Influencia do tempo da coleta à diluição sobre a viabilidade do sêmen ovino descongelado / Influence of time between the collection and dilution on the thawed sheep semen viability
Santos, Ivo Walter; Nóbrega Junior, Janduí Escarião; Kozicki, Luiz Ernandes; Weiss, Romildo Romualdo; Binsfeld, Luiz Carlos.
R. cient. eletr. Med. Vet.;
23: 1-13, jul. 2014. tab
Artigo
em Português
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| ID: vti-691174
Resumo
O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito do tempo após a coleta à diluição sobre o espermatozoide de carneiro, visando à integridade das membranas plasmática e acrossomal e da motilidade espermática após descongelamento. Foram utilizados sete Carneiros das raças Ille de France com idade média de três anos. As coletas de sêmen foram realizadas com uso de vagina artificial uma vez por semana, perfazendo 3 coletas por animal, totalizando 21 ejaculados. O diluidor usado foi Tris-gema. Imediatamente após a colheita o ejaculado foi dividido em quatro alíquotas iguais, sendo a primeira diluída em tempo 0 (T0), a segunda 5 minutos (T5), a terceira dez minutos (T10) e a quarta 15 minutos (T15) após a primeira respectivamente a 35ºC em banho maria numa concentração de aproximadamente 200x106 sptz/mL. Após a diluição empregando o método OneStep, o sêmen foi envasado em palhetas de 0,5mL previamente identificadas, na concentração de 100x106 sptz/palhetas. Mantidas por 2h a 5ºC, em seguida, foram expostas ao vapor de nitrogênio líquido por 15 min. Decorrido esse tempo, as palhetas foram armazenadas em botijão com nitrogênio líquido a -196 ºC. A viabilidade das membranas plasmática e acrossomal foram avaliadas pela coloração supravital tripan blue-giemsa hiposmótica (TBGH). Não houve variação significativa dos parâmetros seminais nos diferentes intervalos de tempo (P>0,05) na diluição. No sêmen descongelado houve diferença significativa na motilidade entre T0 e T15. (P<0,009) e na integridade da membrana plasmática entre T0 a 10 (P<0,02), e T15 (P<0,009), com redução significativa nos mesmos tempos para o acrossoma (P<0,01) e (P<0,006) respectivamente. Conclui-se que quanto mais breve a exposição do sêmen ovino ao meio diluidor, menor será o dano ao espermatozoide. (AU)The aim of this study was to evaluate the effect of time after semen collection until dilution on sheep spermatozoa, aiming to the integrity of plasmatic and acrosome membranes and semen motility after thawing. Seven ram Ille de France breeds three years old were used. The semen collections were collected using an artificial vagina once a week, 3 ejaculates per animal. The extender used was Tris-yolk. Immediately after collection the ejaculate was divided into four equal aliquots, diluted in the first time 0 (T0), the second, 5 minutes (T5), the third, ten minutes (T10) and fourth, 15 minutes (T15) being respectively after the first at 35 º C in a water bath at a concentration of approximately 200x106 sperm / ml. After dilution, employing the "One Step" method, the semen was packaged in 0.5 mL straws, previously identified and the concentration of 100x106 sperm / straws. Maintained for 2 h at 5 ° C, then, were exposed to nitrogen vapor for 15 min. After this time, the straws were stored in liquid nitrogen cylinder at -196 °C. The viability of plasmatic and acrosome membranes were evaluated by hyposmotic trypan blue-Giemsa staining (HTBG). There was no significant variation of seminal parameters in different time intervals (P> 0.05) in dilution. In thawed semen was detected significant difference in motility between times T0 and T15 (P <0.009) and plasma membrane integrity between T0 to T10 (P <0.02), and T15 (P <0.009), with significant reductions at the same times for the acrosome (P <0.01) and (P<0.006) respectively. We conclude that the faster dilution of semen after collection, fewer injuries occur to the sperm. (AU)
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