Mecanismo de infecção do fungo Metarhizium anisopliae no carrapato Boophilus microplus em condições experimentais

ABSTRACT

The objective of the present communication has been to draw attention to the mode of penetration of the fungus Metarhizium anisopliae through the cuticle of Boophilus microplus under experimental conditions. Samples of M. anisopliae isolated from naturally infected ticks were used to prepare a suspension of 108 conidia/ml in a destilled water with 2% of Tween 80. The engorged females were submergged in this suspension for five minutes, then transferred to 27 ± 1 °C and > 80% RH in climatized chamber. Three days after the infection, females were fixed in either osmium tetroxide or glutaraldehyde, and dehydrated in alcohol / acetone for SEM. Fixation of conidia in the cuticle, formation of germinative tube and appressoria were seem. It was suggested that the penetration of this entomopathogenic fungus is primarily through the cuticle. The fixation of the fungus for SEM was best accomplished by the osmium tetroxide whereas the glutaraldehyde was more efficient fixative for the tick. It is the first time that the penetration’s mechanism of M. anisopliae is described in ticks.

RESUMO

O objetivo do presente trabalho foi avaliar o mecanismo de penetração do fungo Metarhizium anisopliae em Boophilus microplus em condições experimentais. As infecções foram realizadas utilizando amostra de M. anisopliae isolada de carrapatos. A suspensão de conídios do fungo foi preparada utilizando água destilada e espalhante adesivo Tween 80 e foi quantificada na concentração de 10(8) conídios/ml. As fêmeas ingurgitadas foram banhadas nesta suspensão durante cinco minutos e, após este período, foram levadas à câmara climatizada. Três dias após a infecção, as fêmeas foram fixadas utilizando tetróxido de ósmio e glutaraldeído, posteriormente desidratadas em bateria de álcool etílico com acetona. Após a desidratação, esse material foi levado à metalização e ao microscópio eletrônico de varredura, onde se observou a fixação dos conídios na cutícula das fêmeas, havendo germinação e a dilatação da extremidade do tubo germinativo em todas as amostras. Esta dilatação observada foi devido à formação do apressório, apesar de não ser possível observar esta estrutura sobre a cutícula das fêmeas ingurgitadas. O tetróxido de ósmio mostrou ser um excelente fixador para fungos, enquanto o glutaraldeído mostrou ser eficiente na fixação do artrópode. Conclui-se que a forma principal de penetração deste entomopatógeno em B. microplus é através da cutícula. Cabe aqui frisar que esta é a primeira vez que é descrito o mecanismo de penetração de M. anisopliae em carrapatos.