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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-201869

Resumo

Os ovinos da raça Santa Inês naturalizados no Brasil e provenientes do cruzamento das raças Morada Nova e Bergamácia apresentam variações na cor de pelagem. Desta forma, esta raça é um modelo interessante para avaliar os efeitos de polimorfismos dos genes que afetam essa característica fenotípica. O gene MC1R é um dos responsáveis por essas variações. O objetivo deste trabalho foi estudar os parâmetros fisiológicos e as temperaturas superficiais corporais e suas variações de acordo com o sexo, a idade e a cor de pelagem em ovinos da raça Santa Inês e descrever a variação em três locus do gene MC1R visando estudos de correlação com a caracteristica fenotípica cor da pelagem. Foram avaliados 53 ovinos da raça Santa Inês, monocoloridos e multicoloridos, criados na região Norte do Rio de Janeiro. Parâmetros fisiológicos como: frequência cardíaca, respiratória, temperatura retal e as temperaturas superficiais do corpo foram medidas no período da tarde (13-15h), no mês de fevereiro/2014. Para a análise molecular foram utilizados 121 ovinos da raça Santa Inês, multicoloridos e monocoloridos, criados no estado de São Paulo, norte do estado do Rio de Janeiro e sul do estado do Espírito Santo. O DNA foi extraído dos bulbos de pelos coletados da porção final da cauda dos animais. A genotipagem dos três SNPs foram realizadas a partir da reação em cadeia de polymerase-restrição de fragmentos polimórficos (PCR-RFLP) avaliada com as enzimas de restrição AciI, NlaIII e BmgBI no gene MC1R. Observou-se diferenças no peso em relação ao sexo e à idade dos animais avaliados. A idade apresentou diferença na frequência cardíaca e na temperatura, sendo que as fêmeas apresentaram maior temperatura de cernelha que os machos. De acordo com a classificação de estresse pela frequência respiratória dos animais avaliados, 47% estavam sob estresse baixo, 11,3% sob estresse médio-alto e 3,77% apresentaram alto nível de estresse ao calor. Não foi possível verificar influência da cor de pelagem sobre os parâmetros fisiológicos. Os ovinos da raça Santa Inês apresentaram a frequência respiratória quantificada pela severidade do estresse ao calor nos machos de cor preta ou castanha. O genótipo homozigoto para o alelo sem o SNP (selvagem) foi de 75% no locus Aci1-MC1R e 25% para heterozigoto, com apenas um cromossomo apresentando SNP (mutante). A frequência do alelo mutante nesse locus foi de 12,6%. O locus Nla1-MC1R apresentou 37% do genótipo homozigoto selvagem, 23% do genótipo homozigoto mutante e 40% do genótipo heterozigoto, com a frequência de 42,8% para o alelo mutante. O locus Bmg3-MC1R apresentou 20% do genótipo homozigoto selvagem, 12% do genótipo homozigoto mutante e 68% do genótipo heterozigoto, com a freqüência de 45,8% para o alelo mutante. Para a realização das associações dos fenótipos aos genótipos foi utilizado o programa Prism 6 for Mac OS X, no qual os alelos do locus Aci1-MC1R, em que o alelo (T) está associado com a cor de pelagem preta, o genótipo (CT) aumenta em 10.76 vezes a probabilidade do animal ter pelo preto (p<0,0001). No locus Nla1-MC1R, o alelo (A) está associado com a cor de pelagem preta, sendo que o genótipo (TT) aumenta em 4,688 vezes a probabilidade de serem multicoloridos (p<0,0016). E no locus Bmg3-MC1R, onde o alelo (A) está associado com a cor de pelagem preta, com o genótipo (AG) aumentando em 19,92 vezes a probabilidade de serem multicoloridos (p<0,0001). As mutações alélicas nos locus estudados indicariam a presença de variabilidade da cor de pelagem dos animais avaliados.

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The breed sheep Santa Inês naturalized in Brazil comes the crossing of breeds Morada Nova and Bergamacia present variations in coat color. This fact makes this breed an interesting model to evaluate the effects of polymorphisms in genes that affect this phenotypic trait. The MC1R gene is responsible for variations on this characteristic. The objective of this work was to study the physiological parameters and body surface temperatures and its variations according to body weight, sex, age and coat color in sheep Santa Ines and describe the variation in three MC1R gene locus correlation studies aimed phenotype (coat color). Were evaluated 53 sheep Santa Inês monocolored and multicolored created in the North of Rio de Janeiro. Physiological parameters measures were heart rate, respiratory, and rectal temperature as superficial body temperatures were taken at afternoon period (13-15pm) at February month. For molecular analysis, were used 121 sheep Santa Inês, multicolored and monocolored, created in São Paulo, north of the State of Rio de Janeiro and southern Espirito Santo. The DNA was extracted from those bulbs collected from the animal tail. Genotyping of SNPs three were made from the reaction polymerase chain - Restriction of polymorphic fragments (PCR-RFLP) as evaluated with restriction enzymes, (Acil, NlaIII and BmgBI) in the MC1R gene. It was found differences in the body weight when compared the sex and age of the animals. The age difference showed as the heart rate. Females had higher temperature withers than males. According with the stress classification for respiratory frequency of the animals evaluated, 47% shown stress down, 11.3% medium-high stress and 3.77% had a high level of stress to heat. We found that there is a coat color Influence on the physiological parameters. Were described allelic mutations in the locus studied in addition to this a fee crescent gene heterozygosity. It was shown that the homozygous genotype for the allele without SNP (wild) was 75% in Aci1-MC1R locus and 25% heterozygous, with only one chromosome presenting the SNP (mutated). The frequency of the mutant allele in this locus was 12.6%. The Nla1-MC1R locus showed 37% of the wild homozygous genotype, 23% of homozygous mutant genotype and 40% of the heterozygous genotype, with the frequency of 42.8% for the mutant allele. The Bmg3-MC1R locus showed 20% of the wild homozygous genotype, 12% of homozygous mutant genotype and 68% of the heterozygous genotype, with the frequency of 45.8% for the mutant allele. To carry out the associations of phenotypes to genotypes was used Prism 6 program for Mac OS X where to alleles of the MC1R locus Aci1-MC1R , where the allele (T) is associated with the color black coat , the genotype (CT) increases by 10,76 times the likelihood of the animal having the black (p<0,0001). In Nla1-MC1R locus allele (A) is associated with the black coat color, the genotype (TT) increases by 4,688 times the likelihood of multicolor (p<0,0016). And Bmg3-MC1R locus where the allele (A) is associated with the black coat color , the genotype (AG) 19,92 times in the likelihood of multicolor (p<0,0001). Allelic mutations have been described in the studied locus that would indicate the presence of the color coat variability of animals evaluated.

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