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Arq. ciênc. vet. zool. UNIPAR; 10(2): 105-110, jul-dez. 2007. ilus

Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-3112

Resumo

Devido ao diminuído potencial alergênico do leite de cabra, em relação ao leite de vaca, as proteínas do primeiro têm sido investigadas e mostram um amplo polimorfismos da αS1-caseína, variando de produção nula até 7 g/L. No locus gênico da ∝S1-caseína já foram encontrados 18 alelos, sendo o alelo G relacionado a baixos níveis de ∝s 1-caseína (0,6 g/L), decorrente de uma transição G→A (guanina por adenina) no sítio doador de splice do intron 4, levando à perda do exon 4 durante o processamento do RNA mensageiro. No Brasil existem poucos relatos de estudos sobre o polimorfismo genético desta proteína. Assim, este trabalho teve como objetivo estabelecer um protocolo para detecção do alelo G do gene da ∝S1-caseína e verificar sua existência em um grupo de animais caprinos. Para isto, leucócitos foram utilizados para isolamento de DNA com o reagente CTAB e um par de primer, desenhado com base na seqüência do GenBank (AJ504710), possibilitou a amplificação da região gênica de interesse, gerando produtos de PCR com tamanho de 550 pb. Após a digestão com a enzima AciI, foram observados dois fragmentos com tamanhos de 308 e 242 pb, indicando a presença da guanina no sítio doador de splice. Alguns animais, suspeitos de portarem o alelo G, tiveram amostras de DNA seqüenciadas. Os resultados mostraram inexistência da transição de base e, conseqüentemente, a inexistência do alelo G nos 80 animais estudados, indicando a necessidade de investigação de um número maior de animais, por se tratar de um alelo raro.(AU)

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Due to the diminished allergenic potential of the goat milk in relation to dairy milk, the proteins of the former have been studied and show an extensive polymorphism of alpha s1-casein, ranging its production from 0 to 7 g/L. In the genic locus of the alpha s1-casein, 18 alleles were found, the G allele related to low levels of alpha s1-casein (0,6 g/L), resulting from a G→A (guanine for adenine) transition of splice of intron 4 in the donor site, taking the loss of exon 4 during the processing of the RNA messenger. There are few reports on studies related to genetic polymorphisms of this particular protein in Brazil. Therefore, this study aims to establish a protocol for the detection of the G allele of the alpha s1-Casein gene and to verify its existence in a herd of goats. Thus, leucocytes were used to isolate the DNA with the reagent CTBA and a pair of primer, drawn based on the sequence of the GenBank (AJ504710), enabled the amplification of the genic region of interest, generating PCR with the size of 550 pb as a result. After the acyl-enzyme digestion, two fragments, 308 and 242 pb, were observe indicating the presence of the guanine in the donator site of the splice. Some results showed the absence of basic transition and consequently, the absence of the G allele in all of the 80 animals studied, indicating that further investigation on a larger number of animals is needed as it refers to a rare allele.(AU)

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Debido al disminuido potencial alergénico de la leche de cabra, en relación a la leche de vaca, las proteínas del primero vienen siendo investigadas y muestran un amplio polimorfismos de la α S1-caseína, variando de producción nula hasta 7 g/L. En el locus génico de la α S1-caseína ya fueron encontrados 18 alelos, siendo el alelo G relacionado a bajos niveles de αs1 -caseína (0,6 g/L), decurrente de una transición G→A (guanina por adenina) en el lugar donante de splice del intron 4, llevando a la pérdida del exón 4 durante el procesamiento del RNA mensajero. En Brasil hay pocos relatos de estudios sobre el polimorfismo genético de esta proteína. Así, esta investigación tuvo como objetivo establecer un protocolo para detección del alelo G del gen de la α S1-caseína y verificar su existencia en un grupo de animales caprinos. Para esto, leucocitos fueron utilizados para aislamiento de DNA con el reactivo CTAB y un par de primer, diseñado con base en la secuencia del GenBank (AJ504710), posibilitó la ampliación de la región génica de interés, generando productos de PCR con tamaño de 550pb. Tras la digestión con la enzima AciI, fueron observados dos fragmentos con tamaños de 308 y 242pb, indicando la presencia de guanina en el lugar donante de splice. Algunos animales, sospechosos de portaren el alelo G, tuvieron muestras de DNA secuenciadas. Los resultados mostraron inexistencia de la transición de base y, consecuentemente, la inexistencia del alelo G en los 80 animales estudiados, indicando la necesidad de investigación de un número mayor de animales, por tratarse de un alelo raro.(AU)

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