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Semina ciênc. agrar; 43(2): 841-854, mar.-abr. 2022. tab

Artigo em Inglês | VETINDEX | ID: biblio-1369179

Resumo

Cooling and freezing processes cause physical and chemical damage to sperm by cold shock and oxidative stress. This study aimed to evaluate the effect of two antioxidants on sperm parameters of cooled and frozen-thawed ram semen diluted in an egg yolk-based extender. Semen was collected from 30 rams and processed in two consecutive experiments to test the inclusion of different concentrations of quercetin and butylated hydroxytoluene (BHT) in an egg yolk-based semen extender. Dimethyl sulfoxide (DMSO) was added as a solvent to the semen extender in a ratio of 1 mL DMSO for 90 mg of quercetin and 1 mL DMSO for 880 mg of BHT. After collection, semen was diluted at 200 × 106 motile sperm/mL (control) and split into different groups in each experiment. In experiment 1, semen was diluted with the extender containing quercetin (Q5, 5 µg/mL; Q10, 10 µg/mL; Q15, 15 µg/mL) or DMSO alone (DMSO1, 0.055 µL DMSO per mL; DMSO2, 0.165 µL DMSO per mL). In experiment 2, semen was diluted with the extender with BHT (BHT1, 0.5 µg/mL; BHT2, 1 µg/mL; BHT3, 1.5 µg/mL) or DMSO alone (DMSO3, 0.375 µL DMSO per mL; DMSO4, 1.125 µL DMSO per mL). After dilution, the semen was divided into two aliquots. Treated ram sperm samples were also subjected to different storage methods. The first set of samples was cooled at 5 °C for 24 h, whereas the second set of samples was frozen-thawed. Sperm motility parameters and plasma membrane integrity (PMI) were evaluated immediately after dilution (0h) and 24 h after cooling and in the frozen-thawed samples via computer-assisted sperm analysis and epifluorescence microscopy, respectively. The inclusion of quercetin or BHT did not affect sperm motility parameters or PMI of fresh, cooled, or frozen-thawed sperm in this study (P < 0.05). However, further studies are needed to test the effects of these antioxidants on the fertility of cryopreserved ram semen.(AU)

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O resfriamento e o congelamento causam danos físicos e químicos aos espermatozoides por choque térmico e estresse oxidativo. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar o efeito da inclusão de dois antioxidantes em um diluente à base de gema de ovo sobre os parâmetros espermáticos do sêmen ovino resfriado e congelado. Trinta carneiros tiveram o sêmen coletado e processado em dois experimentos consecutivos para testar a inclusão de diferentes concentrações de quercetina e hidroxitolueno butilado (BHT) em diluente de sêmen à base de gema de ovo. O DMSO foi adicionado como solvente ao diluente de sêmen em uma proporção de 1 mL de DMSO parra 90 mg de quercetina e 1 Ml de DMSO para 880 mg de BHT. Após a coleta, o sêmen foi diluído a 200 × 106 espermatozoides móveis/mL (Controle) e dividido em diferentes grupos em cada experimento. Experimento 1, Quercetina (Q5, 5 µg / mL; Q10, 10 µg / mL; Q15, 15 µg / mL) ou DMSO (DMSO1, 0,055 µL de DMSO por ml; DMSO2, 0,165 µL de DMSO / mL) foram adicionados ao extensor. Experimento 2, BHT (BHT1, 0,5 µg / mL; BHT2, 1 µg / mL; BHT3, 1,5 µg / mL) ou DMSO (DMSO3, 0,375 µL de DMSO por ml; DMSO4, 1,125 µL de DMSO / mL) foram adicionados à o extensor. Após a diluição, o sêmen foi dividido em duas alíquotas. O primeiro foi resfriado a 5 ° C por 24h, enquanto o segundo foi congelado. Os parâmetros de motilidade espermática e integridade da membrana plasmática (PMI) foram avaliados, imediatamente após a diluição (0h) e 24h após o resfriamento e nas amostras congeladas, pelo CASA e microscopia de epifluorescência, respectivamente. A inclusão de quercetina ou BHT não afetou os parâmetros de motilidade espermática e PMI de espermatozoides frescos, resfriados ou congelados (P < 0,05). Portanto, a inclusão de quercetina e BHT não beneficiou os parâmetros espermáticos do sêmen ovino submetido a armazenamento líquido a 5 ° C por 24h ou protocolo de congelamento no presente estudo. No entanto, mais estudos são necessários para testar o efeito desses antioxidantes na fertilidade do sêmen ovino criopreservado.(AU)

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