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GENOTIPAGEM DE POLIMORFISMOS DA PROTEÍNA PRIÔNICA POR PCR EM TEMPO REAL EM OVINOS CRIADOS NO ESTADO DE SÃO PAULO

YASMIN EL HAYEK.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-202368

Resumo

O Scrapie é uma doença neurodegenerativa progressiva de ovinos e caprinos adultos, foi descoberta há mais de 200 anos e faz parte das Encefalopatias Espongiformes Transmissíveis. É caracterizado por um acúmulo anormal da proteína priônica (PrP), derivada de um hospedeiro, não possui tratamento, levando a morte. Os polimorfismos nos códons 136, 154 e 171 possuem associação com a suscetibilidade ou resistência ao Scrapie clássico. A combinação dos polimorfismos nesses códons sugerem que VRQ e ARR são antagonistas na determinação da suscetibilidade a doença, O haplótipo 136A/154R/171R (ARR) confere resistência, sendo os indivíduos homozigotos os mais resistentes, já o haplótipo VRQ confere suscetibilidade. Esse trabalho teve como objetivo categorizar e padronizar os genótipos obtidos em animais resistentes susceptíveis, utilizando o método Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (q-PCR). Observou-se após a análise dos resultados que das 125 amostras coletadas, apenas 94 apresentaram resultados após a reação. Foram encontrados 4 alelos (ARQ, ARR, AHQ e VRQ) e 6 genótipos, sendo ARR/ARR, ARR/ARQ, ARQ/ARQ, ARQ/AHQ, AHQ/AHQ e ARQ/VRQ. Utilizando a classificação de risco de Dawson (1998), 6 animais se enquadram na categorização R1 (extremamente resistente), 15 animais são R2 (resistentes), a maioria dos animais se enquadram em R3 (65) apresentando leve resistência, nenhum (0) em R4 (suscetível) e 8 animais sendo R5 (altamente suscetível). O método de genotipagem q-PCR é eficiente para o gene PRNP, sendo uma técnica rápida, com custo relativamente baixo para um número alto de amostras, e com muita especificidade na reação, mostrando assim, que no rebanho testado, a grande maioria dos animais apresentam maior susceptibilidade ao desenvolvimento da doença, e poucos são resistentes.
The Scrapie is a progressive neurodegenerative disease of sheep and goats adults, was discovered over 200 years and is part of Transmissible Spongiform Encephalopathies. It is characterized by abnormal accumulation of prion protein (PrP) derived from a host, it has no treatment, leading to death. Polymorphisms at codons 136, 154 and 171 have association with susceptibility or resistance to classical scrapie. The combination of polymorphisms in these codons suggest that VRQ and ARR are antagonists in determining susceptibility to disease, the haplotype 136A / 154R / 171R (ARR) conferring resistance, and the homozygous the toughest since the VRQ haplotype confers susceptibility. This study aimed to categorize and standardize the genotypes obtained in susceptible resistant animals using the method Reaction Polymerase Chain Realtime (q-PCR). It was observed after analyzing the results of the 125 samples collected, only 94 had results after the reaction. Found 4 alleles (ARQ, ARR, AHQ and VRQ) and 6 genotypes, being ARR / ARR ARR / ARQ, ARQ / ARQ, ARQ / AHQ, AHQ / AHQ and ARQ / VRQ. Using Dawson risk classification (1998), 6 animals fall in the categorization R 1 (extremely tough), 15 animals are R2 (resistance), the majority of animals fall into R3 (65) exhibiting light resistance, no (0) in R4 (susceptible) and 8 animals being R5 (highly susceptible). The genotyping method qPCR is effective for the PRNP gene, and a rapid technique with relatively low cost for a high number of samples and with great specificity in the reaction, thus showing that the flock tested, the vast majority of animals exhibit greater susceptibility to disease development, and few are resistant.
Biblioteca responsável: BR68.1