Portal de Pesquisa da BVS Veterinária

Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203530

Resumo

A Leishmaniose é uma zoonose amplamente distribuída pelo território brasileiro, sendo a espécie Leishmania (Leishmania) chagasi o principal agente etiológico da leishmaniose visceral canina (LVC). Os cães são admitidos como principais reservatórios deste parasito e no Brasil o tratamento destes cães é permitido apenas mediante utilização de medicamentos veterinários, as quais não promovem a cura parasitológica. Dessa forma, o desenvolvimento de uma vacina eficaz consistirá na melhor abordagem para o controle da LVC. Nesse contexto, o nosso trabalho empregou hamsters (Mesocricetus auratus) como modelo experimental em ensaios pré-clínicos vacinais anti-Leishmania para analisar a inocuidade, antigenicidade e níveis de proteção induzidos por duas nanoformulações inovadoras preparadas pela associação do polímero ácido poli-D,L-láctico (PLA) aos antígenos de Leishmania braziliensis (LB). Estas formulações foram denominadas Partícula Submicrométrica Grande associada a antígeno de L. braziliensis (LBPSmG) e Partícula Submicrométrica Pequena associada a antígeno de L. braziliensis (LBPSmP). A vacina LBSap, já consolidada pelo nosso grupo de pesquisa, foi utilizada como referência. Os animais foram previamente imunizados com os diferentes imunobiológicos e, posteriormente, desafiados com 107 promastigotas de L. chagasi em fase estacionária. As análises clínicas e laboratoriais realizadas após o protocolo vacinal (T3dose) demonstraram que as nanoformulações empregadas foram seguras e inócuas, além de antigênicas (indução de IgG total anti-Leishmania) quando empregadas em hamsters. Os resultados obtidos 200 dias após o desafio experimental (TPD) evidenciaram, nos grupos vacinados com LBSap, LBPSmG e LBPSmP, menor hepatoesplenomegalia quando comparados aos grupos controle. No baço, os grupos LBSap e LBPSmP apresentaram diminuição da intensidade de infiltrado inflamatório e formação de granuloma. Na avaliação da resposta imune humoral, nos grupos LBSap e LBPSmG, observou-se uma elevação dos níveis de anticorpos anti-Leishmania, Além disto, foi observada redução significativa na carga parasitária no baço nos grupos LBSap, LBPSmG e LBPSmP quando confrontados com os grupos controle. A formulação LBPSmP demonstrou melhores resultados nos animais vacinados e desafiados ao reduzir de forma mais intensa a carga parasitária no baço e atenuando as lesões nos tecidos hepático e esplênico, constituindo-se uma nanoformulação vacinal segura e inócua com grande potencial imunoprotetor.

---

Leishmaniasis is a vector-born disease widely disseminated in the Brazilian territory and the Leishmania (Leishmania) chagasi specie is the main etiological agent of canine visceral leishmaniasis (CVL). Dogs are considered as the main reservoir of this parasite and in Brazil the treatment of these dogs is admitted only when veterinary drugs are employed, which did not promote parasitological healing. In this context, the development of an efficient vaccine would be the best approach to control the LVC. In this way, our study has employed hamsters (Mesocricetus auratus) as experimental model in anti-Leishmania pre-clinical vaccine assays to analyze the safety, antigenicity and levels of protection induced by two innovative nanoformulations prepared by the combination of polymer poly-D,L-lactic acid (PLA) with Leishmania braziliensis antigen (LB). These formulations were identified as Large Submicrometric Particle associated with L. braziliensis antigen (LBPSmG) and Small Submicrometric Particle associated with L. braziliensis antigen (LBPSmP). The LBSap vaccine, already established by our research group, was used as a reference. The animals were previously immunized with the immunobiologicals and, then, challenged with 107 stacionary L. chagasi promastigotes forms. The clinical and laboratorial analyses performed after the vaccination protocol (T3dose) have showed that the nanoformulations employed were safe and harmless, besides antigenic (total IgG anti-Leishmania induction) when employed in hamsters. The data obtained 200 days after the experimental challenged (TPD) had shown less pronounced hepatosplenomegaly in the LBSap, LBPSmG and LBPSmP groups when compared to the control groups. In the spleen, the LBSap and LBPSmP groups showed a decrease in the intensity of inflammatory infiltrate and granuloma formation. In the humoral immune evaluation, in the LBSap and LBPSmG groups, was observed an increase in the anti-Leishmania antibody titles. Furthermore, was observed significant reduction in the spleens parasite burden in LBSap, LBPSmG and LBPSmP groups when compared to the control groups. In this way, the LBPSmP formulation showed better results in vaccinated and challenged animals to reduce further the parasitic load in the spleen and attenuating lesions in liver and spleen tissues, making it a safe and harmless nanoformulation vaccine with great immunoprotective potential.

Biblioteca responsável: BR68.1