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PERFIL DE EXPRESSÃO DOS GENES PRM-1, TNP-2, 17-HSD3, LHR, MHC-I, MIC-B, NC1 E NC3 NA ESPERMATOGÊNESE BOVINA

DANIELE ROSA XAVIER.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203294

Resumo

A espermatogênese consiste em um processo de modificações morfológicas, fisiológicas e bioquímicas complexas que ocorrem nos testículos, baseado em uma série de divisões (mitóticas e meióticas), que resultam na formação de espermatozoides nos túbulos seminíferos. Qualquer alteração ao longo desse processo pode determinar distúrbios reprodutivos variados que determinam subfertilidade até a infertilidade. O objetivo desta pesquisa foi analisar a expressão dos genes Protamina tipo 1 (PRM-1), Proteína de Transição Nuclear do tipo 2 (TNP-2), enzima 17-Hidroxiesteróide Desidrogenase tipo 3 (17-HSD3), Receptor do Hormônio Luteinizante (LHR), Complexo de Histocompatibilidade Principal de classe I (MHC-I), MIC-B, NC1 e NC3 na espermatogênese de bovinos, correlacionando os resultados ao nível de maturação histológica do epitélio seminífero. Foram utilizados testículos de 36 bovinos, sem padrão racial e independente da idade. À luz do nosso conhecimento, este é o primeiro estudo em bovinos que utiliza os critérios de Johnsen para correlacionar os escores médios à expressão diferencial dos genes envolvidos no processo de espermatogênese. O RNA extraído do parênquima testicular foi submetido ao RT-PCR em tempo real, sendo os genes (PRM-1, TNP-2, 17-HSD3, LHR, MHC-I, MIC-B, NC1, NC3) avaliados com base na análise histológica. Constatou-se que os indivíduos avaliados pertenciam aos escores médios: seis, sete e oito, e que não houve diferença estatística significativa (p>0,05) nos escores da espermatogênese entre os testículos direito e esquerdo de cada animal. Os resultados obtidos da análise do qRT-PCR demonstraram que todos os genes avaliados foram expressos no testículo bovino nos diferentes escores estudados, embora a magnitude de expressão de cada gene tenha sido extremamente variável dentro do mesmo escore e somente para alguns genes quando comparados entre os escores. Houve diferença estatística significativa (p0,05) quando comparado entre eles. Não houve diferença estatística significativa (p>0,05) na expressão dos genes MHC-I genérico e o MHC-Ib (MIC-B, NC1 e NC3) quando comparada as médias dos três escores avaliados, podendo-se sugerir que estas moléculas tem ação indireta na espermatogênese bovina. Houve correlação positiva significativa
The spermatogenesis consists of a number of divisions (mitotic and meiotic) and morphological, physiological and biochemical complex, resulting in the formation of sperm cells in the seminiferous tubules, and any changes in the process can lead to reproductive disorders such as infertility. The objective of this research was to analyze the expression of genes protamine type 1 (PRM-1), transition protein nuclear type 2 (TNP-2), 17- hydroxysteroid enzyme dehydrogenase type 3 (17HSD-3), luteinizing hormone receptor (LHR), Major Histocompatibility Complex class I (MHC-I), MIC-B, NC1 and NC3 spermatogenesis cattle, correlating the results to histological maturation level of the seminiferous epithelium. Testis of 36 cattles without racial standard and independent of age were used. In the light of our knowledge, this is the first study in cattle using the criteria of Johnsen to correlate the average scores for differential expression of genes involved in spermatogenesis process. The RNA extracted from the testicular parenchyma was subjected to RT-PCR in real time, and genes (PRM-1, TNP-2, 17-HSD3, LHR, MHC-Ib, MIC-B, NC1, NC3) evaluated based on histological analysis. It was found that the evaluated individuals belonged to the mean scores: six, seven and eight, and that there was no significant statistical difference (p>0.05) in the spermatogenesis scores between the right and left testicles of each animal. The results obtained from the qRT-PCR analysis demonstrated that all the evaluated genes were expressed in the bovine testis in the different scores studied, although the magnitude of expression of each gene was extremely variable within the same score and only for some genes when compared between the scores. There was a significant statistical difference (p0.05) when compared between them. There was no statistically significant difference (p>0.05) in the expression of the generic MHC-I and MHC-Ib genes (MIC-B, NC1 and NC3) when compared to the means of the three evaluated scores, suggesting that these molecules have an indirect effect on bovine spermatogenesis.
Biblioteca responsável: BR68.1