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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203487

Resumo

O objetivo deste trabalho foi verificar a prevalência e identificar Cryptosporidium spp. e Giardia spp. em amostras de fezes e de água, além de verificar a presença de organofosforados e carbamatos em amostras de água e leite em propriedades de bovinocultura leiteira e associar os resultados a fatores de exposição. Amostras de fezes de bovinos, suínos, e humanos e de água foram coletadas em 55 propriedades localizadas em Araruna e Campo Mourão, PR. Pesquisa de (oo)cistos nas fezes foi realizada por meio da coloração de Ziehl Neelsen e centrifugo-flutuação em sulfato de zinco. Amostras positivas nestas técnicas foram submetidas à nested-PCR para amplificação do gene SSU rRNA. Análise microbiológica foi realizada em amostras de água de todas as propriedades. Análise parasitológica da água foi realizada em 31 propriedades por imunofluorescência direta e nested-PCR. A identificação das espécies de Cryptosporidium foi realizada por sequenciamento e, no caso de infecções mistas, por PCR-RFLP. A pesquisa de organofosforados e carbamatos foi realizada pela técnica de cromatografia em camada delgada. Variáveis de exposição foram obtidas por meio de questionário epidemiológico. A prevalência de infecção por Giardia spp em todos os bovinos foi 7,6% e em bezerros até dois meses 17,1%; por Cryptosporidium spp. foi 10,2% em todos os bovinos e 25,3% em bezerros até dois meses. Entre as amostras de fezes de bovino positivas na PCR, C. parvum foi identificado em 41 (64%), C. ryanae em 8 (12,5%), C. bovis em 4 (6,3%), C. andersoni em 5 (7,8%) e infecção mista em 20 (31,3%). Apenas um pool de fezes de suíno foi positivo para Giardia spp. e cinco foram positivos para Cryptosporidium spp. Estes parasitos não foram identificados nas amostras de fezes humanas. Em amostras de água, coliformes termotolerantes foram identificados em 25 (45,5%) propriedades. Giardia e Cryptosporidium foram identificados em três amostras de água, as quais também possuíam coliformes termotolerantes. C. parvum foi identificado em uma das amostras, cuja propriedade possuía bezerros positivos para a mesma espécie. A presença de coliformes foi associada à origem da água, estrutura e degradação de nascentes, chuva e turbidez. Organofosforado e carbamato foram identificados em 51% e 23,6% das amostras de leite e em 31% e 9,1% das amostras de água respectivamente. Organofosforados se destacaram entre os mais utilizados como praguicidas nas lavouras e ectoparasiticidas nos animais. O uso de orgnofosforados nas lavouras demonstrou associação com sua presença em leite e água. Conclui-se maior prevalência de Cryptosporidium e Giardia em bezerros e presença de C. parvum e Giardia duodenalis em água de propriedades leiteiras. A maioria das fontes de água não possui proteção adequada, principalmente nascentes, com alta frequência de coliformes de origem fecal. Resíduos de praguicidas também estão presentes em água e leite, principalmente organofosforados. Há a necessidade de monitoramento de resíduos no leite, conscientização e assistência a produtores rurais para uso de praguicidas, manejo de animais, preservação de fontes naturais de água e tratamento da água de consumo humano e animal.

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This study aimed to determine the prevalence and identify Cryptosporidium spp and Giardia spp in fecal samples and water, verify the presence of organophosphorus and carbamates in water and milk samples in dairy farms and associate the exposure factors. Samples of cattle feces, swine, human and water were collected in 55 dairy farms of Araruna and Campo Mourao, PR, Brazil. Presence of Cryptosporidium and Giardia were determined by Ziehl Neelsen modified and zinc sulfate centrifugal flotation methods. Positive samples were submitted to nested-PCR for amplification of the SSU rRNA gene. Microbiological analysis was performed on water samples from all properties. Parasitological water analysis was performed in 31 farms by immunofluorescence assay and nested-PCR. Cryptosporidium species were determined by DNA sequencing analyses or restriction fragment length polymorphism, in the case of mixed infections. The presence of organophosphorus and carbamates was established by thin layer chromatography. Exposure variables were obtained using an epidemiological questionnaire. The prevalence of infection with Giardia spp was 7.6% in cattle and 17.1% in calves up to two months; for Cryptosporidium spp. was 10.2% in cattle and 25.3% in calves up to two months. In fecal samples of cattles, which were positive in PCR, C. parvum was identified in 41 (64%), C. ryanae 8 (12.5%), C. bovis 4 (6.3%), C. andersoni 5 (7, 8%) and mixed infection in 20 (31.3%). Only one swine pool was positive for Giardia spp. and five were positive for Cryptosporidium spp. These protozoans have not been identified in samples of human faeces. Fecal coliforms were identified in water samples of 25 (45.5%) farms. Giardia and Cryptosporidium were identified in three water samples, which also had fecal coliform. C. parvum was identified in a water sample from a farm with positive calf. The presence of fecal coliform was associated with the origin of water, structure and degradation of springs, rain and turbidity. Organophosphorus and carbamate were identified in 51% and 23.6% of milk samples and in 31% and 9.1% of water samples respectively. Organophosphorus stood out among the most used as pesticides in crops and animals ectoparasiticides. The use of these compounds in crops were associated with the presence in milk and water. In conclusion there is a higher prevalence of Cryptosporidium and Giardia in calves and presence of C. parvum and G. duodenalis in water of the dairy farms. Most water sources are unprotected, mainly springs, with high frequency of fecal coliforms. Pesticide residues are present in water and milk, especially organophosphorus. There is need for waste monitoring in milk, awareness and assistance to farmers to use pesticides, animal management, preservation of natural water sources and treatment of water for human consumption or animal

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