Controle da síntese de prostaglandina F2 ALFA no endométrio bovino in vitro / In vitro control of prostaglandin F2a synthesis in bovine endometrium

RESUMO

A síntese de prostaglandina F2± (PGF2±) endometrial, resulta de uma complexa cascata de eventos intracelulares que ocorrem de maneira altamente coordenada. A síntese de PGF2± pode ser estimulada na presença da melitina e do forbol 12,13 dibutirato (PDBu). O objetivo do presente estudo foi verificar se a produção basal e a estimulação aguda de PGF2± são dependentes da síntese de proteínas. No experimento 1, explantes obtidos de fêmeas bovinas (n=2), cíclicas, não lactantes, no dia 15 do ciclo estral foram incubados em quadruplicata, com meio de cultivo (KHB) ou KHB suplementado com PDBu 10-6M, melitina 10-6M ou melitina 10-5M. Amostras do meio foram coletadas 0 e 60 minutos após os tratamentos e as concentrações de PGF2± foram mensuradas por radioimunoensaio. Com 60 minutos após os tratamentos houve aumento das concentrações médias de PGF2± (P<0,06) em resposta ao tratamento com PDBu comparado ao grupo KHB e melitina. No experimento 2, explantes endometriais de fêmeas bovinas (n=4), não gestantes, no 17° dia do ciclo estral, pesando de 80 a 100mg foram incubados em KHB suplementado com 0, 50, 100 ou 200mg/mL de CHX e 0 ou 100ng/mL de PDBu em um arranjo fatorial 2 x 4, em quadruplicata. Amostras do meio foram coletadas 0 e 60 minutos após os tratamentos e as concentrações de PGF2± foram mensuradas por radioimunoensaio. A integridade dos explantes endometriais tratados com CHX foi avaliada por cortes histológicos. Foi observado aumento na produção de PGF2± em resposta ao tratamento com PDBu (P<0,01), entretanto, não houve diferenças na produção de PGF2± pelos tecidos tratados com diferentes concentrações de CHX, associadas ou não ao PDBu. A integridade histológica dos explantes foi preservada. Conclui-se que a produção basal e a estimulação aguda da síntese de PGF2± não são dependentes da síntese de novas proteínas. (AU)

ABSTRACT

Synthesis of endometrial prostaglandin F2a (PGF2a) results from acomplex cascade of highly coordinated intracellular events. Productionof PGF2a can be stimulated by mellitin and 12, 13 phorbol dibutyrate(PDBu). Objective of the present study was to verify whether basalor stimulated synthesis of PGF2a was dependent on de novo proteinsynthesis. In Experiment 1, endometrial explants from cyclic, nonlactating cross-bred beef cows (n=2) on day 15 of the estrous cyclewere incubated in quadruplicate in culture KHB culture medium ormedium supplemented with 10-6M PDBu, 10-6M melittin or 10-5Mmelittin. Medium samples were collected immediately and 60 minutesafter treatment administration and concentration of PGF2a in mediumwere measured by radioimmunoassay. Concentrations of PGF2a inmedium were higher (P<0.06) after treatment with PDBu incomparison with control and melittin. In Experiment 2, endometrialexplants from cyclic, non-lactating cross-bred beef cows (n=4) on day17 of the estrous cycle were incubated in quadruplicate in mediumsupplemented with 0, 50, 100 or 200mg cyclohexamide (CHX) and 0or 100ng/ml PDBu, in a 4 x 2 factorial arrangement. Medium sampleswere collected immediately and 60 minutes after administration oftreatments and concentrations of PGF2a measured byradioimmunoassay. Endometrial integrity was was evaluated byhistology. Treatment with PDBu stimulated production of PGF2a(P<0.01), regardless of concentration of CHX used. The CHX didnot affect production of PGF2a, either in the presence or absence ofPDBu. Histological integrity of explants was preserved. It wasconcluded that both basal and PDBu-stimulated PGF2a productionare not dependent on new protein sythesis. (AU)