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Ultrastructural evaluation of human keratinocyte growth and differentiation on a fibrin substrate / Avaliação ultraestrutural do crescimento e da diferenciação de queratinócitos sobre um substrato de fibrina
Tanikawa, Daniela Yukie Sakai; Alonso, Nivaldo; Herson, Marisa Roma; Mathor, Monica Beatriz; Caldini, Elia Garcia; Lourenço, Silvia Vanessa; Ferreira, Marcus Castro.
Afiliação
  • Tanikawa, Daniela Yukie Sakai; Universidade de São Paulo. School of Medicine. Department of Surgery, Division of Plastic Surgery. Sao Paulo. Brazil
  • Alonso, Nivaldo; Universidade de São Paulo. School of Medicine. Department of Surgery, Division of Plastic Surgery. Sao Paulo. Brazil
  • Herson, Marisa Roma; Universidade de São Paulo. School of Medicine. Department of Surgery, Division of Plastic Surgery. Sao Paulo. Brazil
  • Mathor, Monica Beatriz; Universidade de São Paulo. Nuclear and Energy Research Institute. Radiation Technology Center. Sao Paulo. Brazil
  • Caldini, Elia Garcia; Universidade de São Paulo. School of Medicine. Cell Biology Laboratory. Sao Paulo. Brazil
  • Lourenço, Silvia Vanessa; Universidade de São Paulo. School of Medicine. Department of General Pathology. Sao Paulo. Brazil
  • Ferreira, Marcus Castro; Universidade de São Paulo. School of Medicine. Department of Surgery. Division of Plastic Surgery. Sao Paulo. Brazil
Acta cir. bras. ; 25(6): 541-548, Nov.-Dec. 2010. ilus, graf, tab
Article em En | VETINDEX | ID: vti-7785
Biblioteca responsável: BR68.1
Localização: BR68.1
ABSTRACT

PURPOSE:

In order to circumvent several difficulties that have been met in the routine use of the in vitro keratinocyte cultures using the standard procedure described by Rheinwald and Green, and obtain a more resilient and the least possible immunogeneic skin substitute for a future clinical application, this work studied a new keratinocyte culture system, which envisages the utilization of a fibrin substrate in association with high densities of human keratinocytes.

METHODS:

Through light and transmission electron microscopy and immunohistochemical assays, long-term proliferative and differentiative characteristics of keratinocytes cultured onto a fibrin gel under immerse and air-liquid interface culture conditions were evaluated.

RESULTS:

Despite the absence of a dermal substitute, the results demonstrated that the proposed composite was constituted of a transparent and elastic fibrin film covered by a well-attached, multistratified epithelium with morphological characteristics that resemble human epidermis, including the neoformation, albeit incomplete, of the basement membrane.

CONCLUSIONS:

Increased mechanical resistance due to the presence of an easy handling substrate, the delivery of nonclonfluent keratinocytes as well as the removal of animal-derived cells from the culture system suggest its potential use for future transplantation purposes.(AU)
RESUMO

OBJETIVO:

Com o intuito de contornar diversas dificuldades encontradas no uso rotineiro de queratinócitos cultivados in vitro pela técnica descrita por Rheinwald e Green, e obter um substituto cutâneo mais resistente e o menos imunogênico possível para futuras aplicações clínicas, este trabalho avaliou um novo sistema de cultura de queratinócitos que prevê a utilização de um substrato de fibrina em associação com queratinócitos humanos em alta densidade.

MÉTODOS:

Através de microscopia óptica e eletrônica e análise imunohistoquímica, foram avaliadas as características proliferativas e de diferenciação em longo prazo de queratinócitos cultivados em condição imersa e na interface ar-líquido.

RESULTADOS:

Apesar da ausência de um substituto dérmico, foi demonstrado que o composto proposto constituiu-se de um substrato de fibrina transparente e elástico coberto por epitélio multi-estratificado, bem aderido, com características morfológicas semelhantes à epiderme humana, incluindo a neo-formação, embora incompleta, da membrana basal.

CONCLUSÕES:

A maior resistência mecânica com a presença de um substrato de fácil manuseio, a possível liberação de queratinócitos não-confluentes, e a remoção de células com origem animal dos sistemas de cultura sugerem que o composto proposto neste estudo apresenta grande potencial para uso clínico futuro.(AU)
Assuntos
Palavras-chave

Texto completo: 1 Base de dados: VETINDEX Idioma: En Revista: Acta cir. bras. Ano de publicação: 2010 Tipo de documento: Article

Texto completo: 1 Base de dados: VETINDEX Idioma: En Revista: Acta cir. bras. Ano de publicação: 2010 Tipo de documento: Article