Comparação de três técnicas de produção do antígeno do lentivírus caprino utilizado no teste de imunodifusão em gel de ágar / Comparison of three techniques for production goat lentivirus antigen used in the agar gel immunodifusion test

RESUMO

A Artrite Encefalite Caprina (ABC) é uma enfermidade que causa perdas econômicas consideráveis, incluindo perda na produção de leite e diminuição da vida útil do animal. No diagnóstico desta enfermidade o teste de imunodifusão em gel de ágar (IDGA) é utilizado mundialmente como o teste de triagem. Este trabalho teve como objetivo testar três diferentes concentrações de soro fetal bovino (SFB) na produção do antígeno (Ag) para o diagnóstico da AEC, verificar dentre três métodos o mais eficiente para efetuar a concentração e qual a concentração do antígeno produzido mais apropriada para o teste. Tanto o método do AMICON, como o da concentração do Ag por diálise são indicados, entretanto o sistema AMICON, apesar dos custos de implantação, promoveu menor perda de antígeno, maior rapidez e praticidade. Com relação à quantidade de soro fetal bovino (SFB) colocada após à inoculação viral observou-se que 5% de SFB foi a quantidade que apresentou melhores resultados. A concentração do antígeno mais indicada é de 100 vezes, pois permite a detecção de anticorpos contra o vírus da AEC (LVC) por duas proteínas (gp 135 e p28). A purificação do Ag por precipitação/ ultracentrifugação, utilizada para provas imunoenzimáticas (ELISA e Dot-BLOT), não apresentou resultados satisfatórios para o IDGA.(AU)

ABSTRACT

The Caprine Arthritis Encephalitis (CAE) is a disease who causeconsiderable economic losses, including loss in the milk productionand reduction of the useful life of the animal. In the diagnosis ofthis disease the agar gel immunodifusion test (AGID) is usedworldwide as the selection test. The objective of thid work was to testthree different concentrations of bovine fetal serum (BFS) in theproduction of the antigen (Ag) for the diagnosis of the CAE virus(CAEV), to verify amongst the three methods the most efficientconcentration and which the antigen concentration of the antigenproduced is appropriate for the test. The method of the AMICONand the concentration of the Ag for dialysis was indicated, howeverthe system AMICON, despite the implantation costs, promotedminor loss of antigen, little time expense in the processing and greatersimplicity. With relation to the amount of BFS placed after the viralinoculation it was verified that 5% of BFS the amount that presentedbetter resulted. The antigen concentration 100 times was moreindicated, therefore it allowed the diagnosis of the CAEV for twoproteins (gp 135 and p28). The concentration of the Ag forprecipitation/ultracentrifugation, used for imunoenzimatic tests, didnot present resulted satisfactory used in the AGID. (AU)