 11 days (mean duration = 6.5 days). One animal died after severe respiratory distress and neurological signs (bruxism, opistotonus). In addition, these animals gained less weight than the control (G1) and GCV-treated rabbits (G3) from days 4 to 14pi (p<0.05). The clinical score of rabbits of G2 was statistically higher than the other groups from days 3 to 6pi (p<0.05), demonstrating a more severe disease. In contrast, G3 rabbits did not present systemic signs, presented only a mild and transient nasal secretion and gained more weight than G2 animals (p<0.05). In addition, viremia was detected in only 3 rabbits and was transient (average of 2.3 days). Thus, administration of GCV to rabbits inoculated IN with EHV-1 resulted in an important attenuation of the clinical disease as demonstrated by full prevention of systemic signs, maintenance of weight gain and by drastic reduction in viremia and in the magnitude of respiratory signs. These results are promising towards further testing of GCV as a potential drug for anti-herpetic therapy in horses.(AU)

O alfaherpesvírus equino 1 (EHV-1) é um importante patógeno de equinos, associado com doença respiratória, neurológica e abortos. Como a vacinação nem sempre é eficaz, a terapia anti-herpética pode representar uma alternativa para prevenir as perdas causadas pela infecção. Para tal, investigou-se a atividade do ganciclovir (GCV), uma droga anti-herpética de uso humano, em coelhos infectados experimentalmente com o EHV-1. Coelhos da raça Nova Zelândia com 30 dias de idade foram alocados em três grupos (6 animais cada) e submetidos a diferentes tratamentos: G1 (controles não infectados), G2 (inoculados com o EHV-1) - 107 TCID50 intranasal - IN) e G3 (inoculados IN com o EHV-1 e tratados com GCV - 5mg/kg/dia por 7 dias), e monitorados posteriormente. Todos os animais do G2 desenvolveram sinais sistêmicos (apatia moderada a grave, anorexia), secreção ocular e sinais respiratórios (secreção nasal serosa a mucopurulenta), incluindo dificuldade respiratória leve a grave. Viremia foi detectada em todos os coelhos do G2 por até 11 dias (duração média = 6,5 dias). Um animal morreu após dificuldade respiratória grave e sinais neurológicos (bruxismo, opistótono). Além disso, esses animais ganharam menos peso que os coelhos controle (G1) e tratados com GCV (G3) entre os dias 4 e 14pi (p<0,05). O escore clínico de coelhos do G2 foi estatisticamente maior que os demais grupos dos dias 3 a 6pi (p<0,05), demonstrando uma doença mais grave. Em contraste, os coelhos do G3 não apresentaram sinais sistêmicos, apresentaram apenas secreção nasal leve e transiente e ganharam mais peso que os animais do G2 (p<0,05). Além disso, a viremia foi detectada em apenas 3 coelhos e foi transitória (média de 2,3 dias). Assim, a administração de GCV a coelhos inoculados com EHV-1 resultou em uma importante atenuação da doença clínica, como demonstrado pela prevenção completa de sinais sistêmicos, manutenção do ganho de peso e pela redução drástica da viremia e da magnitude dos sinais respiratórios. Estes resultados são promissores para testes adicionais com o GCV para potencial terapêutico anti-herpética em equinos.(AU)

Ganciclovir attenuates the respiratory disease induced by Equid alphaherpesvirus 1 in rabbits / O ganciclovir atenua a doença respiratória produzida pelo alfaherpesvírus equino 1 em coelhos

Equid alphaherpesvirus 1 (EHV-1) is an important pathogen of horses, associated with respiratory, neurological disease and abortions. As vaccination is not always effective, anti-herpetic therapy may represent an alternative to prevent the losses caused by the infection. We herein investigated the activity of ganciclovir (GCV), an anti-herpetic human drug, in rabbits experimentally infected with EHV-1. Thirty-days-old New Zealand rabbits were allocated in three groups (6 animals each) and submitted to different treatments: G1 (non-infected controls), G2 (inoculated with EHV-1) - 107 TCID50 intranasally - IN) and G3 (inoculated IN with EHV-1 and treated with GCV - 5mg/kg/day for 7 days) and monitored thereafter. All animals of G2 developed systemic signs (moderate to severe apathy, anorexia), ocular discharge and respiratory signs (serous to mucopurulent nasal discharge), including mild to severe respiratory distress. Viremia was detected in all rabbits of G2 for up to 11 days (mean duration = 6.5 days). One animal died after severe respiratory distress and neurological signs (bruxism, opistotonus). In addition, these animals gained less weight than the control (G1) and GCV-treated rabbits (G3) from days 4 to 14pi (p<0.05). The clinical score of rabbits of G2 was statistically higher than the other groups from days 3 to 6pi (p<0.05), demonstrating a more severe disease. In contrast, G3 rabbits did not present systemic signs, presented only a mild and transient nasal secretion and gained more weight than G2 animals (p<0.05). In addition, viremia was detected in only 3 rabbits and was transient (average of 2.3 days)...(AU)

O alfaherpesvírus equino 1 (EHV-1) é um importante patógeno de equinos, associado com doença respiratória, neurológica e abortos. Como a vacinação nem sempre é eficaz, a terapia anti-herpética pode representar uma alternativa para prevenir as perdas causadas pela infecção. Para tal, investigou-se a atividade do ganciclovir (GCV), uma droga anti-herpética de uso humano, em coelhos infectados experimentalmente com o EHV-1. Coelhos da raça Nova Zelândia com 30 dias de idade foram alocados em três grupos (6 animais cada) e submetidos a diferentes tratamentos: G1 (controles não infectados), G2 (inoculados com o EHV-1) - 107 TCID50 intranasal - IN) e G3 (inoculados IN com o EHV-1 e tratados com GCV - 5mg/kg/dia por 7 dias), e monitorados posteriormente. Todos os animais do G2 desenvolveram sinais sistêmicos (apatia moderada a grave, anorexia), secreção ocular e sinais respiratórios (secreção nasal serosa a mucopurulenta), incluindo dificuldade respiratória leve a grave. Viremia foi detectada em todos os coelhos do G2 por até 11 dias (duração média = 6,5 dias). Um animal morreu após dificuldade respiratória grave e sinais neurológicos (bruxismo, opistótono). Além disso, esses animais ganharam menos peso que os coelhos controle (G1) e tratados com GCV (G3) entre os dias 4 e 14pi (p<0,05). O escore clínico de coelhos do G2 foi estatisticamente maior que os demais grupos dos dias 3 a 6pi (p<0,05), demonstrando uma doença mais grave. Em contraste, os coelhos do G3 não apresentaram sinais sistêmicos, apresentaram apenas secreção nasal leve e transiente e ganharam mais peso que os animais do G2 (p<0,05). Além disso, a viremia foi detectada em apenas 3 coelhos e foi transitória (média de 2,3 dias)...(AU)

Zika detection: comparison of methodologies

Many countries in the Americas have detected local transmission of multiple arboviruses that cause febrile illnesses. Therefore, laboratory testing has become an important tool for confirming the etiology of these diseases. The present study aimed to compare the sensitivity and specificity of three different Zika virus detection assays. One hundred serum samples from patients presenting with acute febrile symptoms were tested using a previously reported TaqMan® RT-qPCR assay. We used a SYBR® Green RT-qPCR and a conventional PCR methodologies to compare the results. Of the samples that were determined to be negative by the TaqMan® RT-qPCR assay, 100% (Kappa = 0.670) were also found to be negative by SYBR® Green RT-qPCR based on Tm comparison; however, 14% (Kappa = 0.035) were found to be positive by conventional PCR followed by agarose gel electrophoresis. The differences between the ZIKV strains circulating worldwide and the low viremia period can compromise diagnostic accuracy and thereby the accuracy of outbreak data. Therefore, improved assays are required to improve the diagnosis and surveillance of arbovirus.(AU)

Influence of the inclusion of spray-dried animal plasma in weanling pigs' diet on porcine circovirus type 2 (PCV2) loads / Influência da inclusão do plasma sanguíneo na dieta de leitões desmamados sobre a carga viral de circovírus suíno tipo 2 (PCV2)

Spray-dried animal plasma (SDAP), a natural byproduct of the meatpacking industry, has been shown to have beneficial effects on growth and performance of weaned pigs. Porcine circovirus 2 (PCV2) is an important virus that is disseminated in the pork industry. Regardless of the studies evaluating the possible transmission of PCV2 through SDAP, there is no information about the effects of its inclusion in the PCV2 loads in natural infections. The present investigation evaluated the influence of dietary inclusion levels of SDAP in weanling pigs on PCV2 viremia and humoral immune response. Fifty-six weaned piglets were fed in a 2-period feeding program. Dietary treatments included 0%, 2%, 4% or 6% and 0%, 1%, 2% or 3% of SDAP during period 1 (14 to 28 days old) and 2 (29 to 42-days old), respectively. In period 3 (42 to 56 days old), all piglets received a SDAP-free diet. Serum samples were collected weekly and tested for PCV2 antibodies and DNA load. The results show that the concentration of 6% and 3% of SDAP on feed offered for pigs during period 1 and 2, respectively, may have decreased the PCV2 loads.(AU)

O plasma sanguíneo em pó (PSP), produto natural de indústria frigorífica, tem mostrado efeitos benéficos sobre o crescimento e desempenho de leitões desmamados precocemente. Atualmente, embora o circovírus suíno 2 (PCV2) tenha grande importância para a suinocultura, não há informações sobre o impacto do uso de PSP e a resposta imune ao PCV2 em infecções naturais. Este trabalho avaliou diferentes níveis de inclusão de PSP em dietas de leitões e as cargas virais de PCV2 correspondentes. Quatro níveis de inclusão de PSP foram testados em dois períodos consecutivos: 0, 2, 4 ou 6% durante o período 1 (14 aos 28 dias de idade) e 1, 2 ou 3% de PSP durante o período 2 (29 a 42 dias de idade). No período 3 (42 aos 56 dias de idade), todos os leitões foram alimentados com dieta isenta de PSP. Amostras de soro foram coletadas semanalmente e testadas para anticorpos anti-PCV2 e carga de DNA de PCV2. As concentrações de 6% e 3% de PSP fornecidas nas rações durante o período 1 e 2, respectivamente, influenciaram na carga viral de PCV2 de suínos naturalmente infectados.(AU)

Influence of the inclusion of spray-dried animal plasma in weanling pigs' diet on porcine circovirus type 2 (PCV2) loads / Influência da inclusão do plasma sanguíneo na dieta de leitões desmamados sobre a carga viral de circovírus suíno tipo 2 (PCV2)

Spray-dried animal plasma (SDAP), a natural byproduct of the meatpacking industry, has been shown to have beneficial effects on growth and performance of weaned pigs. Porcine circovirus 2 (PCV2) is an important virus that is disseminated in the pork industry. Regardless of the studies evaluating the possible transmission of PCV2 through SDAP, there is no information about the effects of its inclusion in the PCV2 loads in natural infections. The present investigation evaluated the influence of dietary inclusion levels of SDAP in weanling pigs on PCV2 viremia and humoral immune response. Fifty-six weaned piglets were fed in a 2-period feeding program. Dietary treatments included 0%, 2%, 4% or 6% and 0%, 1%, 2% or 3% of SDAP during period 1 (14 to 28 days old) and 2 (29 to 42-days old), respectively. In period 3 (42 to 56 days old), all piglets received a SDAP-free diet. Serum samples were collected weekly and tested for PCV2 antibodies and DNA load. The results show that the concentration of 6% and 3% of SDAP on feed offered for pigs during period 1 and 2, respectively, may have decreased the PCV2 loads.(AU)

O plasma sanguíneo em pó (PSP), produto natural de indústria frigorífica, tem mostrado efeitos benéficos sobre o crescimento e desempenho de leitões desmamados precocemente. Atualmente, embora o circovírus suíno 2 (PCV2) tenha grande importância para a suinocultura, não há informações sobre o impacto do uso de PSP e a resposta imune ao PCV2 em infecções naturais. Este trabalho avaliou diferentes níveis de inclusão de PSP em dietas de leitões e as cargas virais de PCV2 correspondentes. Quatro níveis de inclusão de PSP foram testados em dois períodos consecutivos: 0, 2, 4 ou 6% durante o período 1 (14 aos 28 dias de idade) e 1, 2 ou 3% de PSP durante o período 2 (29 a 42 dias de idade). No período 3 (42 aos 56 dias de idade), todos os leitões foram alimentados com dieta isenta de PSP. Amostras de soro foram coletadas semanalmente e testadas para anticorpos anti-PCV2 e carga de DNA de PCV2. As concentrações de 6% e 3% de PSP fornecidas nas rações durante o período 1 e 2, respectivamente, influenciaram na carga viral de PCV2 de suínos naturalmente infectados.(AU)

Antibody response between pigs of Piau and a commercial breed naturally infected with Porcine circovirus 2 / Resposta sorológica entre suínos da raça Piau e linhagem comercial em rebanho naturalmente infectado pelo Porcine circovirus 2

Brazilian pig population is made up of several naturalized breeds; among them the Piau breed is known for its rusticity and large fat stores. The naturalized breeds, in comparison with commercial ones, may have an increased resistance to diseases circulating in their territory. Thus, this study aimed to verify if there are differences between the serologic profile against Porcine circovirus 2 (PCV2) of Piau pigs and that of a commercial breed from a farm naturally infected by PCV2. The serum viral load was measured by qPCR, and levels of anti-PCV2 antibodies were measured by ELISA. The results showed that the serum viral load was similar across all animals. However, Piau piglets showed higher levels of antibodies compared to commercial piglets (P= 0.05), while sows of the commercial breed showed higher levels than the Piau breed (P< 0.01). There was not a statistical difference between pigs of different production stages in the seroprevalence of PCV2 or the blood viral load. This work demonstrates that, with regard to a natural PCV2 infection, the Piau breed has a different humoral immune response compared to the response developed by the commercial pigs. The results support the importance of conservation of native breeds.(AU)

O rebanho de suínos brasileiro é constituído por diversas raças naturalizadas, entre elas a raça Piau, que é conhecida por sua rusticidade e pela grande deposição de toucinho. As raças naturalizadas, em comparação com as linhagens comerciais, podem ter uma maior resistência a doenças que circulam em seu território. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo verificar se existem diferenças no perfil sorológico contra o Porcine circovirus 2 (PVC2) entre suínos da raça Piau e de uma linhagem comercial de uma granja naturalmente infectada pelo PCV2. Foram realizadas mensurações da carga viral sérica por qPCR e dos níveis de anticorpos anti-PCV2 por meio da técnica de ELISA. Os resultados mostraram que a carga viral sérica se manteve homogênea em todos os animais e que os leitões da raça Piau apresentaram níveis de anticorpos superiores em comparação com os leitões da linhagem comercial (P=0,05), enquanto as porcas de linhagem comercial apresentaram níveis superiores aos da raça Piau (P<0,01). Este trabalho fornece indícios de que a raça Piau apresenta uma resposta imune humoral distinta diante de uma infecção natural pelo PCV2, quando comparada com a resposta desenvolvida pela linhagem comercial. Os resultados obtidos reforçam a importância da conservação das raças nativas.(AU)

Antibody response between pigs of Piau and a commercial breed naturally infected with Porcine circovirus 2 / Resposta sorológica entre suínos da raça Piau e linhagem comercial em rebanho naturalmente infectado pelo Porcine circovirus 2

Brazilian pig population is made up of several naturalized breeds; among them the Piau breed is known for its rusticity and large fat stores. The naturalized breeds, in comparison with commercial ones, may have an increased resistance to diseases circulating in their territory. Thus, this study aimed to verify if there are differences between the serologic profile against Porcine circovirus 2 (PCV2) of Piau pigs and that of a commercial breed from a farm naturally infected by PCV2. The serum viral load was measured by qPCR, and levels of anti-PCV2 antibodies were measured by ELISA. The results showed that the serum viral load was similar across all animals. However, Piau piglets showed higher levels of antibodies compared to commercial piglets (P= 0.05), while sows of the commercial breed showed higher levels than the Piau breed (P< 0.01). There was not a statistical difference between pigs of different production stages in the seroprevalence of PCV2 or the blood viral load. This work demonstrates that, with regard to a natural PCV2 infection, the Piau breed has a different humoral immune response compared to the response developed by the commercial pigs. The results support the importance of conservation of native breeds.(AU)

O rebanho de suínos brasileiro é constituído por diversas raças naturalizadas, entre elas a raça Piau, que é conhecida por sua rusticidade e pela grande deposição de toucinho. As raças naturalizadas, em comparação com as linhagens comerciais, podem ter uma maior resistência a doenças que circulam em seu território. Dessa forma, o presente estudo teve como objetivo verificar se existem diferenças no perfil sorológico contra o Porcine circovirus 2 (PVC2) entre suínos da raça Piau e de uma linhagem comercial de uma granja naturalmente infectada pelo PCV2. Foram realizadas mensurações da carga viral sérica por qPCR e dos níveis de anticorpos anti-PCV2 por meio da técnica de ELISA. Os resultados mostraram que a carga viral sérica se manteve homogênea em todos os animais e que os leitões da raça Piau apresentaram níveis de anticorpos superiores em comparação com os leitões da linhagem comercial (P=0,05), enquanto as porcas de linhagem comercial apresentaram níveis superiores aos da raça Piau (P<0,01). Este trabalho fornece indícios de que a raça Piau apresenta uma resposta imune humoral distinta diante de uma infecção natural pelo PCV2, quando comparada com a resposta desenvolvida pela linhagem comercial. Os resultados obtidos reforçam a importância da conservação das raças nativas.(AU)

Clinical and virological characteristics of calves experimentally infected with a Brazilian isolate of bovine viral diarrhea virus type 1a / Aspectos clínicos e virológicos da infecção experimental de bezerros com uma amostra brasileira do vírus da diarreia viral bovina 1a

To study the pathogenicity of the Brazilian bovine viral diarrhea virus (BVDV) type 1a 241.10 isolate, four calves were intranasally inoculated with a viral suspension containing 107.2 TCID50 mL-¹. One calf was left uninoculated and kept in contact with the other calves to investigate viral transmissibility. After inoculation, the animals were monitored daily for clinical signs of infection. The presence of the virus in the blood and nasal secretions was confirmed by virus isolation in cell culture. White blood cells were quantified prior to and every 3 days after infection, and the presence of antibodies was checked every 7 days, starting at day 0 until day 42 post-inoculation (pi). After infection, nasal and ocular serous secretions were observed between days 1 and 5 pi, along with a mild cough from days 2 to 4 pi; however, no severe clinical signs were present. Body temperature was slightly elevated between days 4 and 6 pi. The control calf did not develop any of the signs observed in the infected animals. Cell culture-mediated virus isolation confirmed viremia between days 4 and 8 pi and the presence of the virus in the nasal secretions between days 1 and 10 pi. All infected animals showed a decrease in white blood cell count. Antibodies could be detected from day 14 pi, and these levels remained high until day 35 pi. The control calf had no viremia, viral presence in nasal secretions, or positive serology, indicating the absence of viral transmission. Thus, isolate BVDV 1a 241.10 has low pathogenicity and transmissibility but retains immunosuppressive capacity.(AU)

Com o objetivo de estudar a patogenicidade de uma amostra brasileira do BVDV-1a (241.10), quatro bovinos foram inoculados pela via intranasal com uma suspensão viral contendo 107,2 TCID50 mL-¹. Um bezerro foi mantido em contato com o grupo infectado para avaliar a transmissibilidade. Após a inoculação, os animais foram monitorados diariamente para observação dos sinais clínicos. A presença de vírus no sangue e na secreção nasal foi confirmada pelo isolamento viral em cultivo celular. A contagem total de leucócitos no sangue foi realizada com intervalos de três dias pré- e pós-infecção e a detecção de anticorpos a cada sete dias, iniciando-se no dia 0 até o dia 42 pós-inoculação (pi). Após a inoculação, não foram observados sinais clínicos evidentes, apenas secreção nasal e ocular serosa entre os dias 1 e 5 pi e tosse discreta entre os dias 2 e 4 pi. A temperatura corporal teve leve aumento entre os dias 4 e 6 pi. O animal controle não desenvolveu os sinais observados no grupo infectado. O isolamento viral indicou presença de viremia entre os dias 4 a 8 pi e excreção viral na secreção nasal entre os dias 1 e 10 pi. Os animais inoculados apresentaram redução na contagem total de leucócitos no sangue. A detecção de anticorpos iniciou-se no dia 14 pi e os níveis mantiveram-se elevados até o dia 35 pi. No animal controle, não foi observada viremia, presença de vírus na secreção nasal e sorologia positiva, demonstrando ausência da transmissão. Assim sendo, conclui-se que a amostra de BVDV 1a 241.10 possui baixa patogenicidade, mantém a capacidade imunossupressora e tem baixa transmissibilidade.(AU)

Detecção das encefalites virais zoonóticas com ênfase no vírus do Nilo Ocidental (WNV) em equídeos no Brasil

As doenças neurológicas nos equídeos constituem importantes causas de óbitos nestes animais. Entre as diversas etiologias das afecções neurológicas o vírus do Nilo Ocidental (do inglês West Nile virus-WNV), se destaca como importante agente zoonótico responsável por graves epidemias em todo mundo. Este arbovírus (arthropod borne viírus) está amplamente distribuído pelos continentes e mantém seu ciclo de transmissão através da relação entre mosquito vetor e aves reservatório/amplificadoras. Os equídeos, assim como o ser humano, são hospedeiros terminais não desenvolvendo viremia suficiente para transmissão ao vetor. Contudo, estes animais são considerados sentinelas, indicando a presença deste e de outros importantes arbovírus em uma região. A rápida expansão do WNV no continente americano, após sua entrada nos EUA em 1999, representou um desafio no diagnóstico deste vírus nos rebanhos equídeos. Evidências sorológicas indicam a presença do WNV no Brasil desde 2009. O país possui hoje um dos maiores rebanhos equídeos do mundo, apresentando condições ideais, além do clima, presença dos vetores e espécies de aves susceptíveis, para a epidemiologia de WNV e de outras importantes arboviroses. No presente estudo, foi padronizada uma técnica de nested RT-PCR, utilizando primers específicos direcionados à parte da região NS5 do WNV, com a finalidade de aumentar a sensibilidade do teste de diagnóstico molecular e, a partir dessa padronização, investigou-se a etiologia de quadros neurológicos em quatro equídeos (dois equinos e dois asininos) que vieram a óbito com encefalomielite aguda no Estado do Espírito Santo. Obteve-se então a primeira identificação do RNA de WNV em território nacional (capítulo 2). Após, a partir da parceria com o órgão de defesa animal do Estado de Minas Gerais, Laboratório de Sanidade Animal (Instituto Mineiro de Agropecuária, LSA-IMA), foram realizados novos estudos em 76 amostras de sistema nervoso central de equídeos com síndrome neurológica, todas negativas para o vírus da raiva, objetivando o diagnóstico das principais encefalites equinas virais através de técnicas moleculares. O diagnóstico diferencial incluiu o Herpesvírus equino tipo 1 (EHV-1- equine herpesvirus type 1); vírus do gênero Flavivirus, como WNV e Encefalite de Saint Louis (SLEV- saint louis encephalitis virus) e os vírus do gênero Alphavírus, como o vírus da encefalite equina do leste (EEEV- eastern equine encephalitis virus), o vírus da encefalite equina do oeste (WEEV- western equine encephalitis virus) e o vírus da encefalite equina venezuelana (VEEV-venezuelan equine encephalitis virus). As análises incluíram também histopatologia do SNC e de outros órgãos em 16 amostras. Os dados dos Formulários de Solicitação de Exame de Síndrome Neurológica enviados também foram avaliados quanto a parâmetros relacionados aos animais e as amostras. Como resultado, todas as amostras foram negativas para os flavivírus e alfavírus testados e 5% das amostras foram positivas para EHV-1. Contudo, foram constatadas diversas questões quanto à coleta, conservação e entrega ao laboratório, além da ausência de informações fundamentais, com apenas 43% dos formulários devidamente preenchidos (capítulo 3). Assim, com o objetivo de orientar e auxiliar os médicos veterinários quanto à adequada coleta e conservação de amostras de equídeos com síndrome neurológica, bem como na anamnese e exame clínico, orientações foram elaboradas para contribuir no diagnóstico das doenças neurológicas em equídeos (capítulo 5). Além disso, como estratégia alternativa no diagnóstico da infecção pelo WNV em equídeos, a investigação do vírus nas hemácias de um cavalo com síndrome neurológica resultou na detecção de um animal positivo na região sudeste do país (capítulo 4). Os resultados deste trabalho poderão auxiliar nas estratégias de diagnóstico das encefalites virais nos equídeos e na vigilância epidemiológica de WNV no Brasil, podendo ser valiosas no contexto da Saúde Única.

Neurological diseases in equidae are important causes of death in these animals. Among the various etiologies of neurological disorders, the West Nile virus-WNV, stands out as an important zoonotic agent responsible for serious epidemics worldwide. This arbovirus (arthropod borne virus) is widely distributed across continents and maintains its transmission cycle through the relationship between vector mosquito and reservoir / amplifying birds. Equidae, like humans, are terminal hosts not developing enough viremia to transmit to the vector. However, these animals are considered sentinels, indicating the presence of this and other important arboviruses in a region. The rapid expansion of WNV in the American continent, after its entry into the USA in 1999, represented a technical challenge in the diagnosis of infection in equine herds. In Brazil, one of the largest equine herds in the world, serological evidence indicated the presence of WNV since 2009. The country has ideal climate conditions for WNV transmission, as well as other arboviruses, with presence of vectors and the potential avian reservoirs species. In the present study, a nested RT-PCR technique was standardized, using specific primers directed to the NS5 gene of the WNV. The new technique was standardized investigating four equids (two horses and two donkeys) who died with neurologic signs of acute encephalomyelitis in the state of Espírito Santo. The study resulted in the first identification of WNV RNA in Brazil (chapter 2). Afterwards, based on the partnership with the animal defense agency of the State of Minas Gerais, through the Animal Health Laboratory (Instituto Mineiro de Agropecuária, LSA-IMA), further studies were carried out with 76 CNS samples from equines with neurological syndrome, all shown negative for rabies, aiming at the diagnosis of the main viral equine encephalitis through molecular techniques. The differential diagnosis included equine herpesvirus type 1 (EHV-1); viruses of the genus Flavivirus, such as WNV and Saint Louis Encephalitis (SLEV) and viruses of the Alphavirus genus, such as the Eastern Equine Encephalitis Virus (EEEV), the West Equine Encephalitis Virus (WEEV) and the Equine Encephalitis Virus Venezuelan (VEEV). The analyzes also included histopathology of the CNS and other organs in 16 samples. The Neurological Syndrome Examination Request Forms data sent were also evaluated for parameters related to animals and samples. As a result, all samples were negative for the flaviviruses and alphaviruses tested and 5% of the samples were positive for EHV-1. However, several issues were noted concerning the collection, conservation and delivery to the laboratory, and the absence of key information, with only 43% of forms properly filled (chapter 3). Thus, with the objective of guiding and assisting veterinarians in the field regarding the adequate collection and conservation of samples from equines with neurological syndrome, as well as aspects such as anamnesis and clinical examination, guidelines were developed to contribute to the diagnosis of neurological diseases in equines (chapter 5). In addition, as an alternative strategy in the diagnosis of WNV infection in equidae, the investigation of the virus in the red blood cells of a horse with neurological syndrome resulted in the detection of a positive animal in the southeastern region of the country (chapter 4). The results of this work may assist in the diagnostic strategies for viral encephalitis in equines and in the epidemiological surveillance of WNV in Brazil, which can be valuable in the context of One Health

Desenvolvimento e imunogenicidade de uma vacina de aplicação intravaginal contra o alphaherpesvírus bovino tipo 5 (BoHV-5) associada a subunidade B recombinante da enterotoxina termolábil de Escherichia coli (rLTB)

O sistema imune de mucosa representa a barreira inicial frente a diversos patógenos 13 que utilizam estas superfícies como porta de entrada no organismo, como é o caso 14 dos alphaherpesvírus bovinos (BoHV). Estes vírus utilizam as mucosas, 15 principalmente nasal e genital, como ponto inicial de replicação, seguido de 16 disseminação local, viremia sistêmica e disseminação neuronal. Devido à grande 17 importância das vias mucosas na transmissão dos BoHV, torna-se evidenciado o 18 interesse no desenvolvimento de vacinas que propiciem imunidade de mucosa 19 contra estes vírus. No presente estudo, 63 fêmeas bovinas da raça Braford foram 20 divididas em sete grupos de nove animais e foram inoculadas por via intravaginal 21 com BoHV-5 inativado, associado à subunidade B recombinante da enterotoxina 22 termolábil de E. coli (rLTB) como segue: G1 (2-hidroxietilcelulose + BoHV-5 + rLTB), 23 G2 (2-hidroxietilcelulose + BoHV-5), G3 (Poloxâmero 407 + BoHV-5 + rLTB), G4 24 (Poloxâmero 407 + BoHV-5), G5 (BoHV-5 + rLTB), G6 (Controle negativo) e G7 25 (Controle positivo). A resposta humoral local e sistêmica induzida nos animais 26 inoculados foi mensurada por meio do teste ELISA indireto (IgA e IgG) e de 27 soroneutralização, e a resposta celular por Elisa direto quantitativo (IL-2 e IFN-28 Gama). Como resultados, na mucosa vaginal, apesar do grupo G5 proporcionar os 29 maiores níveis de IgG, os grupos experimentais com polímeros (G1 e G3) 30 demonstraram-se superiores estatisticamente em relação ao grupo controle positivo 31 (G7), assim como, com relação aos níveis de IgA observados na mucosa vaginal 32 aos 30, 60 e 90 dias após a primeira inoculação. Os grupos G1 e G3 também 33 proporcionaram títulos superiores de anticorpos neutralizantes (log2) em relação aos 34 demais tratamentos (p<0,01) 90 dias pós inoculação, evidenciando a eficiência dos 35 polímeros testados como sistema de entrega do antígeno. Já na mucosa nasal, 36 houve incremento dos níveis de IgA e IgG com o uso das vacinas dos grupos G1 e 37 G3, em relação ao controle positivo, G7 (p<0,05) aos 60 e 90 dias após a primeira 38 inoculação, o que enfatiza a forte relação entre os sistemas de mucosa. A 39 inoculação das vacinas experimentais também resultou em aumento nos níveis de 40 IgA e IgG no soro dos animais, mensurado por ELISA indireto, além de 41 apresentarem títulos de anticorpos neutralizantes aos 60 e 90 dias, detectados 42 através de soroneutralização. Os maiores títulos de anticorpos neutralizantes foram 43 proporcionados pelo grupo G5 (sem polímeros e intramuscular), entretanto, os níveis 44 de IL-2 e IFN-Gama obtidos com o uso dos polímeros foram superiores aos demais 1 grupos aos 30, 60 e 90 dias após primeira inoculação. A vacina intravaginal 2 demonstrou-se capaz de incrementar os níveis de IgA e IgG e de interleucinas no 3 soro e nas mucosas nasal e vaginal dos bovinos imunizados. Estes dados 4 comprovam a capacidade da vacina de aplicação intravaginal em bovinos em 5 estimular uma resposta imune local e sistêmica, além de corroborar a atividade 6 imunoestimulante, em mucosas, da rLTB. Deste modo, esta via de administração de 7 vacinas torna-se uma alternativa interessante, principalmente quando se objetiva 8 gerar proteção local contra patógenos que utilizam as superfícies mucosas como 9 porta de entrada no organismo.

The mucosal immune system represents the initial barrier against several pathogens 13 that use these surfaces as a gateway to the organism, such as bovine 14 alphaherpesviruses (BoHV). These viruses use mucous membranes, mainly nasal 15 and genital, as the initial point of replication, followed by local dissemination, 16 systemic viremia and neuronal dissemination. Due to the great importance of the 17 mucous pathways in the transmission of BoHV, the interest in the development of 18 vaccines that provide mucosal immunity against these viruses becomes evident. In 19 the present study, 63 Braford bovine females were divided into seven groups of nine 20 animals and were inoculated intravaginally with inactivated BoHV-5, associated with 21 the recombinant B subunit of the E. coli thermolabile enterotoxin (rLTB) as follows: 22 G1 (2-hydroxyethylcellulose + BoHV-5 + rLTB), G2 (2-hydroxyethylcellulose + BoHV-23 5), G3 (Poloxamer 407 + BoHV-5 + rLTB), G4 (Poloxamer 407 + BoHV-5), G5 24 (BoHV-5 + rLTB), G6 (Negative control) and G7 (Positive control). The local and 25 systemic humoral response induced in the inoculated animals were measured using 26 the indirect ELISA test (IgA and IgG) and serum neutralization, and the cellular 27 response, direct quantitative Elisa (IL-2 and IFN-Gamma). As a result, in the vaginal 28 mucosa, despite the G5 group providing the highest levels of IgG, the experimental 29 groups with polymers (G1 and G3) showed to be statistically superior in relation to 30 the positive control group (G7), as well as, in relation to the levels of IgA observed in 31 the vaginal mucosa at 30, 60 and 90 days after the first inoculation. Groups G1 and 32 G3 also provided superior titers of neutralizing antibodies (log2) in relation to the 33 other treatments (p <0.01) 90 days after inoculation, showing the efficiency of the 34 tested polymers as an antigen delivery system. In the nasal mucosa, there was an 35 increase in IgA and IgG levels with the use of vaccines in groups G1 and G3, in 36 relation to the positive control, G7 (p<0.05) at 60 and 90 days after the first 37 inoculation, which emphasizes the strong relationship between mucosal systems. 38 The inoculation of experimental vaccines also resulted in increased levels of IgA and 39 IgG in the animals' serum, measured by indirect ELISA, in addition to presenting 40 neutralizing antibody titers at 60 and 90 days, detected through serum neutralization. 41 The highest titers of neutralizing antibodies were provided by the G5 group (without 42 polymers and intramuscular), however, the levels of IL-2 and IFN-Gamma obtained 43 with the use of polymers were higher than the other groups at 30, 60 and 90 days 44 after first inoculation. The intravaginal vaccine has been shown to increase the levels 45 of IgA and IgG and interleukins in the serum and in the nasal and vaginal mucosa of 46 immunized cattle. These data prove the capacity of the vaccine for intravaginal 1 application in cattle to stimulate a local and systemic immune response, in addition to 2 corroborating the immunostimulating activity in mucous membranes of rLTB. Thus, 3 this route of administration of vaccines becomes an interesting alternative, especially 4 when the objective is to generate local protection against pathogens that use mucous 5 surfaces as a gateway into the body.

INFECÇÃO PELO VÍRUS DA LEUCEMINA FELINA (FeLV): ASPECTOS CLÍNICOS, EPIDEMIOLÓGICOS E HEMATOLÓGICOS DOS DESFECHOS PROGRESSIVOS E REGRESSIVOS E IDENTIFICAÇÃO DOS SUBGRUPOS ASSOCIADOS AO LINFOMA E A LEUCEMIA

Feline leukemia virus (FeLV) é um importante agente infeccioso em gatos, possui elevada prevalência no Brasil e é diagnosticado comumente pelo ensaio imunoenzimático (ELISA), limitado a detectar animais em viremia enquanto, a reação em cadeia de polimerase (PCR) detecta DNA proviral em diferentes desfechos da infecção. Este estudo, dividido em três artigos, caracterizou: os achados epidemiológicos, alterações clínicas e hematológicas, a evolução do quadro infeccioso e o tempo de sobrevida para os desfechos progressivo (FeLV+P) e regressivo (FeLV+R) da infecção por FeLV; e determinou os subgrupos em gatos com linfoma e leucemia. Foram selecionados 385 gatos, provenientes do Hospital de Clínicas Veterinárias (HCV) do CAV-UDESC, no período de novembro de 2015 a dezembro de 2019. Os gatos foram testados pelo método de ELISA, para antígeno p27 do FeLV e anticorpo contra p24 do FIV, e por nested-PCR para DNA proviral da região U3-LTR e gene gag do FeLV. O primeiro artigo determinou que a prevalência para FeLV+P foi de 34,4% (95%IC: 29,6-39,1%) e FeLV+R é 10,4% (95%IC: 7,4-13,4%); gatos sem raça definida (SRD) e machos são 2,8 e 3 vezes mais propensos a infecção progressiva e gatos FIV positivos tiveram 4,8 vezes mais chance de serem regressivos; animais FeLV+P apresentaram alterações hematológicas mais pronunciadas que FeLV+R, principalmente a trombocitopenia e a anemia. O segundo artigo obteve que o tempo mediano de sobrevivência foi 30 dias para o grupo FeLV+P e não foi alcançado nos demais grupos; o estado de saúde e a infecção progressiva por FeLV aumentaram em 4 e 5 vezes o hazard ratio (HR) para o desfecho óbito na população; as principais causas de óbito no grupo FeLV+P foram linfoma (28), leucemia (18) e alterações hematológicas de causa indeterminada AHCI (12). As causas de óbito em FeLV+R foram leucemia (2), AHCI (1), peritonite infecciosa felina (PIF) (1) e carcinoma de células escamosas (1). O terceiro artigo identificou que 68,7% dos gatos com linfoma (16) eram FeLV-A e FeLV-B positivos (FeLV-AB) e 31,3% eram FeLV-A; 70% dos gatos leucemia (10) eram FeLV-AB e 30% FeLV-A; as sequências FeLV-A obtidas possuem relação próxima com as variantes Arena, 36TTenv-16, Glasgow-1 e FeLV-81TTenv-1; as sequências FeLV-B são divergentes entre si e similares ao FELV endógeno. Os resultados obtidos nos estudos refletem alta prevalência de FeLV no país, demonstram o impacto devastador da infecção progressiva e a diversidade genética envolvida na patogênese das neoplasias associadas ao FeLV.

Feline leukemia virus (FeLV) is an important infectious agent in cats with high prevalence in Brazil. Commonly, FeLV is diagnostically by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), which identifies viremic cats. The polymerase chain reaction (PCR) assay amplifies FeLV proviral DNA and detects different infections outcomes. This research was written in three papers that characterized: epidemiologic outcomes; clinical and hematological findings; the evolution of FeLV infection outcomes; survival times for progressive (FeLV+P) end regressive (FeLV+R) FeLV infection outcomes; and determined FeLV subgroups in feline lymphoma and leukemia. Therefore, 385 cats were selected from the Hospital of Veterinary Clinical between November 2015 and December 2019. The cats were tested by ELISA for FeLV p27 antigen and FIV p24 antibodies. The animals were also tested by nested-PCR for FeLV proviral DNA from U3-LTR region and gag gene. In the first paper, the prevalence for FeLV+P was 34,4% (95%IC: 29,6-39,1%) and 10,4% (95%IC: 7,4-13,4%) for FeLV+R; cross-breeds cats and male was 2,8 and 3 times more likely to be progressively infected, while FIV-positive cats were 4,8 time more likely to be regressively infected; FeLV+P cats showed more pronounced hematological manifestations than did FeLV+R cats, especially anemia and thrombocytopenia. In the second paper, the median survival times for FeLV+P was 30 days and was not reached for the other groups; health conditions and progressive infection increased 4 and 5 times the death hazard ratio (HR) in the population; the main death causes in FeLV+P group were lymphoma (28), leukemia (18), hematologic abnormality of unidentified causes HAUC (12). The death causes in the FeLV+R group were leukemia (2), HAUC (1), feline infectious peritonitis (FIP) (1), and squamous cell carcinoma (1). In the third paper, 68,7% of the cats that had lymphoma (16) were FeLV-A and FeLV-B positive (FeLV-AB), while 31.3% were only FeLV-A positive; in cats with leukemia (10), 70% were FeLV-AB, and 30% were FeLV-A positive; FeLV-A sequences was related with Arena, 36TTenv-16, Glasgow-1 and FeLV-81TTenv-1 variants, while FeLV-B sequences was divergent from each others and similar to envFeLV. The research highlights the high FeLV prevalence in Brazil, the devastating impact of the FeLV progressive infection, and the genetic diversity in the FeLV-associated neoplasms pathogenesis.

Survival of a newborn from a pregnant woman with rabies infection

Background Rabies is very common in People's Republic of China. Each year thousands of people die because of this disease, but rabies diagnosed in pregnancy is very rare. Case Presentation In this study, we report the case of a pregnant woman who was infected with the rabies virus after a dog bite. The symptoms of rabies appeared in labor and she died after pregnancy. Her baby and husband did not develop the disease. Conclusion The phenomenon that the newborn infant was healthy may be related to the protective role of placenta in resisting the invasion of the rabies virus or the absence of systemic viremia. The prompt administration of vaccines and anti-rabies immunoglobulin to the infant may have also contributed to his survival.(AU)

Survival of a newborn from a pregnant woman with rabies infection

Rabies is very common in Peoples Republic of China. Each year thousands of people die because of this disease, but rabies diagnosed in pregnancy is very rare. Case Presentation In this study, we report the case of a pregnant woman who was infected with the rabies virus after a dog bite. The symptoms of rabies appeared in labor and she died after pregnancy. Her baby and husband did not develop the disease. Conclusion The phenomenon that the newborn infant was healthy may be related to the protective role of placenta in resisting the invasion of the rabies virus or the absence of systemic viremia. The prompt administration of vaccines and anti-rabies immunoglobulin to the infant may have also contributed to his survival.(AU)

Survival of a newborn from a pregnant woman with rabies infection

Rabies is very common in Peoples Republic of China. Each year thousands of people die because of this disease, but rabies diagnosed in pregnancy is very rare. Case Presentation In this study, we report the case of a pregnant woman who was infected with the rabies virus after a dog bite. The symptoms of rabies appeared in labor and she died after pregnancy. Her baby and husband did not develop the disease. Conclusion The phenomenon that the newborn infant was healthy may be related to the protective role of placenta in resisting the invasion of the rabies virus or the absence of systemic viremia. The prompt administration of vaccines and anti-rabies immunoglobulin to the infant may have also contributed to his survival.

Detection of enteric viruses in pancreas and spleen of broilers with runting-stunting syndrome (RSS) / Detecção de vírus entéricos em pâncreas e baço de frangos com a síndrome de nanismo e raquitismo (RSS)

Enteric disease is a multifactorial problem in chickens, which causes gastrointestinal alterations, elevated feed conversions and impairment. In the last years, several enteric viruses were implicated in enteric disease; case reports have shown their presence alone or in concomitant infections during outbreaks and have suggested that they might be determining factors in the aetiology of enteric disease. This study shows high detection rates of enteric viruses in the pancreas and spleen in samples from an outbreak of enteritis and malabsorption in 16 chicken flocks (n=80 broilers). Avian nephritis virus (ANV) was the most ubiquitous virus, present in 75% of the flocks followed by avian rotavirus group A (ART-A) with 68.75%, and by chicken astrovirus (CAstV) and chicken parvovirus (ChPV) in 43.75% of samples. Viruses were present in the pancreas of positive flocks at extremely high rates: 100% for ART-A, 91.7% for ANV, 100% for CAstV and 57.14% for ChPV. By contrast, only 16.7% and 57.14% of intestine samples were positive for ANV and CAstV, respectively. Avian reovirus (AReo) and avian adenovirus group 1 (FAdV-1) were not detected. These results suggest that high viral detection rates in pancreas samples may be a result of viremia during enteric disease, with subsequent damage of the exocrine pancreas, leading to runting-stunting syndrome (RSS).(AU)

A doença entérica é um problema multifatorial em galinhas que causa alterações gastrointestinais, conversão alimentar elevada e deficiência de crescimento. Nos últimos anos, os vírus entéricos foram associados à doença entérica; casos reportados mostraram a infecção de um único vírus e também infecções concomitantes durante os surtos sugerindo a presença de múltiplos fatores etiológicos nas doenças entéricas. Este estudo mostra uma alta taxa de detecção dos vírus entéricos em amostras de pâncreas e baço de um surto de enterite e má-absorção em 16 lotes de frangos (n=80 frangos). O vírus de nefrite aviária (ANV) foi o vírus mais detectado, estando presente em 75% dos lotes seguido pelo rotavírus aviário grupo A (ART-A) em 68,75% dos casos, e pelo astrovirus (CAstV) e parvovírus aviários (ChPV), ambos em 43,75% das amostras. Os vírus estavam presentes no pâncreas dos lotes positivos em percentuais elevados: 100% para ART-A e CAstV; 91,7% para ANV, e em 57,14% para ChPV. Em contraste, somente 16,7% e 57,14%, em amostras de intestino, foram positivos para ANV e CAstV, respectivamente. Reovírus aviário (AReo) e o adenovírus do grupo 1 (FAdV-1) não foram detectados. Estes resultados sugerem que os elevados percentuais de vírus detectados em amostras de pâncreas podem estar associados à viremia durante a doença entérica, com subsequente lesão no pâncreas exócrino das aves levando ao desenvolvimento da síndrome de nanismo e raquitismo.(AU)