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Expressão gênica, produção de ROS e atividade enzimática em função de suplementação de metionina e estresse térmico em aves

Vesco, Ana Paula Del.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-1897

Resumo

A taxa de crescimento das aves está atrelada à eficiência alimentar e a deposição de massa muscular bem como, às condições ambientais a que os animais são expostos. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o ganho de peso e conversão alimentar das aves, a expressão de genes mitocondriais participantes da síntese de energia, mRNA UCP (proteína desacopladora), mRNA ANT (transportador de nucleotídeos de adenina) e mRNA COXIII (citocromo c oxidase subunidade III), e a expressão de genes envolvidos no crescimento animal, mRNA GHR (receptor do hormônio do crescimento) e do IGF-I (fator de crescimento semelhante a insulina I) no fígado e músculo do peito de frangos de corte, alimentados com dietas contendo duas fontes e dois níveis de suplementação de metionina, e avaliar a influência do estresse térmico agudo sobre a produção de ROS mitocondrial e atividade da enzima glutationa peroxidase no fígado de codornas de corte. Foram utilizados frangos de corte de 22 a 42 dias de idade distribuídos em cinco tratamentos (dieta basal, primeiro nível de suplementação de DLmetionina, segundo nível de DL-metionina, primeiro nível de MHA-FA e segundo nível de MHA-FA). Ao final do período experimental, as aves foram abatidas por deslocamento cervical, o músculo do peito e fígado foram coletados para extração do RNA total. O cDNA foi amplificado usando primers específicos para os genes analisados pela qRT-PCR. Foram mais eficientes na conversão alimentar as aves que receberam suplementação do segundo nível de suplementação de metionina, independente da fonte comercial utilizada. Já, o melhor ganho de peso foi observado no segundo nível de suplementação de DL-metionina. Foi observado significativamente menor quantidade de mRNA UCP no músculo dos animais que consumiram dieta com adição de metionina, sendo a maior expressão deste gene observada para dieta basal, tratamento que também foi responsável pela pior eficiência alimentar. A expressão de mRNA UCP no fígado, e de mRNA COX III e mRNA ANT no fígado e no músculo não sofreram ação da suplementação de metionina. A expressão dos genes GHR e IGF-I no músculo não sofreu influência da suplementação de metionina. Entretanto, no fígado, foi observada diferença significativa entre os tratamentos basal e segundo nível de DLmetionina sobre a expressão de mRNA GHR. Os animais que receberam esse nível de suplementação apresentaram maior expressão do gene. A expressão de IGF-I no fígado foi maior para animais que receberam suplementação de metionina, comparados à dieta basal. A suplementação do segundo nível de DL-metionina também levou à maior expressão em relação àqueles animais alimentados com o primeiro nível de suplementação de DL-metionina (1,56 UA vs 0,97 UA). A suplementação de metionina melhorou o ganho de peso e a eficiência alimentar, como era esperado, em parte, por influenciar a expressão de genes envolvidos nestas características. Para avaliação da produção de ROS e da atividade da enzima glutationa peroxidase, aos 30 dias de idade, codornas de corte foram divididos em dois grupos: os animais pertencentes ao tratamento termoneutro foram abatidos imediatamente e o segundo grupo foi submetido ao estresse térmico de 34oC por 24 horas. Para análise de produção de ROS, foram coletados os fígados para isolamento de mitocôndrias e subsequente análise de ROS mitocondrial. Atividade da enzima glutationa peroxidase foi determinada utilizando peróxido de hidrogênio (H2O2), e baseada na quantidade de NADPH oxida
Biblioteca responsável: BR68.1