AVALIAÇÃO DA GENTAMICINA APLICADA EM OVOS DE AVES REPRODUTORAS PESADAS E SEU EFEITO RESIDUAL NOS TECIDOS

RESUMO

A preocupação da indústria avícola em manter altos índices de produtividade e de segurança dos alimentos fez com que surgissem ações preventivas a fim de evitar a introdução de patógenos no sistema avícola. O uso de gentamicina associada à vacinação in ovo tem sido amplamente utilizada com essa finalidade. Neste particular, são escassas as informações disponíveis na literatura acerca da segurança clínica e alimentar da gentamicina quando aplicada in ovo. Diante disto, dois experimentos foram conduzidos para avaliar o efeito da administração da gentamicina em ovos de reprodutoras pesadas nos parâmetros físicos, hematológicos e bioquímicos, e também a permanência desse antimicrobiano nos tecidos de frangos de corte. No primeiro estudo, foram utilizados 200 ovos de matrizes da linhagem Cobb e, aos 18 dias de incubação, 100 ovos receberam apenas a vacina contra a doença de Marek (GC) e os outros 100 receberam a vacina juntamente com 0,22 mg/ovo de sulfato de gentamicina (GT). Após o nascimento (D0), foram realizados exames físicos nos momentos D+3, D+6, D+10, D+14 e D+21 (3, 6, 10, 14 e 21 dias após o nascimento, respectivamente), assim como exames complementares em D+6, D+10, D+14 e D+21. Os parâmetros físicos compreenderam pesagem, avaliação da condição corpórea, comportamento, postura/marcha, respiração, apetite, excretas, penas e pele, bem como sinais de intoxicação. Quanto aos parâmetros laboratoriais, foram determinados o hemograma completo e as provas bioquímicas séricas [ureia, ácido úrico, aspartato aminotransferase, alanina aminotransferase (ALT), gama glutamiltransferase (GGT), creatina quinase, albumina e proteínas plasmáticas totais]. Os resultados foram submetidos à análise estatística por meio do procedimento general Linear Models (GLM) do SAS com pós-teste de Tukey, considerando o nível de significância de 5%. Em ambos os grupos, todas as aves se apresentaram saudáveis ao longo do estudo e o peso corporal médio não diferiu estatisticamente entre GC e GT. No hemograma, apesar das variações dentro do mesmo tratamento, não foram observadas diferenças significativas entre os grupos. No D+10, o grupo controle apresentou níveis de GGT acima dos encontrados pelo grupo tratado (p0,05), entretanto, as concentrações médias de GC (23,67±8,97 UI/L) e GT (12,50±6,64 UI/L) permaneceram dentro dos limites fisiológicos para a espécie (9-30 UI/L). Os valores de ALT diferiram significativamente em D+14, com valores em GC (138,75±142,66 UI/L) superiores aos do GT (26,00±20,42 UI/L), no entanto, o segundo permaneceu dentro da faixa de normalidade (19-50UI/L). Para os demais parâmetros bioquímicos, não foram observadas diferenças significativas entre os grupos. Já no segundo experimento, foram incubados 200 ovos, oriundos de matrizes da linhagem Cobb. Aos 18 dias de incubação, todos os ovos receberam a vacina juntamente com 0,22 mg/ovo de gentamicina. Após o nascimento, os animais foram distribuídos aleatoriamente em repetições de seis animais cada, compondo cinco grupos de abate (grupos A, B, C, D e E). Cada grupo teve suas aves abatidas nos momentos D+14, D+21, D+28, D+35 e D+42 (14, 21, 28, 35 e 42 dias de idade, respectivamente). Realizou-se o abate dos animais via deslocamento cervical e foram colhidas amostras de músculo, pele/gordura, fígado e rim. A quantificação de gentamicina e seus metabólitos (C1, C1a, C2 e C2a) nos tecidos foi realizada via técnica de cromatografia líquida com detecção por espectrometria de massas, metodologia esta previamente validada. As quantificações observadas foram submetidas a método estatístico recomendado pela European Medicines Agency para determinação do período de carência. Para o músculo e para pele/gordura, todas as amostras avaliadas durante o estudo apresentaram quantificação de gentamicina abaixo do limite máximo permitido. Verificou-se que, nas matrizes fígado e rim, a gentamicina apresentou maior tendência ao acúmulo, com maior permanência no tecido renal. O período de carência foi de 16,8 dias para as matrizes músculo e pele/gordura. Já para as matrizes rim e fígado, o período de retirada foi de 25,2 dias (26 dias), período este inferior ao tempo de abate para frangos de corte no Brasil (35 a 42 dias). Concluiu-se que a administração de 0,22 mg/ovo de gentamicina associada à vacina de Marek não causou alterações físicas e clínicas significantes quando administrada em ovos de aves reprodutoras pesadas e que sua utilização não gera resíduos em carne de frangos.

ABSTRACT

The concern of the poultry industry to maintain high levels of productivity and food security has spurred preventive actions in order to prevent the introduction of pathogens in the poultry system. The use of gentamicin associated with in ovo vaccination has been widely used for this purpose. In particular, there is little information available in the literature about the clinical and food safety of gentamicin when applied in ovo. Given this, two experiments were conducted to evaluate the effect of the administration of gentamicin in eggs of breeders in physical, hematological and biochemical parameters, as well as the permanence of this antimicrobial in broiler tissues. In the first study, 200 eggs of Cobb arrays were used and, in the 18th day of incubation, 100 eggs received only vaccination against Marek's disease (CG) and the other 100 received the vaccine with 0.22 mg/egg of gentamicin sulfate (GT). After the birth (D0), physical examinations were performed at times D+3, D+6, D+10, D+14 and D+21 (3, 6, 10, 14 and 21 days after birth, respectively), as well as additional tests on D+6, D+10, D+14 to D+21. The physical parameters covered weighing, evaluation of body condition, behavior, posture/gait, breathing, appetite, feces, feathers and skin, as well as signs of intoxication. As for the laboratory parameters, the complete blood count and serum biochemical tests [urea, uric acid, aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase (ALT), gamma glutamyl transferase (GGT), creatine kinase, albumin and total plasma proteins] were determined. The results were statistically analyzed using the General Linear Models Procedure (GLM) of SAS with Tukey's test, with a significance level of 5%. In both groups, all birds showed healthy throughout the study and the average body weight was not significantly different between GC and GT. In the complete blood count, despite variations within the same treatment, no significant differences between groups were observed. At D+10, the control group had levels of GGT above the ones found in the treated group (p0.05). However, the average concentrations of GC (23.67±8.97 UI/L) and GT (12.50±6.64 UI/L) remained within the physiological limits for the species (9-30 UI/L). ALT levels were significantly different in D+14, with values in GC (138.75±142.66 UI/L) greater than the ones in GT (26.00±20.42 UI/L), but remained within the second normal range (19-50 UI/L). For other biochemical parameters, no significant differences between groups were observed. In the second experiment, 200 eggs from Cobb lineage were incubated. After 18 days of incubation, all eggs received vaccine coupled with 0.22 mg/egg of gentamicin. After birth, the animals were randomly distributed in equal groups of six animals each, composing five slaughter groups (Groups A, B, C, D and E). Each group had their birds slaughtered in times D+14, D+21, D+28, D+35 and D+42 (14, 21, 28, 35 and 42 days respectively). We carried out the slaughter of animals via cervical dislocation and muscle, skin/fat, liver and kidney samples were collected. The quantification of gentamicin and its metabolites (C1, C1a, C2 and C2a) in the tissue was conducted by means of the technique of liquid chromatography with detection by mass spectrometry, methodology which was previously validated. The measurements observed were submitted to statistical method recommended by the European Medicines Agency for the determination of the grace period. For muscle and skin/fat, all samples evaluated during the study presented quantification of gentamicin below the maximum allowed limit. It was found that in the liver and kidney matrices gentamicin showed a greater tendency to accumulate with greater permanence in the renal tissue. The grace period was 16.8 days for matrices of muscle and skin/fat. As for the kidney and liver matrices, the withdrawal period was of 25.2 days (26 days), inferior to the slaughter time for broilers in Brazil (35-42 days). Thus, one concludes that the use of 0.22 mg/egg of gentamicin coupled with Mareks vaccine did not cause significant physical and clinical alterations when administered in eggs of breeding heavy birds and that its use does not spawn residues in broiler meat.