Optimization of micro propagation protocol by indirect organogenesis of Eucalyptus grandis / Otimização do protocolo de micropropagação por organogênese indireta de Eucalyptus grandis

ABSTRACT

The present work had the objective of improving the micro propagation protocol by indirect organogenesis Otimização do protocolo de micropropagação por organogênese indireta de Eucalyptus grandis Optimization of micro propagation protocol by indirect organogenesis of Eucalyptus grandis Rafael Augusto Arenhart1, Gilmar Roberto Zaffari2 Recebido em 08/03/2007; aprovado em 11/07/2008. of Eucalyptus grandis. This species has high agronomic and biotechnological interest, triggering gene insertion studies to obtain better quality plants. Exogenous genes can be inserted in callus tissues that must be regenerated to obtain modified plants. Leaf explants and micro cuttings obtained from germinated seedling of E. grandis were inoculated in culture medium with different levels of growth regulators in the callus induction and bud regeneration stages. Callus induction and formation in leaf explants occurred in 100 % of samples when cultured in medium with 2,4- D and in medium with combined TDZ and ANA. The absence of Fe-EDTA did not influence the intensity of callus formation in the explants. Induction and callus formation from micro cuttings occurred in 100 % of explants when cultured in medium with TDZ alone and combined with AIA. Bud regeneration of E. grandis has been induced in the presence of BAP alone and or combined with ANA and GA3 in culture medium.

RESUMO

O presente trabalho objetivou aprimorar o protocolo de micropropagação por organogênese indireta de Eucalyptus grandis. Esta espécie é de grande interesse agronômico e biotecnologico, onde se estuda a inserção de genes exógenos para obtenção de plantas com maior qualidade. A inserção de genes pode ser realizada em tecidos desdiferenciados que devem ser regenerados para a obtenção das plantas modificadas. Explantes foliares e segmentos nodais, obtidos a partir de plântulas de E. grandis germinadas in vitro, foram inoculados em meios de cultura com diferentes níveis de fitoreguladores na fase de indução de calo e regeneração de brotos. A indução e formação de calo a partir de folhas ocorreram em 100% dos explantes quando cultivados em meio com 2,4-D e meio com TDZ e ANA combinados. A ausência de Fe-EDTA ao meio não influenciou a intensidade de formação de calo nos explantes. A indução e formação de calo a partir de segmento nodal ocorreram em 100% dos explantes quando cultivados em meio com TDZ isolado e combinado com AIA. A regeneração de brotos de E. grandis a partir de calo foi induzida quando da presença de BAP isolado e ou combinado com ANA e GA3 no meio de cultura.