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OBTENÇÃO E CARACTERIZAÇÃO DE IMUNÓGENO CONJUGADO DE LIPOPOLISSACARÍDEO DE PSEUDOMONAS AERUGINOSA E ALBUMINA BOVINA

Santos, R.R. dos; Caron, L.F.; Gonçalves, M.L.L.; Sierakowsk, M.R; Ferreira, C.E.O.; Ono, L..
Arq. Inst. Biol.; 78(4)2011.
Artigo em Português | VETINDEX | ID: vti-759892

Resumo

ABSTRACT Pseudomonas aeruginosa is an etiologic agent of opportunistic infections mainly in immunocompromised patients. Its inherent feature of developing resistance to a wide range of antibacterial agents make it a critical point in infection control. In animals, problems with multidrug resistance occur in otitis, cystitis, uveo-conjunctivitis, endometritis and mastitis, and there is no commercially available vaccine. With the aim of improving its immunogenicity, the lipopolysaccharide (LPS) antigen was coupled to bovine serum albumin (BSA) with .-periodate as the reductive agent. The conjugation was evaluated by gel-permeation chromatography, by quantitating total sugar and protein, and both LPS and BSA were detected in similar proportions. The immunization of mice with LPS-BSA conjugate vaccine resulted in an agglutinating antibody response against P. aeruginosa lower than that obtained for a mixture of free LPS and BSA. They were 65% and 86% lower in the 6th and 10th weeks after the hyperimmunization procedure, respectively. This indicates that the conjugation reaction resulted in an immunogenic product, however its quality should be improved.
RESUMO A Pseudomonas aeruginosa é agente etiológico de infecções oportunistas, principalmente em pacientes imunocomprometidos. Suas características inerentes em desenvolver resistência aos mais variados tipos de antibacterianos a torna um ponto crítico no controle de infecções. Em animais, os problemas com multirresistência ocorrem principalmente em casos de otite, cistite, úveo-conjuntivite, endometrite e mastite, não havendo vacina comercialmente disponível. No intuito de melhorar a imunogenicidade desse antígeno, foi testada a técnica de conjugação do lipopolissacarídeo (LPS) de P. aeruginosa à albumina bovina (BSA) por aminação redutiva direta utilizando .-periodato de sódio. A conjugação foi avaliada por cromatografia de gel-permeação, dosando-se açúcar e proteína totais, e tanto o LPS quanto a BSA foram identificados em proporções semelhantes. A imunização de camundongos com a vacina conjugada LPS-BSA conferiu títulos de anticorpos aglutinantes contra P. aeruginosa inferiores aos obtidos com a mistura de LPS e BSA livres. Foram 65% e 86% menores na 6ª e na 10ª semanas após o procedimento de hiperimunização, respectivamente. Isto indica que a reação de conjugação resultou em um produto imunogênico, porém, sua qualidade precisará ser melhorada.
Biblioteca responsável: BR68.1