Isolation and regeneration of Penicillium brevicompactum protoplasts - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v26i4.1529 / Isolamento e regeneração de protoplastos de Penicillium brevicompactum - DOI: 10.4025/actascibiolsci.v26i4.1529
Antônio Varavalho, Maurílio; Vieira de Queiroz, Marisa; Fernando Pereira, Jorge; Fernandes de Araújo, Elza.
Acta Sci. Biol. Sci.;
26(4): 475-479, 2004.
Artigo
em Português
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| ID: vti-725663
Resumo
The isolation and regeneration of fungal protoplasts is a key step for the establishment of transformation systems, electrophoretic karyotype analysis and fusion between strains, all techniques of broad application on improvement programs of filamentous fungi. To establish conditions for the isolation and regeneration of ,em>Penicillium brevicompactum protoplasts, that is an excellent pectinase producer, different lytic enzymes and osmotic stabilizers were tested. P. brevicompactum protoplasts were obtained at a larger scale when their mycelium was digested with 15mg.mL-1 of Glucanex (Novo Nordisk) and 0.8 mol.L1 NaCl as osmotic stabilizer. The best osmotic stabilizer for the regeneration of P. brevicompactum protoplasts was 0.8 mol.L1 KCl, with a regeneration frequency of 36.58%. This protocol can be applied in genetic analysis of this Penicillium species which, to date has been poorly characterizedO isolamento e regeneração de protoplastos de fungos é um passo fundamental para o estabelecimento de sistemas de transformação, análise do cariótipo molecular e fusão entre linhagens, que são técnicas de ampla aplicação em programas de melhoramento para fungos filamentosos. Neste trabalho foram testados diferentes preparações enzimáticas e estabilizadores osmóticos para estabelecer condições otimizadas de isolamento e regeneração de protoplastos de Penicillium brevicompactum, que é um excelente produtor de pectinases. Protoplastos de P. brevicompactum foram obtidos em maior quantidade quando o micélio foi digerido com 15mg.mL-1 de Glucanex (Novo Nordisk) em NaCl 0,8 mol.L-1 como estabilizador osmótico. O melhor estabilizador osmótico para a regeneração dos protoplastos foi KCl 0.8 mol.L1 apresentando uma freqüência de regeneração de 36,58%. Esse protocolo pode ser utilizado em análises genéticas para essa espécie de Penicillium cujos estudos têm sido pouco reportados
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