Parasitological and molecular detection of Babesia canis vogeli in dogs of Recife, Pernambuco and evaluation of risk factors associated / Detecção parasitológica e molecular da Babesia canis vogeli em cães de Recife, Pernambuco e avaliação de fatores de risco associados

ABSTRACT

This work aims to detect the presence of Babesia canis vogeli in dogs from Recife, Pernambuco via molecular and parasitological detection methods, and to assess the risk factors associated with this parasite. A total of 146 dogs (male and female) of varying breeds and ages that presented clinical symptoms of babesiosis were assessed at a clinical care center in the Veterinary School Hospital. Blood was obtained via venopuncture for hemoparasite detection and polymerase chain reaction (PCR). Using a commercial kit, DNA was extracted from blood samples. For the PCR reaction, an approximately 590 base pair long genetic sequence was used to detect the presence of B. canis vogeli. The forward primer, denoted as BAB1 (5-GTG AAC CTT ATC ACT TAA AGG-3), was specific for a conserved region on the 18S rRNA gene of Babesia spp., and the antisense primer was denoted as BAB4 (5-CAA CTC CTC CAC GCA ATC G-3). PCR results suggested that the percentage of Babesia canis vogeli infection was 4.8%. Through descriptive statistical analysis of the data, we observed that there was higher frequency of parasite infection associated with male dogs above two years of age, with a defined breed, from the countryside, are domiciled, and also suffer from tick infestation. We conclude that regardless of the type of risk factor, babesiosis can be found throughout Recife, Pernambuco, and its prevalence does not vary in most regions of Brazil. Our results indicate that PCR is a sensitive test for the detection of blood parasites, and should be performed as a clinical routine.(AU)

RESUMO

Objetivou-se determinar a ocorrência da Babesia canis vogeli através da detecção molecular e parasitológica em cães de Recife, Pernambuco e avaliar os fatores de risco associados. Foram atendidos 146 cães de ambos os sexos, variadas raças e idades que apresentaram sinais clínicos sugestivos de babesiose provenientes dos atendimentos clínicos de um Hospital Escola Veterinário. O sangue foi obtido através de venopunção para a realização da pesquisa de hemoparasitas e da reação em cadeia pela polimerase (PCR). O DNA foi extraído de cada amostra a partir de uma alíquota de 200?l de sangue com anticoagulante, utilizando-se o kit comercial. Para a reação da B. canis vogeli, foram utilizados oligonucleotídeos iniciadores que amplificam aproximadamente 590 pares de base. Os primers, BAB1 (5-GTG AAC CTT ATC ACT TAA AGG-3) são específicos para uma região conservada do gene 18S rRNA de Babesia spp., e o anti-senso BAB4 (5-CAA CTC CTC CAC GCA ATC G-3). O porcentual de infecção foi de 4,8% pela PCR. Na análise estatística descritiva dos dados verificou-se que houve uma maior frequência de cães positivos machos, acima de dois anos, com raça definida, provenientes de área rural, domiciliados e com a presença de carrapatos. Conclui-se que independente do tipo de fator de risco, a babesiose encontra-se disseminada em Recife, Pernambuco e sua prevalência não variou em relação à maioria das regiões do Brasil. A PCR demonstrou ser um exame sensível frente ao parasitológico sanguíneo, devendo ser introduzida na rotina clínica.(AU)