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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203176

Resumo

O uso constante e intenso de inseticidas químicos para o controle do Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762), vetor de importantes doenças como a dengue, seleciona indivíduos resistentes a esses compostos. A resistência é sujeita à seleção natural e, consequentemente, a ausência dessa seleção pode ocasionar a reversão da suscetibilidade. Porém, são poucos os trabalhos relatando os mecanismos envolvidos na sua manifestação. Desta forma, o trabalho teve como objetivo avaliar a suscetibilidade e a reversão da resistência a inseticida em população de Aedes aegypti. Foram utilizadas populações de A. aegypti coletadas em 2012 e 2013 no município de Maringá (PR), e então realizadas comparações entre as duas gerações parentais e entre as gerações F0, F5 e F10 mantidas em laboratório à partir da coleta de 2013 com ausência de contato com inseticidas. Bioensaios utilizando as concentrações múltiplas e diagnóstica de temephos foram realizados para calcular a CL50 e CL95 e as razões de resistência (RR50 e RR95). Para estudo dos mecanismos que conferem resistência, foi realizada a verificação da frequência da mutação Val1016Ile no gene do canal de sódio relacionado à resistência a piretróide e a quantificação de atividade das enzimas Acetilcolinesterase, Glutationa S-Transferase, Esterases (-EST, -EST e PNPA-EST) e Oxidase de Função Mista. Para identificar a variabilidade morfológica do tamanho e forma das asas foi utilizada a técnica de morfometria geométrica alar. Os resultados dos bioensaios com imaturos demonstraram aumento da RR95, redução da mortalidade e alteração do status de alterado para resistente de 2012 para 2013, enquanto entre as gerações mantidas em laboratório houve redução da RR95 e aumento da mortalidade, porém o status se permaneceu como resistente. Os ensaios moleculares mostraram que a frequência do genótipo Ile/Ile e do alelo 1016Ile foram maiores em F0 2013 quando comparados com F0 do ano anterior, e menores comparando-se com a geração F10, mostrando a redução da mutação kdr na ausência de inseticidas. As atividades enzimáticas analisadas mesmo após a interrupção da utilização de inseticida por dez gerações ainda manteve-se elevada na décima geração. Já as variações encontradas nas asas dos mosquitos através da morfometria geométrica mostraram tendência de separação entre os exemplares com maior grau de resistência (gerações parentais) daqueles com menor grau (F5 e F10). Por fim, obteve-se que a resistência a inseticidas é reversível e que bioensaio de suscetibilidade, ensaio molecular e morfometria alar são técnicas viáveis para a verificação desses resultados.

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The constant and intensive use of chemical insecticides for control of Aedes (Stegomyia) aegypti (Linnaeus, 1762), vector of important diseases as dengue, selects individuals resistant to these compounds. Resistance is subjected to natural selection, and thus, the absence of this selection can induce susceptibility reversal. However, there are few studies reporting the mechanisms involved in its manifestation. Therefore, the study aimed to evaluate the susceptibility and the reversal of insecticide resistance in populations of Aedes aegypti. A. aegypti populations used were collected in 2012 and 2013 in Maringá (PR), and then mades comparisons between the two parental generations and among generations F0, F5 and F10 created in laboratory from 2013 population, without contact with insecticides. Bioassays using multiple and diagnostic concentrations of temephos were made to calculate the LC50 and LC95 and resistance ratios (RR50 and RR95). To study mechanisms that confer resistance, Val1016Ile mutation frequency in the sodium channel gene associated with resistance to pyrethroid was detected, and quantified the activity of enzymes acetylcholinesterase, glutathione S-transferase, esterases (EST-, - EST and PNPA-EST) and monooxygenases. To identify the morphological variability of the size and shape of the wings we used the technique of geometric morphometric wing. The bioassays with immature resulted in increase of RR95, reduce of mortality and change of the status from "changed" to "resistant" from 2012 to 2013, while among generations RR95 decreased and mortality increased, but the status remained as "resistant". Molecular assays showed higher frequency of Ile/Ile genotype and 1016Ile allele in 2013 compared to 2012, and lower comparing with the generation F10, showing the reduction of the kdr mutation in the absence of insecticides. The results of the analysis of enzymatic activity didn't show relation to resistance. Variations detected in the wings of mosquitoes by geometric morphometry showed a tendency of separation between those specimens with higher resistance level (parental generations) of those with lower level (F5 and F10). Finally, it was found that insecticide resistance is reversible and bioassay of susceptibility, molecular assay and geometric morphometric of wings are techniques viable for the verification of these results.

Biblioteca responsável: BR68.1