Seleção de peptídeos específicos para anticorpos anti Leptospira Interrogans

RESUMO

Leptospira interrogans sorovar Copenhageni é o principal sorovar envolvido na Leptospirose humana, nas Regiões Sudeste e Nordeste do Brasil, sendo ainda escassas as informações nas demais regiões do país. É caracterizada por ser uma doença de caráter populacional e ambiental, seu controle está intimamente ligado a medidas de prevenção, aplicadas aos animais e ao ambiente no qual os mesmos são mantidos. A pesquisa de anticorpos constitui a principal prova de diagnóstico da leptospirose, incluindo teste sorogrupos – específicos, dos quais a prova de soro aglutinação microscópica (SAM) é a mais importante e amplamente utilizada. O objetivo nesse estudo foi verificar a viabilidade do uso da técnica Phage Display para selecionar peptídeos similares aos epítopos de anti Leptospira sorovar Copenhageni para subsidiar futuramente, um novo teste de diagnóstico. Após 3 ciclos de seleção, 92 clones foram selecionados e submetidos ao seqüenciamento. Assim foram seqüenciados 57 clones que demonstraram 54 seqüências distintas. Testes ELISA foram realizados para validação dos clones reativos e 3 deles foram reativos com altas absorbâncias. A tecnologia de Phage Display foi capaz de demonstrar reatividade, sinalizando a mimetização de possíveis peptídeos aos epítopos da Leptospira interrogans sorovar Copenhageni.

ABSTRACT

Leptospira interrogans serovar Copenhageni is the main sorovar involved in the Leptospirosis human, in the Southeast Regions and Northeast of Brazil, being still scarce the information in the too regions of the country. It is characterized by be an illness of his, environmental and population character control is intimate linked in proportion to prevention, applied to the animals and to the environment in which they are maintained. To research of antibodies I constituted to main test of diagnosis of the leptospirosis, including test serogroups – specific, of the which the microscopic amalgamation serum test (BE) is to more important and broadly utilized. The objective in that study was verify the feasability of the use of the technical one Phage Display for select similar peptides to the epítopos of anti Leptospira serovar Copenhageni for subsidize future, a new test of diagnosis. After 3 cycles of selection, 92 clones were selected and submitted to the sequencing. So were sequenced 57 clones that showed 54 distinct sequences. ELISA tests were performed to validate the reactive clones and three of them were reactive with high absorbance. Phage display technology was able to demonstrate reactivity, signaling the possible peptides mimicking the epitopes of Leptospira interrogans serovar Copenhageni.