AVALIAÇÃO DOS MEIOS PBS E WHITTEN NO CULTIVO DE MORULAS DE Mus musculus

ABSTRACT

SUMMARY The development of fresh mouse embryos in Modified PBS without adding C02 was compared to the development in Modified Whitten supplemented with 5% de C02 in order to establish a parameter to assess the viability after thawing. One thousand and four hundred and fifty eight morulae were collected from Strain CF1 Swiss Albino Mus musculus females which had been previously superovulated with 6-8UI of PMSG and 6-8UI of HCG 48h apart. One thousand and fifty one morulae were cultured in Modified PBS + 20% FCS, at 37°C and 95% of humidity. The others 407 were cultured in Modified Whitten's medium + 3% BSA, at 37 °C, 95% of humidity and 5% of C02. At the evaluation, performed after 24h of culture, were considered developed the embryos that reached early blastocyst, expanded blastocyst, hatching blastocyst and hatched blastocyts stages. After 48h of culture were considered developed the embryos that reached at least the expanded blastocyst stage. The results obtained after 24h (87.9 and 89.4%) and 48h of culture (95.2 and 93.8%) in PBS and Whitten, respectively, were similar (p 0,05).

RESUMO

RESUMO A fim de estabelecer um parâmetro para a avaliação da viabilidade após o descongelamento, os resultados do cultivo de embriões frescos de camundongos, no meio PBS Modificado sem a adição de C02, foram comparados aos resultados obtidos após o cultivo no meio de Whitten Modificado em atmosfera com 5% de C02. Foram coletadas 1458 mórulas provenientes de fêmeas Mus musculus da cepa Suíço Albina CF 1, previamente superovuladas com 6-8UI de eCG e 6-8UI de HCG, com intervalo de 48 horas. Destas, 1051 foram cultivadas em PBS Modificado acrescido de 20% de SFB, a 37°C e 95% de umidade. As restantes 407 foram cultivadas no meio de Whitten Modificado, acrescido de 3% de BSA, a 37°C, 95% de umidade e 5% de C02. As avaliações foram realizadas com 24h de cultivo, sendo considerados os embriões que atingiram os estágios de blastocisto inicial (Bi), blastocisto (Bl), blastocisto expandido (Bx), blastocisto em eclosão (Bh) ou blastocisto eclodido (Be), e após 48h de cultivo os que atingiram pelo menos o estágio de blastocisto expandido. Os resultados obtidos após 24h (87,9 e 89,4%) e após 48h de cultivo (95,1 e 93,8%) em PBS e Whitten respectivamente, não apresentaram diferenças estatisticamente significativas (p 0,05).