Equine frozen spermatic cell survivor after thawed and dilution using two different commercial extenders / Sobrevida das células espermáticas equinas criopreservadas após descongelação e diluição utilizando-se dois diluentes comerciais

ABSTRACT

The purpose of this study was to evaluate the motility and viability of stallion semen cryopreserved with 5% dimethyl-formamyde as cryoprotectant and posterior dilution to 2.5 and 1.25% as final concentration of cryoprotectant. After thawing, samples were diluted with two commercial extenders (FR4® and Botucrio® ) in two moments initial (Ti) and final (Tf). A total of 15 distinct ejaculates from five stallions of national breeds were analysed. Motility was observed using a computer assistant system analysis and viability was analyzed using fluorescent probes. A significant (P0.05) on membrane integrity between treatments was not observed.KEY WORDS Cryoprotectant,  diluent, equine, freezing, thawing.

RESUMO

O presente estudo teve por objetivo avaliar parâmetros de motilidade e viabilidade in vitro na diluição do crioprotetor dimetil-formamida a 5% pós-descongelação para concentrações de 2,5% e 1,25%, mediante utilização de dois diluentes comerciais adicionados junto ao sêmen. Após a descongelação, as amostras foram diluídas com a finalidade de manter as concentrações finais (2,5% e 1,25%) de crioprotetor, utilizando-se dois diluentes comerciais (FR4® e Botu-Crio®) em dois tempos inicial (Ti) e final (Tf).  Empregaram-se quinze amostras de ejaculados distintos de cinco garanhões de raças nacionais. Os parâmetros de motilidade foram observados através da análise computadorizada e os de integridade de membrana plasmática pela microscopia de epifluorescência. Verificou-se melhora nos parâmetros de motilidade total e progressiva dos espermatozóides, no tempo final (P 0,05) com o diluente Botu-Crio® em relação ao FR4®. Não houve diferença (P>0,05) entre os tratamentos quanto à integridade de membrana plasmática.PALAVRAS-CHAVES Crioprotetor, congelação, descongelação, diluente, equino.