PERFIL BIOQUÍMICO DOS SOROS LÁCTEO E SANGUÍNEO DE CABRAS COM MASTITE DE OCORRÊNCIA NATURAL

RESUMO

O estudo teve como objetivo avaliar as alterações da secreção láctea de cabras com mastite mediante o uso do teste da caneca de fundo escuro, California Mastitis Test (CMT), contagem de células somáticas (CCS) e perfil microbiológico, bem como determinar o perfil bioquímico, em especial de proteínas de fase aguda, do soro sanguíneo e soro lácteo de cabras com mastite clínica ou subclínica, de ocorrência natural. Foram constituídos três grupos experimentais compostos de 30 metades mamárias de cabras sadias, com secreção láctea negativa na prova da caneca de fundo escuro, CMT e no exame microbiológico (grupo controle - G1), 30 metades mamárias com secreção láctea negativa ao teste da caneca de fundo escuro, reação moderada (2+) ou intensa (3+) no CMT e positividade no exame microbiológico (Grupo mastite subclínica - G2) e 12 metades mamárias com secreção láctea positiva na prova da caneca de fundo escuro e no exame microbiológico (grupo mastite clínica G3). Após antissepsia dos tetos foram colhidas amostras de leite para CCS, cultura microbiológica e determinação do perfil bioquímico do soro lácteo, inclusive o proteinograma mediante fracionamento em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE), e amostras de sangue venoso para determinação do perfil bioquímico sérico. A contagem automática de células somáticas (CCS) e por contagem microscopia direta foi maior nas amostras de secreção láctea das cabras com mastite subclínica (G2 4.500.000 células/mL e 20.830.000 células/mL, respectivamente) e com mastite clínica (G3 7.500.000 células/mL e 39.100.000 células/mL, respectivamente). Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativa (SCN), Staphylococcus coagulase positiva (SCP), Corynebacterium spp. e Streptococcus spp. foram os microrganismos isolados nas amostras de leite das cabras do G2 e G3. As amostras de soro lácteo das cabras do G2 e G3 apresentaram maiores atividades das enzimas fosfatase alcalina (G2 122 U/L e G3 207 U/L) e gamaglutamiltransferase (G2 483 U/L e G3 571 U/L) e maiores concentrações de albumina (G2 0,18 g/dL e G3 0,29 g/dL), proteína total (G2 1,50 g/dL e G3 1,67 g/dL), cloretos (G2 190 mEq/L e G3 202 mEq/L), ferro (G2 13,4 µg/dL e G3 19,6 µg/dL), sódio (G2 152 mMol/L e G3 181 mMol/L), IgA (G2 3,26 mg/dL e G3 3,65 mg/dL), lactoferrina (G2 111 mg/dL e G3 127 mg/dL), IgG de cadeia pesada IgG-CP (G2 94,9 mg/dL e G3 144 mg/dL), IgG de cadeia leve IgG-CL (G2 73,0 mg/dL e G3 98,4 mg/dL), -caseína (G2 2,13 mg/dL e G3 3,89 mg/dL) e -lactoglobulina (G2 693 mg/dL). As amostras de soro sanguíneo das cabras do G2 e do G3 apresentaram menores concentrações séricas de ureia (G2 56,2 mg/dL e G3 44,2 mg/dL) e de cloretos (G2 110 mEq/L e G3 109 mEq/L), e maiores concentrações de IgA (G3 49,4 mg/dL), ceruloplasmina (G2 30,1 mg/dL e G3 46,9 mg/dL), transferrina (G2 497 mg/dL), IgG-CP (G2 1.307 mg/dL e G3 1,152 mg/dL), IgG-CL (G2 805 mg/dL e G3 723 mg/dL), haptoglobina (G2 52,5 mg/dL e G3 40,2 mg/dL) e 1-glicoproteína ácida (G2 37,7 mg/dL). Conclui-se que a utilização de ferramentas diagnosticas como o uso da caneca de fundo escuro, CMT e a CCS devem ser usadas em conjunto para a avaliação adequada da secreção láctea caprina e sempre que possível junto com o exame microbiológico. O S. aureus é o microorganismo mais isolado neste estudo sendo o 63,3% na secreção láctea das cabras do G2 e 75% do G3, predominando assim os agentes infecciosos contagiosos nas cabras avaliadas. O perfil bioquímico em especial de proteínas de fase aguda (PFA) do soro lácteo se mostrou melhor indicador clínico nos quadros de mastites clínica é subclínica que o perfil químico sanguíneo. Finalizando, ressalta-se que as proteínas de peso molecular 39.000 Da e 19.000 Da, foram identificadas somente no soro lácteo de cabras do G3, podendo ser considerado como um marcador de mastite clínica.

ABSTRACT

The study aimed to evaluate the changes in milk from goats with mastitis by using the strip cup test, California Mastitis Test (CMT), somatic cell count (SCC) and microbiological profile as well as to determine the biochemical profile, especially acute phase proteins, in blood serum and whey from goats with naturally occurring clinical or subclinical mastitis. Three experimental groups were formed by 30 mammary glands from healthy goats with milk samples negative to strip cup test, CMT and microbiological examination (control group G1); 30 mammary glands with milk samples negative to strip cup test but with moderate (2+) or intense (3+) reaction in CMT and microbiological examination (group with subclinical mastitis G2), and 12 mammary glands with positive results to strip cup test and microbiological examination (group with clinical mastitis G3). After asepsis of the teats milk samples were collected for SCC, microbiological culture, and to determine the biochemical profile in whey, including proteinogram by fractionation in poliacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). At the same time, blood samples were obtained to determine the serum biochemical profile. Automatic and microscopic methods were higher in milk samples from goats with subclinical mastits (G2 4,500.000 cells/mL e 20,830,000 cells/mL, respectively) e with clinical mastitis (G3 7,500,000 células/mL e 39,100,000 cells/mL, respectively). Staphylococcus aureus, Coagulase-negative Staphylococcus (CNS), Coagulase-positive Staphylococcus (CPS), Corynebaterium spp. and Streptococcus spp. were the microorganisms isolated in milk samples from goats of G2 and G3. Whey samples from goats of G2 and G3 showed higher activity of alkaline phosphatase (G2 122 U/L and G3 207 U/L) and gamma-glutamyltransferase (G2 483 U/L and G3 571 U / L), and higher concentrations of albumin (G2 0.18 g/dL and G3 0.29 g/dL), total protein (G2 1.50 g/dL and G3 1.67 g/dL), chlorides (G2 190 mEq/L and G3 202 mEq/L), iron (G2 13.4 mg/dL and G3 19.6 mg/dL), sodium (G2 152 mMol/L and G3 181 mMol/L), IgA (G2 3.26 mg/dL and G3 3.65 mg/dL), lactoferrin (G2 111 mg/dL and G3 127 mg/dL), IgG heavy chain IgG - IgG-HC (G2 94.9 mg/dL and G3 144 mg/dL), IgG light chain - IgG-LC (G2 73.0 mg/dL and G3 98.4 mg/dL), -casein (G2 2.13 mg/dL and G3 3.89 mg/dL) and -lactoglobulin (G2 693 mg/ dL). Blood samples from goats of G2 and G3 had lower serum concentrations of urea (G2 56.2 mg/dL and G3 44.2 mg/dL) and chlorides (G2 110 mEq/L and G3 109 mEq/L), and higher concentrations of IgA (G3 49.4 mg/dL), ceruloplasmin (G2 30.1 mg/dL and G3 46.9 mg/dL), transferrin (G2 497 mg/dL), IgG-HC (G2 1,307 mg/dL and G3 1,152 mg / dL), IgG-LC (G2 805 mg/dL and G3 723 mg/dL), haptoglobin (G2 52.5 mg/dL and G3 40.2 mg/dL) and acid 1-glycoprotein (G2 37.7 mg/dL). In conclusion, The use of diagnostic tools such as the strip cup test, CMT and SCC should be used together for proper evaluation of goat milk secretion and whenever possible with the microbiological exam to aid the diagnostic . S. aureus was the most isolated microorganism in this study being 63.3 % and 75 % respectively from milk secretions from goats from G2 and G3 , being the predominating infectious contagious agents. The biochemical profile, in particular of acute phase proteins (APP ) of whey serum is a best clinical indicator of clinical and subclinical mastitis than the blood chemical profile . Finally, it is noteworthy that the proteins of molecular weight of 39,000 Da and 19,000 Da, were only identified in whey serum from G3 goats and can be considered as a marker of clinical mastitis .