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Comparação do método microbiológico e qPCR na quantificação de Salmonella spp. nas diversas etapas do abate de aves e sob simulação do varejo

Yamatogi, Ricardo Seiti.
Botucatu,; s.n; 03/08/2012. 90 p.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-1376

Resumo

O presente trabalho teve como objetivo avaliar a técnica da PCR em tempo real após a etapa de pré-enriquecimento (qPCR) em relação ao Método Microbiologia Convencional (MMC) na detecção e quantificação de Salmonella spp. em carcaças de frangos naturalmente ou artificialmente contaminadas. Alem disso, foi possível realizar a identificação sorológica e avaliação de resistência antimicrobiana nas cepas isoladas. No total, foram avaliadas 33 amostras de diferentes lotes de produção, tendo sido colhidas ainda na indústria em três pontos: Pós-Sangria (PS), Pós depenagem (PD), Pós Chiller (PC) e amostras embaladas estocadas a 5°C por 72 horas classificadas como Simulação do Varejo (SV), sendo durante todo o processo, a mesma carcaça utilizada para todos os pontos. Do total de amostras contaminadas por Salmonella spp., 33 (100%) foram oriundas da pós sangria, 13 (39%) pós-depenagem, 19 (58%) pós-chiller e 10 (30%) da simulação do varejo. Na avaliação qualitativa (ausência e presença) a MMC mostrou-se numericamente mais eficiente, mas sem diferença significativa entre as técnicas testadas. Quantitativamente a qPCR apresentou um desempenho melhor. Realizando a concordância entre os métodos testados destacamos Especificidade de 96%, Sensibilidade de 79%, e Prevalência de 23,5% na análise qualitativa e Especificidade de 90%, Sensibilidade de 92% e Prevalência de 28,7% na análise quantitativa. Observou-se ainda que as cepas mais encontradas neste trabalho foram S. Mbandaka, S. Senftenberg e S. Enteritidis. Na análise do antibiograma as cepas apresentaram maior resistência ao ácido nalidixico, com alta significância (P<0,05) e observou-se também a presença de 5 cepas Multi Drogas Resistentes
This study aimed to evaluate the use of real-time PCR after pre-enrichment (qPCR) against the Traditional Method Microbiology (MMC) on the detection and quantification of Salmonella spp. in naturally and artificially contaminated broilers carcasses. In addition, serological identification and evaluation of antimicrobial resistance in positive strains was observed. In total, 33 samples from different production batches were evaluated and taken in the industry in three points: Post-Bleeding (PS), After plucking (PD) Post Chiller (PC) and packed samples stored at 5°C for 72 hours, classified as Retail Simulation (SV), and using the same carcass for evaluation in all points, during the whole process. Out of the total analyzed samples, (33) 100% after bleeding, (13) 39% post-plucking, 19 (58%) post-chiller and 10 (30%) of retail simulation were contaminated by Salmonella spp. The qualitative assessment (presence and absence) MMC showed a little more efficiency but no significant difference between the techniques tested. Quantitatively qPCR showed a better performance. The correlation between the tested methods highlights qualitatively a specificity of 96%, sensitivity of 79%, and prevalence of 23.5%; specificity of 90%, sensitivity of 92% and prevalence of 28.7% in the quantitative analysis. It was also observed that the most commonly strains found in this study were S. Mbandaka, S. Senftenberg and S. Enteritidis and among the antibiotics tested nalidixic acid was the most resistant with high significance (P <0.05) and the presence of 5 Multi Drug Resistant strains was observed
Biblioteca responsável: BR68.1