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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203503

Resumo

A técnica de fertilização in vitro se apresenta muito bem consolidada, porém a busca por novas ferramentas, para incrementar os resultados, são incessantes. As drogas antioxidantes vêm sendo estudadas por muitos pesquisadores, pois seus efeitos podem ser a chave para a diminuição do estresse oxidativo, que é uma realidade na produção in vitro (PIV) de embriões. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de cinco drogas antioxidantes (quercetina; cisteamina; carnitina; vitamina-C e resveratrol) na PIV de embriões, desde a clivagem, blastocistos, eclosão, número total de células e as mensurações dos níveis das espécies reativas de oxigênio (ROS) e da glutationa (GSH). As análises estatísticas foram realizadas pelo programa BioEstat 4.0 e, em seguida, pela análise de Bonferroni a 5% de significância. Os oócitos foram recuperados de ovários provenientes de abatedouro e selecionados como grau I e II para serem usados na PIV. Os oócitos foram divididos em seis grupos e submetidos a maturação por 22 horas em meio suplementado com antioxidante (tratamento) ou não (controle). Após a maturação os oócitos foram fecundados e cultivados in vitro. Todas as etapas foram em estufa de cultivo celular a 38,5ºC e atmosfera gasosa com 5% de CO2. A suplementação do meio de maturação com os antioxidantes não alterou significativamente a media nas taxas de clivagem (86.3%), de blastocistos (52%) e de blastocistos eclodidos (59,4%). Porém houve aumento no número total de células (blastômeros) nos grupos tratados com cisteamina (159), carnitina (148), vitamina-C (157) e resveratrol (148) em relação aos grupos controle (126) e o tratado com quercetina (131). Na avaliação dos níveis de ROS na maturação dos oócitos, houve redução de ROS nos grupos tratados com quercetina (0,86), vitamina-C (0,86) e resveratrol (0,91), em relação aos grupos cisteamina (0,98), carnitina (0,98) e controle (1,00). Já o nível de GSH aumentou nos grupos tratados cisteamina (1,25) e carnitina (1,11) em relação aos demais grupos: quercetina (1,02), vitamina-C (1,04), resveratrol (0,98) e ao grupo controle (1,00). De acordo com os resultados a suplementação da maturação in vitro com drogas antioxidantes pode interferir positivamente na produção in vitro de embriões bovinos.

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The in vitro fertilization technique performs very well established, but the search for new tools to enhance the results are endless. The antioxidant drugs have been studied by many researchers because its effects can be the key to reduction of oxidative stress, which is a reality in vitro production (IVP) embryos. The objective of this study was to evaluate the effect of five antioxidant drugs (quercetin; cysteamine; carnitine; vitamin-C and resveratrol) in IVP embryos, from the cleavage, blastocyst, hatching, total number of cells and measurements of the levels of reactive species oxygen (ROS) and glutathione (GSH). Statistical analyzes were performed by BioEstat 4.0 program and then by Bonferroni analysis at 5% significance level. Oocytes were recovered from slaughterhouse ovaries and selected as a grade I and II for use in PIV. Oocytes were divided into six groups and subjected to aging for 22 hours in medium supplemented with antioxidant (treatment) or not (control). After maturation oocytes were fertilized and cultured in vitro. All steps were in cell culture incubator at 38.5 ° C and the gaseous atmosphere with 5% CO2. The supplementation of maturation medium with antioxidants did not significantly alter the media in cleavage rates (86.3%), blastocyst (52%) and hatched blastocyst (59.4%). But there was an increase in the total number of cells (blastomeres) in the groups treated with cysteamine (159), carnitine (148), vitamin-C (157) and resveratrol (148) compared to the control group (126) and treated with quercetin ( 131). In assessing the levels of ROS in the maturation of the oocytes, a reduction of ROS in groups treated with quercetin (0.86), vitamin-C (0.86) and resveratrol (0.91) groups compared to cysteamine (0, 98), carnitine (0.98) and control (1.00). But the level of GSH increased in cysteamine treated groups (1.25) and carnitine (1.11) compared to the other groups: quercetin (1.02), vitamin-C (1.04), resveratrol (0.98) and the control group (1.00). According to the results supplementation of maturation in vitro antioxidant drugs could positively affect the in vitro production of bovine embryos.

Biblioteca responsável: BR68.1