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DETECÇÃO MOLECULAR DOS PRINCIPAIS HERPESVIRUS DE BOVINOS COM DOENÇA NEUROLÓGICA EM AMOSTRAS DE ENCÉFALO PARAFINADAS

FRANCISCO DANILO DE AGUIAR OLIVEIRA.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203465

Resumo

O presente estudo visou a utilização da PCR multiplex (mPCR) para diagnóstico dos principais herpesvírus que acometem o sistema nervoso de bovinos, herpesvírus bovino (BoHV) e herpesvírus ovino 2 (OvHV-2), em amostras parafinadas em uma única reação diminuindo o tempo e os custos da análise. Foram selecionados 33 bovinos, sendo analisadas quatro amostras de cada animal (preferencialmente: rede admirável, tálamo, mesencéfalo e cerebelo), recebidos pelo Laboratório de Patologia Animal (LPA) entre 2007 e 2014 independente da raça, sexo ou idade, que apresentaram a suspeita clínica inicial de Doença Nervosa, incluindo os casos confirmados de Raiva. As amostras foram divididas em dois grupos. O grupo 1 possuía 17 animais que apresentaram lesões histológicas e o grupo 2, 16 animais que não apresentaram lesões histológicas. O uso de amostras incluídas em parafina permite estudos retrospectivos em amostras arquivadas no LPA da Universidade Federal do Pará (UFPA) e estudos prospectivos em amostras fixadas enviadas pelos médicos veterinários da Agência de Defesa Agropecuária do Estado do Pará (ADEPARA) ou por médicos veterinários autônomos para diagnóstico histopatológico. As dificuldades encontradas no transporte das amostras refrigeradas até o laboratório pelas distâncias e ausência de energia em muitas regiões do estado do Pará levam a necessidade de se estabelecer ferramentas de diagnóstico para auxiliar no Sistema de Defesa Sanitária Animal do Estado, dentro do programa de vigilância para a Raiva e outras encefalopatias. A possibilidade de diagnóstico nos casos negativos para raiva com encefalite traz benefícios aos criadores da região, pois fornece bases para a implementação de medidas sanitárias pelos médicos veterinários da defesa ou autônomos reduzindo prejuízos econômicos. Dos 33 animais submetidos à mPCR, em cinco detectou-se a presença de DNA para Herpesvírus. Dois animais (035/07, 083/12) apresentaram bandas específicas para BoHV e OvHV-2 (6,06%), dois animais foram positivos para BoHV (119/07 e 393/12), e um animal foi positivo somente para OvHV-2 (053/07). Somente o animal 119/07 (3,03%) apresentou lesões compatíveis na microscopia com a doença causada pelo BoHV apesar de quatro (12,12%) serem positivos para a presença do DNA deste agente. Destes, três apresentaram o DNA para OvHV-2 sem que se observassem lesões compatíveis com a doença (9,09%).
The present study aimed at the use of the multiplex PCR (mPCR) for diagnosis of the main herpesvirus that affect the nervous system of cattle, bovine herpes virus (bovine herpesvirus type) and herpesviruses Sheep 2 (OvHV-2) in paraffin embedded samples in a single reaction decreasing the time and the cost of analysis. They selected 33 cattle being analyzed four samples from each animal (preferably: admirable network, thalamus, midbrain and cerebellum), received by the Animal Pathology Laboratory (APL) between 2007 and 2014 regardless of race, gender or age, which showed the suspect Initial clinical Nerve Disease, including confirmed cases of rabies. The samples were divided into two groups. Group 1 had 17 animals with histological lesions and group 2, 16 animals showed no histological lesions. The use of paraffin included samples allows retrospective studies on samples stored in the LPA of the Federal University of Pará (UFPA) and prospective studies in fixed samples submitted by veterinarians of the Defence Agency of Para State of Agriculture (ADEPARÁ) or by independent veterinarians for histopathological diagnosis. The difficulties encountered in the transportation of samples chilled to the laboratory by the distances and lack of power in many state of Para regions lead to a need to establish diagnostic tools to assist in the Health Protection System State Animal, within the monitoring program Rabies and other encephalopathies. The possibility of diagnosis in negative cases to anger with encephalitis brings benefits to farmers of the region, it provides bases for the implementation of health measures by veterinarians defense or autonomous reducing economic losses. Of the 33 animals that underwent mPCR in five detect the presence of herpesvirus DNA. Two animals (035/07, 083/12) had specific bands and OvHV to BoHV-2 (6.06%), two animals were positive for BoHV (119/07 and 393/12), and one animal was positive only for OvHV-2 (053/07). Only the animal 119/07 (3.03%) showed lesions compatible with the microscopic disease caused by bovine herpesvirus type although four (12.12%) are positive for the presence of DNA of this agent. Of these, three had the DNA to OvHV-2 with no noticeable lesions compatible with the disease (9.09%).
Biblioteca responsável: BR68.1