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CÉLULAS-TRONCO MESENQUIMAIS DERIVADAS DO TECIDO ADIPOSO DE Saimiri sciureus: ISOLAMENTO E CARACTERIZAÇÃO

LUANE LOPES PINHEIRO.
Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203680

Resumo

Os macacos-de-cheiro (Saimiri sp.) estão entre os primatas neotropicais mais utilizados como modelo biológico, com destaque, nos últimos anos, em numerosas áreas biomédicas. No entanto, ainda não foi investigado no âmbito do cultivo e terapia celular. Assim, objetivou-se isolar e caracterizar células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo de Saimiri sciureus, visando contribuir com futuras pesquisas a partir desta espécie, como modelo experimental em medicina regenerativa e terapia celular. Foram utilizados dois animais, adultos, machos, pertencentes ao Centro Nacional de Primatas - CENP, Ananindeua, Pará, para coleta do tecido adiposo por meio de lipectomia. As células foram isoladas por digestão enzimática e cultivadas em Dulbecco's Modified Eagle Medium Ham's e F12 Nutrient Mixture na mesma proporção suplementado com 20% de soro fetal bovino, em estufa a 37ºC,com 5% de CO2. Foram avaliadas quanto à viabilidade, morfologia, proliferação, plasticidade, imunofenotipagem e estabilidade cromossômica por análise citogenética clássica e molecular. Os procedimentos realizados permitiram fácil isolamento e expansão das células, mantendo alta viabilidade e padrão morfológico ao longo do cultivo, potencial de diferenciação nas linhagens osteogênica, adipogênica e condrogênica, imunofenotipagem característica de células-tronco mesenquimais e integridade citogenômica até a última passagem analisada (P8). Nossos resultados, somados às propriedades terapêuticas das células-tronco mesenquimais, demonstram segurança para transplante autólogo em ensaios clínicos utilizando o Saimiri sciureus.
The squirrel monkey (genus Saimiri) are among the most used neotropical primates as a biological model in several biomedical areas. However, this species has not yet been investigated for cultivation stem cell therapy. Our objective was to isolate and characterize Saimiri sciureus adipose-derived mesenchymal stem cells, in order to contribute to future research with this species as an experimental model in regenerative medicine and cell therapy. Two individuals adult male belonging to the Centro Nacional de Primatas - CENP, Ananindeua, Pará, were used adipose tissue was collected by lipectomy. Cells were isolated by enzymatic digestion and cultured in Dulbecco's Modified Eagle Medium and Ham's e F12 Nutrient Mixture in same proportion, supplemented with 20% fetal bovine serum, at 37 ° C with 5% CO2. The following aspects were evaluated: viability, morphology, proliferation, plasticity, immunophenotyping and chromosomal stability by cytogenetics analysis classical and molecular. Our results showed that this approach allowed easy isolation and expansion of cells, maintaining high viability and morphology during the cultivation, differentiation potential in lineages osteogenic, adipogenic and chondrogenic, immunophenotyping characteristic of mesenchymal stem cells and cytogenomics integrity in high passes (P8). Added to the therapeutic properties of mesenchymal stem cells, our results demonstrated safety for autologous transplantation in clinical trials using the Saimiri sciureus.
Biblioteca responsável: BR68.1