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Acta Vet. bras.; 3(4): 151-156, 2009.

Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-722279

Resumo

This study was carried out to assess and standardize the Limit of Flocculation in vitro test to be used in the quality control of vaccine against enterotoxemy. This study used experimental vaccines against enterotoxemy and toxicoid produced from the epsilon toxin of Clostridium perfringens type D, previously evaluated by serum neutralization in mice and TCP test. The Limit of Flocculation technique was performed by mixing variable amounts of antitoxin and a fixed value of toxicoid to each tube. It was proposed, in the first tube to flocculate, that its Fl would be the unit of flocculation of the tested sample. The main results indicated that the lower degree of antitoxin detectable both in rabbit and in sheep serum through the Limit of Flocculation technique is equivalent to 10 UI/mL. The TCP and Limit of Flocculation correlation ratio was 99.97%. In conclusion, the Limit of Flocculation is suitable to replace in vivo methods for the analysis of epsilon. Nevertheless, the referred technique is less effective to be used for the potency test of vaccines against enterotoxemy in substitution to serum neutralization in mice. Keywords: Clostridiosis, in vitro methods, potency test, epsilon toxicoid analysis.

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Este trabalho foi desenvolvido com o objetivo de avaliar e padronizar o teste in vitro Limite de Floculação, para ser utilizado no controle de qualidade de vacinas contra enterotoxemia. Foram utilizadas vacinas experimentais contra enterotoxemia e toxóides produzidos pelo Clostridium perfringens tipo D, previamente avaliados por métodos in vivo, empregando-se os testes de soroneutralização em camundongo e TCP. A técnica Limite de Floculação consistiu em misturar volumes variados de antitoxina com volumes fixos de toxóide em tubos de ensaio. O primeiro tubo a flocular foi dito como sendo o que continha a quantidade mais próxima de antitoxina equivalente à quantidade de antígeno na amostra e se propôs que o Lf contido no tubo foi unidade de Lf da amostra testada. Os principais resultados obtidos indicaram que o nível mínimo de antitoxina detectável em soros de coelhos e carneiros pela técnica limite de floculação é 10 UI/mL. O coeficiente de correlação, obtido entre os títulos de toxóide pelos métodos TCP e Limite de floculação foi 99,97%. Conclui-se que o Limite de Floculação é satisfatório para substituir os tradicionais métodos in vivo utilizados na análise de toxóide epsilon. No entanto, a referida técnica é pouco eficiente para ser utilizada no teste de potência de vacinas contra enterotoxemia, em substituição à soroneutralização em camundongos. Palavras-Chave: Clostridiose

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