Extracts and semi-purified fractions of Tagetes patula flowers in the control of root-knot nematodes / Extratos e frações semipurificadas de flores de Tagetes patula no controle do nematoide-das-galhas

ABSTRACT

The genus Tagetes constitutes a group of antagonistic plant species that are cytotoxic against plant pathogenic nematodes, with T. patula being particularly efficient. The aim of this study was to evaluate the in vitro effect of extracts and semi-purified fractions of T. patula flowers on eggs and second-stage juveniles (J2) of Meloidogyne incognita, M. javanica, and M. paranaensis, as well as to verify the nematicidal effect of the flavonoids present in T. patula flowers. Extracts and semi-purified fractions were obtained from dried T. patula flowers after maceration and liquidification, yielding crude aqueous (CAE) and crude ethanol-water (CEWE) extracts. Dried flowers were also treated with n-hexane to obtain a crude defatted aqueous extract (CDAE) and a crude ethanol-water defatted extract (CEWDE). Then, the CEWE was fractionated, and the ethyl acetate (EAF), ethanol (EF), methanol (MF), and ethanolwater (EWF) fractions were obtained. CAE, CEWE, CDAE, and CEWDE were tested to evaluate their effects on hatching, mobility, and mortality of J2 of M. incognita, M. javanica, and M. paranaensis. EAF, EF, MF, and EWF fractions were tested on the same variables of M. incognita. All extracts significantly reduced J2 hatching of M. incognita, M. javanica, and M. paranaensis when compared to water and water + DMSO. CEWE had nematicidal effects on the three evaluated species, whereas CEWDE demonstrated nematicidal effects against M. incognita and M. javanica, and nematostatic effects on M. paranaensis. This toxic effect showed by CEWE may be related to the high content of quercetin, a major substance present in this sample. It was also observed that EAF accentuated the nematicidal response on Meloidogyne spp., suggesting that other medium polarity (methoxylated) flavonoids act as nematotoxic substances. Thus, these results suggest that quercetin contributes significantly to the nematicidal activity of CEWE and EAF.

RESUMO

Entre as espécies de plantas antagonistas, as do gênero Tagetes apresentam citotoxicidade contra fitonematoides, sendo que T. patula mostra-se eficiente. Assim, objetivou-se avaliar o efeito in vitro de extratos e frações semipurificadas de flores de T. patula sobre ovos e juvenis de segundo estádio (J2) de Meloidogyne incognita, M. javanica e M. paranaensis, e a capacidade nematicida dos flavonoides presentes nas flores de T. patula. Os extratos e frações semipurificadas foram preparados a partir de flores secas de T. patula, que após maceração foram submetidas à turbólise, obtendo-se os extratos bruto aquoso (EBA) e bruto etanol-água (EBEA). Também houve tratamento de flores secas com n-hexano para a obtenção do extrato bruto aquoso desengordurado (EBAD) e do extrato bruto etanol-água desengordurado (EBEAD). Em seguida, o EBEA foi fracionado, sendo obtidas as frações acetato de etila (FAE), etanólica (FE), metanólica (FM) e etanolágua (FEA). O efeito dos extratos EBA, EBEA, EBAD e EBEAD foram avaliados sobre a eclosão, mobilidade e mortalidade de J2 de M. incognita, M. javanica e M. paranaensis. As frações FAE, FE, FM e FEA foram avaliadas frente a M. incognita usando as mesmas variáveis. Os extratos reduziram significativamente a taxa de eclosão de J2 de M. incognita, M. javanica e M. paranaensis, quando comparados com água e água + DMSO. Quanto ao efeito dos extratos, observou-se que EBEA apresentou efeito nematicida para as três espécies avaliadas, e EBEAD demonstrou capacidade nematicida contra M. incognita e M. javanica, e sendo nematostático para M. paranaensis. Tal capacidade pode estar relacionada com o alto teor de quercetina (substância majoritária no EBEA). Observou-se, também, que o fracionamento químico e a obtenção da FAE acentuaram a resposta nematicida sobre Meloidogyne spp., sugerindo que outros flavonoides de média polaridade (metoxilados) atuam como substâncias nematotóxicas.