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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-200237

Resumo

O tumor venéreotransmissívelcanino (CTVT) é um câncertransmissívelquepropaga-se, naturalmente, entre oscãespelatransferênciaalogênica de célulastumorais, principalmente, durante o coito. Trata-se da maisantigalinhagemtumoralconhecidananatureza e uma de suascaracterísticasmarcantes é a habilidade de se desenvolver e se evadir da rejeiçãoimunológica, comoenxertoalogênico, apesar da estrita e contínuavigilância do sistemaimunológico. Há a hipótese de que as células do CTVT nãoexpressam MHC-II, como um mecanismo de escape à detecçãoimune, e que a positividadedetectadaemmuitasamostrastumoraispossaseratribuída à infiltração de células do hospedeiro no sítio do tumor. Objetivou-se avaliaraexpressãogênica e proteica e a caracterizaçãogenotípica do loco DLADQA-1 (MHC-II) emtumoresvenéreostransmissíveis de ocorrênciaespontâneaemcães. Adicionalmente, detectarainteração entre anticorposséricos e antígenostumoraisespecíficos do CTVT. Para tanto, foramincluídosnesteestudo 20 cãesprovenientes de São José do Rio Preto, São Paulo, Brasil, com CTVT de ocorrência natural. As amostrastumoraisforamcoletadas antes do tratamentoquimioterápico (M1) e trêssemanasapós o início da quimioterapia (M2). Aanálise de expressãogênicafoirealizadapelométodo de qPCR e de expressãoproteica de CD3, CD79, MAC387, Ki67 e MHC-II, pelométodo de imuno-histoquímica. Foirealizadosequenciamentoporcapilaridadeparacaracterizaçãogenotípica e estudo dos antígenostumoraispelatécnica de Western Blotting. Amostras de CTVT e de seushospedeirosprovenientes de outros paísesforamempregadosparaestudoscomparativos.Foiobservadadiferençasignificativa de célulasimunomarcadaspara MHC-II e CD3 entre M1 e M2 detectando-se maiorexpressãoem M2.Nãohouveexpressãogênica de DLADQA-1 emnenhumaamostra de CTVT em M1 e M2. O elevadograu de semelhançagenotípica do loco DLADQA-1 entre as amostrastumorais, as quaisdiferem de seusrespectivoshospedeiros, condizcom a origem clonal destaneoplasia. Nãohouvediferençasignificativa entre osgenótipos de DLADQA-1 entre osanimaishospedeiros e controle. As bandasproteicasdetectadasem CTVTs emdiferentestumores de cães do Brasil e emamostrasoriundas de diferentesregiõesgeográficastambémforamdetectadasemlíngua de cão com CTVT e de outro cãocontrole, tornandoassimindefinido se as bandasdetectadas no atualestudosãoespecíficaspara a neoplasiaemquestão.

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The canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a transmissible cancer that is spread between dogs by the allogeneic transfer of living cancer cells during coitus. It is the oldest cancer lineage known in nature and one of the most remarkable features of CTVT is its ability to develop and evade the immune rejection, as an allogeneic graft, despite the strict and continuous surveillance of the immune system. It has been hypothesized that CTVT cells do not express MHC-II as an escape mechanism to immune detection, and MHC-II positivity detected in tumor samples can be attributed to infiltrating host cell at the tumor site. The aims of this study were: evaluate gene and protein expression and genotypic characterization of DLADQA-1 locus (MHC-II) in spontaneous transmissible venereal tumours in dogs. Additionally, to detect the interaction between serum antibodies and specific tumor antigens of CTVT. For this, 20 dogs from São José do Rio Preto, São Paulo, Brazil with naturally occurring CTVT were included and samples were collected before chemotherapy (M1) and three weeks after starting chemotherapy (M2). The gene expression analysis was performed by qPCR method and protein expression of CD3, CD79, MAC387, Ki67 and MHC-II by immunohistochemistry method. Sequencing was performed by capillary method and the study of tumor antigens by the Western Blotting technique. CTVT samples and their hosts from other countries have been used for comparative studies. Significant differences were observed in MHC-II and CD3 immunostained cells between M1 and M2 with higher expression in M2. There was no gene expression of DLADQA-1 in any sample of CTVT in M1 and M2. The genotypic similarity between tumor samples, which differ from their respective hosts, is consistent with a clonal origin of this tumour. There was no significant difference between the genotypes of hosts and control dogs. The detection of two protein bands in different CTVT from Brazil and samples from different geographic regions were also detected in tongue of CTVT dog and another control dog. Therefore, it unclear whether the bands which were identified in this study are specific from the cancer in question.

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