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Padronização de técnicas de diagnóstico em virologia utilizando ovos embrionados de codorna como modelo biológico

RAULENE RODRIGUES LOBO.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-200235

Resumo

Os ovos embrionados de codorna podem ser utilizados para inoculação de diversos tipos de vírus, por diferentes vias, como técnicas já conhecidas e aplicadas em ovos embrionados de galinha (Gallus domesticus) com algumas adequações. Podem ser atribuídas vantagens a esse processo, tais como: custo menor de produção, redução do tempo de incubação, necessidade de menor espaço físico e, talvez a mais importante, ser de uma espécie diferente do Gallus domesticus e desta forma não ser portadora de antígenos e anticorpos de interesse na avicultura comercial moderna, não interferindo no diagnóstico e na replicação viral. Para avaliar o potencial de replicação viral, foram utilizados 351 ovos embrionados de codorna de casca branca (Coturnix coturnix japonica) da linhagem NISSEI e amostras dos vírus que acometem aves (Vírus da Doença de Newcastle, Avipoxvírus e Vírus da Bronquite Infecciosa das Galinhas) e também em outras espécies como Vírus da Influenza Equina. Nos ovos inoculados com o vírus de Newcastle foi coletado o liquido alantoíde para a realização do teste de HA, que apresentou melhor resultado no tempo de 72 horas com o volume de 100l. Na inoculação do vírus da Varíola Aviária foram coletadas as membranas corioalantoídes para analisar as les es pox e an lise histopatol gica, sendo que todos os volumes utilizados (20, 40, 80 e 100l) apresentaram lesões características desta enfermidade. Nos vírus da Bronquite Infecciosa das Galinhas, de todos os volumes utilizados, somente o de 40l produziu lesões no embrião, como nanismo e enrolamento. A replicação do vírus Influenza Equina, assim como aconteceu com o VDN, foi dependente da concentração e o tempo de incubação, sendo o melhor tempo o intervalo de 48 horas, utilizando o volume de 40l. Os ovos embrionados de codornas de casca branca também foram utilizados para testar a viabilidade de uso em cultivo primário de fibroblastos, sendo que os mesmos permaneceram viáveis após quatro passagens in vitro. Este modelo biológico foi eficiente para replicação do vírus da doença de Newcastle, vírus da Varíola Aviária, vírus da Bronquite Infecciosa das Galinhas e vírus da Influenza Equina. Estes embriões se mostraram aptos também para serem utilizados em cultivo primário de fibroblastos.
The embryonated quail eggs may be used for inoculation of different virus types, by different ways, such as known and applied techniques in embryonated chicken eggs (Gallus domesticus) with some adjustments. Advantages can be attributed to this process, such as: lower production costs, reducinge the time of incubation, less physical space needed, and, perhaps the most important, it is from a different species of Gallus domesticus and thus not being a carrier of antibodies or antigens of interest in modern commercial poultry production, not interfering in the diagnosis and viral replication. For assess the potential for viral replication, we used 351 embryonated white bark quail eggs (Coturnix coturnix japonica) of NISSEI strain and samples of virus affecting birds (Newcastle Disease Virus, Avipoxvirus and Infectious Bronchitis Virus) and also in other species such as Equine Influenza Virus. From the eggs inoculated with Newcastle virus allantoic fluid was collected for HA test, which showed better results in time of 72 hours with a volume of 100 l. In inoculation of virus Fowlpox the chorioallantoic membranes were collected to analyze the pox lesions and histopathological analysis and all the volumes used (20, 40, 80 and 100l) showed characteristic lesions of the disease. In the Infectious Bronchitis virus of chickens, of all volumes used, only 40l produced embryo lesions presented as nanism and winding. Replication of Influenza Equine virus such as NDV was dependent on the concentration and the incubation time, and the best range was 48 hours, using the volume of 40l. The white bark quail embryonated eggs were also used to test its feasibility of use in primary culture of fibroblasts, and they kept viable after four in vitro passages. These biological model was efficient for replication of the virus of Newcastle disease, Avian pox virus, infectious Bronchitis virus of chickens and Equine Influenza. These embryos also proved apt to be used in primary culture fibroblasts.
Biblioteca responsável: BR68.1