Portal de Pesquisa da BVS Veterinária

Fortaleza; s.n; 01/05/2012. 235 p.

Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-117

Resumo

Esse estudo teve como objetivos: 1) quantificar os níveis de RNAm para os receptores de kit ligand (KL) e proteína morfogenética óssea 15 (BMP-15) em folículos ovarianos caprinos utilizando RT-PCR em tempo real; 2) investigar o papel do KL, associado ou não ao hormônio folículo estimulante (FSH) em meio dinâmico, sobre a sobrevivência, ativação e crescimento de folículos pré-antrais caprinos cultivados in situ; 3) avaliar os efeitos do KL e da BMP-15 sobre a sobrevivência, formação de antro e crescimento in vitro de folículos secundários caprinos isolados, bem como sobre a retomada da meiose de seus oócitos. [...] Verificou-se ainda níveis maiores de RNAm para o receptor tipo I da BMP-15 (BMPRIB) nas células da granulosa/teca de grandes folículos antrais em comparação àquelas de pequenos antrais. Após 16 dias de cultivo in situ, observou-se que o meio dinâmico contendo KL até o dia 8 e FSH do dia 8 ao dia 16 manteve a integridade ultraestrutural e induziu a ativação e o crescimento folicular. Quanto aos folículos isolados, a adição de 50 e/ou 100 ng/mL de KL ao cultivo, na ausência de FSH, promoveu a sobrevivência e melhorou a formação de antro, crescimento oocitário e retomada da meiose após 18 dias. Já 50 ng/mL de BMP-15 manteve a ultraestrutura e estimulou a formação de antro e o crescimento de folículos isolados. Em conclusão, os resultados deste estudo mostraram que os RNAm para c-kit, BMPRIB e BMPRII foram detectados em todas as categorias foliculares e tipos celulares investigados. A utilização de KL e FSH de forma dinâmica em cultivo in situ, bem como de KL (50 e/ou 100 ng/mL) e BMP-15 (50 ng/mL) em cultivo de folículos secundários isolados, promoveu a manutenção da sobrevivência folicular e o desenvolvimento de folículos pré-antrais caprinos.(AU)

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The aims of this study were: 1) to quantify the mRNA levels for kit ligand (KL) and bone morphogenetic protein 15 (BMP-15) receptors in goat ovarian follicles by real time RT-PCR; 2) to investigate the role of KL alone or associated with follicle stimulating hormone (FSH) in a dynamic medium on the survival, activation and growth of goat preantral follicles cultured in situ; 3) to evaluate the effects of KL and BMP-15 on the in vitro survival, antrum formation and growth of goat isolated secondary follicles, and on the meiotic resumption of their oocytes. [...] Moreover, higher mRNA levels were observed for ckit in cumulus-oocyte complexes from small and large antral follicles compared with their respective granulosa/theca cells, which also occurred for BMPRII in the large antral follicles. Higher mRNA levels were also seen for BMP-15 type I receptor (BMPRIB) in the granulosa/theca cells from large antral follicles compared with those from small antral follicles. After 16 days of in situ culture, the dynamic medium containing KL until day 8 and FSH from day 8 to day 16 maintained the ultrastructural integrity and induced activation and follicular growth. For the isolated follicles, the addition of 50 and/or 100 ng/mL of KL to the culture, in the absence of FSH, promoted follicle survival and improved antrum formation,oocyte growth and meiotic resumption after 18 days. BMP-15 (50 ng/mL) maintained the ultrastructure and stimulated antrum formation and growth in isolated follicles. In conclusion, the results of this study showed that mRNAs for c-kit, BMPRIB and BMPRII were detected in all follicular categories and cellular types investigated. The use of KL and FSH dynamically in in situ culture, and the use of KL (50 and/or 100 ng/mL) and BMP-15 (50 ng/mL) in culture of isolated secondary follicles, promoted the maintenance of follicular survival and the development of caprine preantral follicles.(AU)

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