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Use of cellulose filter and paper filter to reduce the volume of cryoprotectant solution in vitrification of mouse embryos / Uso do filtro de celulose e papel filtro para redução do volume da solução crioprotetora na vitrificação de embriões murinos

Pessoa, Willian Daniel; Porto, Fabiane Aparecida de Alvarenga Rosa; Amaral, Vera Lucia Langaro.
R. Soc. bras. Ci. Anim. Lab.; 4(2): 115-121, dez. 2016. tab
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-15962

Resumo

The objective of this study was to evaluate the the efficiency of the cellulose filter on the reduction of the cryoprotectant during vitrification of mouse embryos. Twenty female mice, four week old,  were used (C57BL / 6 X BalbC) and superovulated by intraperitoneal injection of 10 IU eCG (Equine Chorionic Gonadotropin - Novo-rmon-SYntex®) followed 48h with 10 IU hCG (Chorionic Gonadotrophin human - Vetecor-HertapeCalier®). The protocol suggested by Vitri-Ingá® was used for vitrification and heating.  During the last step of the protocol, the excess of the cryoprotectant medium was aspirated with glass Pasteur pipette (Group A), with filter paper strips (Group B) and cellulose strips (Group C), and immediately mv immersed in liquid nitrogen. Statistical analysis was  performed using the chi² calculation, evaluating survival rates, cleavage, blastocyst formation and hatching. There was no difference between groups A and B on survival rates, cleavage, blastocyst and hatching. However, there were differences (p<0.05) in  blastocyst rates (80.8%, 60%) and hatching (55.3%, 33.3%)  between group A and group C, respectively. It was concluded that the use of filter paper for the vitrification of embryos in the present study was satisfactory and promising, confirming the importance of the cooling rate for the success of the technique and it has also tried to simplify and improve the implementation of the methodology.(AU)
Este estudo teve como objetivo avaliar a eficiência do filtro de celulose e papel filtro na diminuição do volume de crioprotetor na vitrificação de embriões murinos. Foram utilizadas 20 fêmeas de camundongos F1 (C57Bl/6 X BALBc), com 04 semanas de idade, e superovuladas por administração intraperitoneal de 10 IU eCG (Gonadotrofina Coriônica equina Novormon-SYntex®) e após 48h com 10 IU hCG (Gonadotrofina Coriônica humana Vetecor-HertapeCalier®). A vitrificação e aquecimento de todos os grupos seguiu o protocolo estabelecido pelo método Vitri-Ingá®. Na última etapa da técnica, o excesso de meio crioprotetor foi aspirado com pipeta pasteur de vidro estirada (Grupo A), com tiras de papel filtro (Grupo B) e com tiras de celulose (Grupo C), sendo imediatamente imersos em nitrogênio líquido. A análise estatística foi realizada através do cálculo chi², avaliando as taxas de sobrevivência, clivagem, formação de blastocistos e eclosão. Percebeu-se que não houve diferença entre os grupos A e B quanto as taxas de sobrevivência, clivagem, blastocistos e eclosão. Houve diferença (p<0,05) nas taxas de blastocisto (80,8%, 60%) e eclosão (55,3%, 33,3%) entre o grupo A e o grupo C, respectivamente. Ao fim, concluiu-se que a utilização do papel filtro na vitrificação de embriões neste estudo foi satisfatória e promissora, confirmando a importância da velocidade de resfriamento para o sucesso da técnica e ainda buscou simplificar e melhorar a execução da metodologia.(AU)
Biblioteca responsável: BR68.1
Localização: BR68.1