Biotyping and genotypic diversity among oral Candida albicans strains from caries-free and caries-active healthy children
de Cássia Mardegan, Rita; Inêz Klein, Marlise; Baglione Golvea, Magda; Aparecida Oliveira Rodrigues, Janaina; Bruno Gonçalves, Reginaldo; Francisco Höfling, José.
Braz. J. Microbiol.;
37(1)2006.
Artigo
em Inglês
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| ID: vti-443939
Resumo
Candida albicans oral strains collected from caries-free and caries-active healthy children ranging from 24 to 36 months old, were studied. The aim of the study was to determine proteinase and phospholipase activities produced by Candida albicans in the two groups and to determine the phenotypic diversity of these enzymes based on genetic polymorphism using the AP-PCR method. Strains identified by morphological and fermentation tests as C. albicans were grown in proteinase and phospholipase agar media at 37ºC for 7 and 4 days, respectively. After the incubation period, the enzyme activity of the proteinase and phospholipase positive strains was measured. All strains were subjected to AP-PCR, using the arbitrary primer AP-3. The enzymatic analysis showed no differences between the two groups. The AP-PCR method was effective in demonstrating intra-individual genetic polymorphism in C. albicans, showing a greater clonal diversity in caries-active versus caries-free children. Dendograms of similarity showed only intra-individual clonal lineage. The results suggest that the enzymatic profile does not depend on the genotypic characteristics of the strains.Cepas orais de Candida albicans coletadas de crianças saudáveis cárie ativas e livres de cárie com idade variando de 24 a 36 meses, foram estudadas. O propósito do estudo foi determinar a atividade da proteinase e da fosfolipase produzida por Candida albicans nos dois grupos e comparar com a diversidade genotípica usando o método AP-PCR. As cepas identificadas como C. albicans por testes morfológicos e de fermentação, foram cultivadas em meio ágar proteinase e fosfolipase a 37ºC por 7 e 4 dias, respectivamente. Após o período de incubação, a atividade enzimática das cepas proteinase e fosfolipase positiva foram medidas. Todas as cepas foram submetidas a técnica genotípica AP-PCR, usando o primer arbitrário AP-3. A análise enzimática demonstrou que não há diferença entre os dois grupos estudados. O método AP-PCR foi eficiente em demonstrar o polimorfismo genético de C. albicans intra indivíduos demonstrando uma maior diversidade clonal em crianças cárie ativas em relação as livres de cárie. Dendogramas de similaridade demonstraram semelhança na linhagem clonal apenas intra-indivíduos. Os resultados sugerem que o perfil enzimático não depende das características genotípicas das cepas.
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BR68.1
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