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Tese em Português | VETTESES | ID: vtt-203687

Resumo

Células-tronco mesenquimais (CTMs) são caracterizadas por serem células indiferenciadas que possuem como principais características a capacidade de autorenovação, alto potencial de proliferação e diferenciação em diversos tecidos. São facilmente isoladas in vitro, apresentando morfologia semelhante a fibroblastos e devem apresentar a capacidade de realizarem in vitro a diferenciação condrogênica, osteogênica e adipogênica, assim como serem positivas para CD105, CD73 e CD90 e negativas para CD45, CD34, CD79. O presente estudo tem como objetivo avaliar o potencial das células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo de Aotus azarai infulatus KUHL-1820, oriundos do Centro Nacional de Primatas (CENP)- Ananindeua, PA. Acredita-se que tal espécie animal possui características que lhes permitem ser um excelente modelo biológico para estudos com fins de terapia celular, objetivou também analisar a curva de crescimento celular, porcentagem da viabilidade celular, antes e após a criopreservação, realizar análises morfológicas, testes imunocitoquímicos e a análises do cariótipo. As células foram isoladas por digestão enzimática com colagenase tipo IV e cultivadas in vitro. Os resultados mostraram que as células-tronco mesenquimais derivadas de tecido adiposo possuem elevada capacidade de proliferação se expandindo rápido nas garrafas de cultivo, apresentaram viabilidade em média acima de 90% e não apresentou diferença significativa quando se comparou células submetidas à criopreservação com células não criopreservadas. Apresentaram morfologia semelhante a fibroblastos e uma cinética de crescimento esperada para esse tipo de célula, foram positivas para CD105, CD73, e CD90 e negativa para CD34, CD79 e CD45. Na análise cariotípica foi observado um rearranjo em heterozigose no par 3, no qual um dos cromossomos sofreu uma fissão cêntrica, originando dois acrocêntricos, sugerindo que o mesmo é uma alteração constitucional do animal analisado, sugerindo que o mesmo seja híbrido entre dois citótipos diferentes. As células responderam de maneira positiva para a diferenciação adipogênica, condrgênica e osteogênica, comprovando sua multipotencialidade.Conclui-se, através dos resultados obtidos, que os testes básicos necessários para que uma célula seja considerada célula-tronco mesenquimal foram positivos nestes experimento, induzindo que a espécie Aotus azarai infulatus pode servir como excelente modelo biológico em estudos utilizando células-tronco mesenquimais e terapia celular

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The Mesenchymal Stem Cells (MSCs) are characterized by undifferentiated cells that have the main characteristics self-renewal, high potential for proliferation and differentiation in many tissues. The Mesenchymal Stem Cells are easily isolated in vitro, with fibroblast-like morphology and should exhibit the ability to perform in vitro chondrogenic, adipogenic and osteogenic differentiation, as well as being positive for CD105, CD73, and CD90 and negative for CD45, CD34, CD79. This study aims to evaluate the potential of AdiposeDerived Mesenchymal Stem Cells of Aotus azarai infulatus KUHL-1820, obtained from the National Primate Center (CENP) - Ananindeua, PA. It is believed that this specie has characteristics that allows them to be an excellent biological model for studies of cellular therapy, also examining the cell growth curve, the percentage of cell viability before and after cryopreservation, performing morphological analysis, immunocytochemical tests and karyotype analyzes. The Cells were isolated by enzymatic digestion with type IV collagenase and cultured in vitro. The results showed that Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cells has high proliferation capacity expanding fast in bottles of cultivation, showed average viability above 90% and was not significantly different when compared with cells subjected to cryopreservation and not cryopreserved cells . Showed fibroblast-like morphology and growth kinetics expected for this type of cells. Were positive for CD105, CD73, and CD90 and negative for CD34, CD45 and CD79. In karyotype analysis showed a rearrangement heterozygous at par 3, in which one of the chromosomes underwent a centric fission, yielding two acrocentric, suggesting that it is a constitutional alteration of the analyzed animal, suggesting that it is hybrid between two different cytotypes. The cells responded positively to the adipogenic, chondrogenic and osteogenic differentiation. The results, showed that the basic tests required for a cell to be considered mesenchymal stem cells were positive in these experiments, leading to the Aotus azarai infulatus may be an excellent biological model in studies using mesenchymal stem cells and cellular therapy.

Biblioteca responsável: BR68.1