Avaliação da atividade da proteína quinase P34Cdc2 na maturação in vitro de oócitos caninos / Evaluation of p34cdc2 kinase activity in the in vitro maturation of canine oocytes
Pereira, Leda Maria Costa; Bersano, Paulo Ricardo de Oliveira; Lopes, Maria Denise.
Ciênc. Anim. (Impr.);
27(1): 41-54, 2017. tab, ilus
Artigo
em Inglês
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| ID: vti-18435
Resumo
O controle do ciclo celular é regulado por uma cascata de eventos coordenados que podem atuar influenciando na expressão ou repressão da atividade de proteínas relacionadas a retomada da meiose. Estudos indicam que a atividade dessas proteínas mostra-se tempo-dependente no processo de maturação in vitro (MIV). Esse trabalho teve o objetivo de avaliar a cinética da atividade quinase p34cdc2 durante a MIV de oócitos caninos. Ciência Animal 27(1), 2017. Os ovários foram obtidos de 40 cadelas submetidas à ovário-salpingo-histerectomia (OSH) eletiva. Após a OSH, os ovários foram imediatamente transportados a uma temperatura de 4 ºC. No laboratório, os ovários foram seccionados em fatias finas ("slicing"), para a liberação dos complexos cumulus-oócito (COCs). Apenas os COCs grau 1 foram selecionados e colocados em meio de maturação por um período de 24, 48 e 72 h de maturação. Após o cultivo, os COCs foram colocados em placas contendo solução de hialuronidase 0.2% para a retirada completa das células do Cumulus. A atividade da proteína p34cdc2 foi detectada por ELISA. Com base nos resultados verifica-se que a atividade da proteína mostra-se tempo-dependente, atingindo o pico após 48h de MIV (p<0,01). Após 72h, a atividade demonstrou um decréscimo. Com base neste estudo pode-se concluir que a proteína quinase p34cdc2 desempenha uma função de suma importância na progressão da meiose em cadelas. Dessa forma, a compreensão melhor dessa proteína assim como de outra que participam do processo de maturação poderá contribuir para o estabelecimento de meios mais adequados que melhorem significativamente as taxas dematuração.(AU)The control of the cell cycle is regulated by a cascade of coordinated events that can act by influencing the expression or repression of the activity of proteins related to meiosis resumption. Studies have indicated that the activity of these proteins is time-dependent in the in vitro maturation process (IVM). This work aimed to evaluate the kinetics of the p34cdc2 kinase activity during IVM of canine oocytes. Ovaries were obtained from 40 bitches submitted to elective ovary-salpingo-hysterectomy (OSH). After OSH, ovaries were immediately transported at temperature of 4 °C. In the laboratory, ovaries were sliced for the release of cumulus-oocyte complexes (COCs). Only grade 1 COCs were selected and placed in maturation medium for a period of 24, 48 and 72 h of maturation. After culturing, COCs were plated of 0.2% hyaluronidase solution for complete removal of cumulus cells. The activity of the p34cdc2 protein was detected by ELISA. Based on the results, it was observed that the activity of the protein is time-dependent, peaking after 48 hours of IVM (p 0.01). After 72 hours, activity declined. Based on this study, it could be concluded that the p34cdc2 protein kinase plays a very important role in the meiosis progression in bitches. Thus, a better understanding of this protein as well as of others that participate in the maturation process may contribute to the establishment of more adequate media to significantly improve maturation rates.(AU)
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