Efeito do hormônio de crescimento (gh) e do fator de crescimento semelhante à insulina i (igf-i) no desenvolvimento in vitro de folículos pré-antrais e perfil de expressão gênica em folículos secundários e antrais iniciais em caprinos

RESUMO

[...] Após 16 dias de cultivo in situ, observou-se que a associação de IGF-I e FSH durante todo o período de cultivo, bem como o meio sequencial contendo FSH até o dia 8 e GH do dia 8 ao dia 16 manteve a integridade ultraestrutural e a expressão de RNAm para FSHR, induziu a ativação, o crescimento folicular e a formação de folículos secundários. Na Fase III, para a espécie caprina e ovina, um maior percentual de folículos viáveis, taxa de formação de antro e oócitos destinados à MIV foram observados na troca de meio de cultivo a cada 2 e 6 dias, respectivamente. Nas Fases IV e V, a adição de IGF-I e GH ao cultivo promoveu a sobrevivência e melhorou a formação de antro, crescimento oocitário e retomada da meiose. Além disso, o GH resultou na produção de um embrião. A análise de microarranjo mostrou que existem importantes genes que são específicos para cada categoria folicular estudada (folículos secundários e terciários). Em conclusão, para caprinos e ovinos recomenda-se que o intervalo de troca de meio seja a cada 2 9 dias e 6 dias, respectivamente. A utilização de FSH e GH de forma sequencial e a associação de IGF-I e FSH em cultivo in situ, bem como a adição de IGF-I e GH em cultivo de folículos secundários isolados, promoveu a manutenção da sobrevivência e o desenvolvimento folicular, com o GH proporcionando a produção embrionária. O perfil de expressão gênica diferiu entre folículos secundários e terciários.(AU)

ABSTRACT

[...] After 16 days of in situ culture, the association of IGF - I and FSH during the entire culture period, as well as the sequential medium containing FSH until day 8 and GH from day 8 to day 16, maintained ultrastructural integrity and induced activation, follicular growth and seconda ry follicle formation. In Phase II I, for the caprine and ovine species, higher percentages of viable follicles, antrum formation and oocytes acceptable for IVM were observed when the medium was replaced every 2 and 6 days, respectively. In phases IV and V, the addition of IGF - I and GH, respectively, to the culture medium promoted follicle survival and improved antrum formation, oocyte growth and meiotic resumption. Moreover, 50 ng/mL of GH resulted in embryo production. The microarray analysis showed import ant genes specific to each category analyzed (secondary and tertiary follicles). In conclusion, for isolated caprine and ovine preantral follicles, it is recommended medium replacement at intervals of two and six days, respectively. The use of FSH and GH i n a sequential medium for in situ culture, as well as the association of IGF - I and FSH for a long - term in situ culture, and the use of IGF - I and GH for the culture of isolated secondary follicles, promoted the maintenance of follicular survival and the development of caprine preantral follicles, with GH resulting in embryo production. The gene expression profile differed between secondary and tertiary follicles.(AU)