ESTUDO COMPARATIVO DE VIABILIDADE CELULAR ENTRE DIFERENTES MÉTODOS DE ACONDICIONAMENTO E TEMPO APÓS O PREPARO DE CÉLULAS TRONCO MESENQUIMAIS PARA UTILIZAÇÃO EM TERAPIA CELULAR
Thesis
em Pt
| VETTESES
| ID: vtt-203953
Biblioteca responsável:
BR68.1
RESUMO
As células tronco mesenquimais (CTM) são consideradas uma linhagem de células tronco somáticas e estão presentes em regiões perivasculares de todos os tecidos adultos, incluindo a medula óssea (MO), tecido adiposo, periósteo, tecido muscular, parede dos vasos que compõem o cordão umbilical e os órgãos parenquimatosos. O crescente interesse nesse grupo celular para utilização em pesquisas e aplicação terapêuticas advém de sua capacidade de interagir com sistema imune do hospedeiro, imunoestimulando e/ou imunodeprimindo as células de defesa e reparadoras, em prol de um processo de cicatrização do organismo. Com o advento da terapia celular, a busca por esse tipo de terapia cresceu exponencialmente, porém, nem sempre temos laboratórios especializados perto das clínicas para o fornecimento de células, tendo assim, a necessidade de transportar essas células sem que ocorra perda na viabilidade. Atentando-se as necessidades atuais para comercialização desse tipo celular, o estudo objetivou realizar um comparativo de viabilidade celular entre diferentes métodos de acondicionamento e tempo após o preparo de células tronco mesenquimais, para utilização em terapia celular. Foram utilizadas 10 amostras de células tronco mesenquimais para quantificação de células totais, células viáveis e inviáveis, sendo as amostras acondicionadas em 72 seringas estéreis contendo 0,30mL de solução PBS 1x mais células. As seringas foram dividas aleatoriamente em três ambientes Geladeira, Isopor com gelo, Isopor sem gelo, e em tempos predeterminados foram realizados teste de viabilidade usando o método de Azul de tripan. Foi observado que no ambiente Geladeira e Isopor com gelo a viabilidade celular permaneceu superior a 90% em todos os momentos com exceção do momento T48, já no ambiente Isopor a viabilidade permaneceu inferior a 90% nos momentos T8, T10, T12, T24 e T48. Identificou-se que temperaturas de 2ºC à 8ºC são consideradas melhores para o acondicionamento das células durante um transporte, mantendo boa viabilidade celular durante 24 horas.
ABSTRACT
Mesenchymal stem cells (MSCs) are considered a lineage of somatic stem cells and are present in perivascular regions of all adult tissues, including bone marrow (BM), adipose tissue, periosteum, muscle tissue, walls of vessels which make up the umbilical cord, and parenchymal organs. The growing interest for this cell group for use in research and therapeutic applications comes from its ability to interact with the hosts immune system, immune-stimulating and/or immune-de With the advent of cellular therapy, search for this type of therapy has grown exponentially, however specialized laboratories arent always found near the clinics for cell supplying, thus having the need to transport these cells without occurring viability loss. Keeping in mind the current needs for commercialization of this cell type, the study aimed to conduct a cell viability comparative between different conditioning methods and times after the preparation of mesenchymal stem cells, for use in cellular therapy. Ten samples of mesenchymal stem cells were used for quantification of total cells, viable and nonviable cells, and the samples conditioned in 72 sterile syringes containing 0.30 ml of 1x PBS, plus cells. The syringes were randomly divided into three environments Refrigerator, Styrofoam box with ice, Styrofoam box without ice, and at predetermined times viability tests were performed using the Trypan blue method. It was observed that in the environments "Refrigerator" and "Styrofoam box with ice" cell viability remained higher than 90% at all times with the exception of moment T48, already, in the environment "Styrofoam box" viability remained below 90% in moments T8, T10, T12, T24, and T48. It was found that temperatures from 2ºC to 8ºC are considered best for conditioning the cells during transportation, maintaining good cell viability for 24 hours.
Protocolo de cultivo; caracterização; diferenciação; citometria; antígenos de superfície; logística; transplante celular; Azul de Tripan; diferenciação celular.; Culture protocol; characterization; differentiation; cytometry; surface antigens; logistics; cellular transplantation; Trypan Blue; cellular differentiation.
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VETTESES
Idioma:
Pt
Ano de publicação:
2016
Tipo de documento:
Thesis