Analysis of the genetic diversity of vancomycin-resistant Staphylococcus aureus

ABSTRACT

Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci (MRCoNS) are among the most frequent causes of hospital infections worldwide, thus justifying the increasing use of vancomycin. In this study, we evaluated the presence of glycopeptide-resistant staphylococci, in 41 patients hospitalized in the Clinical Hospital of the Federal University of Uberlândia in Uberlândia, MG, who were being treated with vancomycin. All isolates were plated on Mueller-Hinton agar containing vancomycin. Vancomycin resistance was confirmed by surface growth after incubation for 24-48 h at 35ºC. Heteroresistance was evaluated by plating with a large inoculum (10(8) CFU/mL). One patient with nephritis who was on a hemodialysis program was diagnosed with the phenotype isolate of vancomycin-intermediate Staphylococcus aureus (VISA) (CIM = 8 mug/mL) and in eight patients, strains of heteroresistant Staphylococcus corresponding to the hVISA phenotype were isolated. In addition to the extended use of vancomycin, other risk factors associated with the presence of these microorganisms included the use of three or more antimicrobial agents, surgery, and three or more invasive procedures. Molecular analysis by randon amplified polymorphic DNA polymerase chain reaction (RAPD-PCR) showed two clusters involving two samples each one of them, in surgical patients, with temporal and spatial relationship and isolates similarity concerning the susceptibility range to antimicrobial agents.

RESUMO

Staphylococcus aureus resistente à meticilina (MRSA) e Staphylococcus coagulase negativo resistente à meticilina (MRCoNS) são os agentes mais freqüentes em infecções hospitalares mundialmente, justificando o incremento no uso de vancomicina. Neste estudo avaliamos a presença de Staphylococcus resistentes aos glicopeptideos em 41 pacientes, em uso de vancomicina, hospitalizados no Hospital de Clínicas da Universidade Federal de Uberlândia em Uberlândia-MG. Todos os isolados foram semeados em agar Mueller-Hinton acrescido do antimicrobiano. A resistência a vancomicina foi confirmada por crescimento após incubação por 24-48 horas a 35ºC. A heterorresistência foi avaliada por semeadura com inóculo mais denso (10(8) UFC/mL). Um paciente com nefrite, no programa de hemodiálise teve o fenótipo de Staphylococcus aureus com resistência intermediária à vancomicina (VISA) (CIM= 8 mig/mL) e em oito pacientes as amostras apresentaram heterorresistência (hVISA). Além do uso prévio de vancomicina outros fatores de risco incluindo três ou mais antimicrobianos, cirurgia e três ou mais procedimentos invasivos, foram observados. A análise molecular foi realizada por amplificação randômica de DNA polimórfico em reação em cadeia da polimerase (RAPD-PCR) mostrando dois clusters com duas amostras cada um, em pacientes cirúrgicos, com relação temporal espacial e com perfil de susceptibilidade semelhantes quando frente à vários outros antimicrobianos.