Estudo comparativo de sensibilidade das técnicas de cultura bacteriana e PCR para a detecção de Pasteurella pneumotropica em roedores / /Comparative sensivity for Pasteurella pneumotropica detection of rodents by bacterial culture and PCR techniques
Godoy, Cyntia Marques dos Santos Corrêa de; Motta, Milena Coutinho da; Spinelli, Marilda Osti; Cruz, Robison José da; Sartorelli, Jussimara Félix.
R. Soc. bras. Ci. Anim. Lab.;
1(3): 229-235, 2012.
Artigo
em Português
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| ID: vti-1941
Resumo
Objetivo: Realizar uma comparação, em relação a sensibilidade, das técnicas de cultura bacteriana e PCR para detecção de Pasteurella pneumotropica, em colônias convencionais de camundongos das linhagens isogênicas C57BL/6, BALB/c e heterogênica Swiss; ratos Wistar e Hamster Golden. Materiais e Métodos: 230 amostras de traquéia foram coletadas e divididas em partes iguais: uma parte foi encaminhada para a cultura bacteriana, onde foram realizadas provas bioquímicas manuais e semi-automatizadas. A outra parte foi submetida à reação de PCR, onde os oligonucleotídeos iniciadores foram F; 5 ACCTACTCTTGACATCCAGA 3 e R; 5 CGCTCCACATCGCTGCTT 3 que amplificam em 296 pb. Os produtos obtidos foram separados por eletroforese em gel de agarose. A visualização e fotodocumentação foram realizadas sob luz ultravioleta. Resultados e conclusão: Os resultados obtidos através da cultura bacteriana foram de 1,75% de casos positivos e 98,25% de negativos. Em relação ao PCR observamos o resultado de 63% de positivos e 37% de casos negativos. Concluindo, nossos resultados demonstram que a técnica de PCR oferece significativamente maior sensibilidade para detecção de P. pneumotropica quando comparado a cultura bacteriana. CEUA nº 251/11.(AU)OBJECTIVE: To conduct a comparative study of the sensitivity by bacterial culture and PCR detection of Pasteurella pneumotropica in conventional colonies of inbred mice strains C57BL/6, BALB/c and Swiss outbred; Golden Hamster and Wistar rats. MATERIALS AND METHODS: 230 samples of the trachea were collected and divided into equal parts: one part was sent for culture, where biochemical tests were performed manually and semi-automated, after bacterial isolation. The other part was subjected to PCR, used primers F, 5 ACCTACTCTTGACATCCAGA 3 and R, 5 CGCTCCACATCGCTGCTT 3 which amplifies at 296 bp. The products obtained were separated by electrophoresis in agarose gel. Visualization and photodocumentation were performed under ultraviolet light. RESULTS AND CONCLUSION: The results obtained by bacterial culture were 1.75% of positive cases and negative in 98.25%; 63% and 37% of cases positive and negative, respectively, by PCR. These results point to the greater sensitivity of PCR (x2 = 0.10, 0.80 < p <0.50) when compared to bacterial culture. CEUA nº 251/11(AU)
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